核内チロシンリン酸化シグナルによるクロマチン構造制御メカニズムの解明

阐明核酪氨酸磷酸化信号控制染色质结构的机制

基本信息

项目摘要

本年度はin vivo, in vitroの両方向からの解析を行なった。in vivoの解析では私が以前、核内チロシンリン酸化基質として同定したKAP1のノックアウトマウスを用いた解析を行なった。具体的には、造血幹細胞の分化を解析する系を利用して調べた。造血幹細胞の増殖分化においてKAP1はおよびチロシンリン酸化シグナルは重要な役割をもっている。KAP1ノックアウトマウスの造血幹細胞をセルソーターを用いて分取し、野生型のKAP1とチロシンリン酸化されない変異体をレトロウィルスベクターのインフェクションによって発現させ、レシピエントマウスに移植し、その分化増殖への影響を解析した。In vitroの解析では、核内チロシン基質群の中でヒストン修飾に関わる分子として A-kinase anchoring protein 8 (AKAP8) に着目した。AKAP8はクロマチンや核マトリクスに結合し、ヒストン脱アセチル化酵素であるhistone deacetylase 3 (HDAC3) などの分子のリクルートに関わっていることが知られている。昨年度の解析からAKAP8はチロシンキナーゼによってチロシンリン酸化されることで、クロマチンや核マトリクスとの結合が弱められることが示唆された。AKAP8のチロシンリン酸化による機能変化を解析するために、私はAKAP8の中でチロシンリン酸化されるチロシン残基をチロシンリン酸化されないフェニルアラニンに置換した変異体の作製を行なった。複数の部位のチロシンを置換した変異体では結合の変化がキャンセル出来た。このことから、AKAP8の結合の変化は一か所のチロシン残基のリン酸化によって制御されているのではなく、複数の部位のチロシンリン酸化によって制御されていることがわかった。
This year, we will conduct an analysis of the direction of "in vivo, in vitro". In vivo, the analysis of the former, nuclear and acidic matrix was carried out at the same time. The differentiation of hematopoietic stem cells was analyzed and regulated by specific methods. Hematopoietic stem cell proliferation and differentiation in KAP1 is not the same as the proliferation and differentiation in KAP1. To analyze the effects of KAP 1 on the development, transplantation and differentiation of hematopoietic stem cells in the wild type. In vitro analysis, molecular modification in the nuclear matrix group is related to A-kinase anchoring protein 8 (AKAP8). AKAP8 is a compound of histone deacetylase 3 (HDAC3), which is a compound of AKAP8 and HDAC3. Last year's analysis showed that AKAP8 was a weak link between the two. AKAP8's amino acid residues were analyzed and replaced by amino acid residues in AKAP8. The number of parts of the body is different from that of the body. The binding of AKAP8 to the protein is regulated by the regulation of the amino acid residues.

项目成果

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核内チロシンリン酸化を介したクロマチン構造変換の分子メカニズムの解析
核酪氨酸磷酸化染色质结构转变的分子机制分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    久保田 翔;森井真理子;幸 龍三郎;山口弘美;山口憲孝;青山和正;久家貴寿;朝長 毅;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
Lyn tyrosine kinase promotes silencing of ATM-dependent checkpoint signaling during recovery from DNA double-strand breaks.
Lyn 酪氨酸激酶在 DNA 双链断裂恢复过程中促进 ATM 依赖性检查点信号的沉默。
  • DOI:
    10.1016/j.bbrc.2014.08.113
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Fukumoto;Y.;Kuki;K.;Morii;M.;Miura;T.;Honda;T.;Ishibashi;K.;Hasegawa;H.;Kubota;S.;Ide;Y.;Yamaguchi;N.-t.;Nakayama;Y.;and Yamaguchi;N.
  • 通讯作者:
    N.
Src型チロシンキナーゼによるBaxを介したアポトーシス誘導の制御.
Src 型酪氨酸激酶对 Bax 介导的细胞凋亡诱导的调节。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森井真理子;久保田 翔;本田拓也;青山和正;幸 龍三郎;米谷詩織;山口憲孝;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
AKAP8のチロシンリン酸化を介したクロマチンとの結合阻害.
通过酪氨酸磷酸化抑制 AKAP8 与染色质的结合。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    久保田 翔;森井真理子;青山和正;幸 龍三郎;山口弘美;久家貴寿;朝長 毅;山口憲孝;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
Role for Tyrosine Phosphorylation of A-kinase Anchoring Protein 8 (AKAP8) in Its Dissociation from Chromatin and the Nuclear Matrix
  • DOI:
    10.1074/jbc.m115.643882
  • 发表时间:
    2015-04-24
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.8
  • 作者:
    Kubota, Sho;Morii, Mariko;Yamaguchi, Naoto
  • 通讯作者:
    Yamaguchi, Naoto
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中條暖奈;石橋賢一;青山和正;久保田 翔;長谷川仁美;柴崎美里;山口弘美;山口憲孝;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    本田拓也;中山祐治;添田修平;阿部紘平;森井真理子;山口千尋;鈴木 亘;久保田 翔;青山和正;山口憲孝;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
ErbB4によるチロシンリン酸化を介したヒストンメチル化制御.
ErbB4 通过酪氨酸磷酸化调节组蛋白甲基化。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中條暖奈;石橋賢一;青山和正;久保田 翔;長谷川仁美;柴崎美里;山口憲孝;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
c-Ablによるチロシンリン酸化シグナルを介したTGF-βシグナル調節機構の解析.
c-Abl酪氨酸磷酸化信号介导的TGF-β信号调控机制分析。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    幸 龍三郎;山口憲孝;帯刀 隆;青山和正;久保田 翔;山口直人.
  • 通讯作者:
    山口直人.
【最新生理活性脂質研究-実験手法、基礎的知識とその応用-】(第1章)技術編TGFα切断を用いたGPCR活性化の新しい検出法(解説)
【最新生物活性脂质研究-实验方法、基础知识及其应用-】(第一章)技术版利用TGFα裂解检测GPCR激活的新方法(解说)
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    福本泰典;九鬼 和雅;森井 真理子;三浦 崇仁;本田 拓也;石橋 賢一;長谷川仁美;久保田 翔;井出 雄大;山口憲孝;中山 祐治;山口 直人;井上飛鳥
  • 通讯作者:
    井上飛鳥

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