权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

網羅的オルガネラ解析ツールＲａｂを用いた新規ＲＮＡサイレンシング制御機構の解明

使用综合细胞器分析工具 Rab 阐明新型 RNA 沉默控制机制

基本信息

批准号：
14J10075
负责人：
小林穂高
金额：
$ 7.49万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J10075/
关键词：
RNAサイレンシング RISC Argonaute miRNA オルガネラオートファゴソームオートファジー Rab

项目摘要

RNAサイレンシングとは、20~30塩基程度の小分子RNAによって、そのRNAと相補的な塩基配列を持つ遺伝子の発現が抑制される現象である。小分子RNAの一つであるmicroRNA（miRNA）はヒトゲノムに約2,000種類もコードされており、タンパク質をコードする全遺伝子の半数以上の発現を制御すると考えられている。miRNAはArgonauteと呼ばれるタンパク質に取り込まれ、RNA-induced silencing complex（RISC）と呼ばれる複合体を形成することで、RNAサイレンシングを実行する。近年、RISCが後期エンドソームと呼ばれるオルガネラに局在するとRNAサイレンシングが促進されることが報告され、RISCとオルガネラの関係性が注目を集めた。しかし、RISCが局在するオルガネラの全容や、RISCがオルガネラに局在する意義は依然として明らかでない。そこで、本研究では、Rabファミリータンパク質を網羅的オルガネラ解析ツールとして用いることで、オルガネラを介した新規RNAサイレンシング制御機構を解明することを目指した。平成26・27年度の研究により、miRNAと結合しない状態のArgonauteはオートファジーによって分解されることを見出した。平成28年度の研究では、このArgonaute分解機構について詳細に解析し、（ⅰ）miRNA非結合型のArgonauteは選択的にユビキチン化を受けること、（ⅱ）この選択的ユビキチン化はRINGフィンガー型E3リガーゼTakotsuboが担うこと、（ⅲ）Takotsubo をノックダウンするとTranscriptomeレベルでmRNAの発現上昇が認められること等を見出した。以上のように、本研究ではオートファジー（すなわち、オートファゴソームとリソソーム）によるmiRNA非結合型Argonauteの選択的分解を介した新規RNAサイレンシング制御機構を見出すことに成功した。また、「ユビキチン化されたArgonauteは、何故プロテアソームではなくオートファゴソームによって認識されるのか」という新たな課題を得ることが出来た。

RNA サイレンシングとは, small molecule RNA によって with 20~30 hydroxyl groups,そのRNA and と complementary な塩 group arrangement を hold つ伝子の発 appear が suppress される phenomenon である. Small molecule RNAの一つであるmicroRNA (miRNA)はヒトゲノムにAbout 2,000 speciesもコードされており, タンパク性をコードする全 remain 伝子の more than half of the の発appears をcontrol すると卡えられている. RNA-induced silencing complex (RISC) complex (RISC), complex (RISC) complex, RNA (RNA). In recent years, the late-stage RISC technology has been developing in the RNA industry.シングがpromote されることがreport され, RISCとオルガネラのrelational がattentionをSETめた.しかし, RISC bureau in するオルガネラの全能や, RISC がオルガネラに bureau in するmeaning はstill として明らかでない.そこで, this study では, Rabbit ファミリータンパクquality をオルガネラ analysis ツールとしていることで, オルガネラををした新码RNAサイレンシングcontrol organization を解明することを目 Refers to した. Heisei 26 and 27 year's research and analysis, miRNA binding and state analysis, Argonaute analysis and decomposition analysis. Research on FY2018, Detailed analysis of Argonaute decomposition mechanism, (ⅰ) miRNA non-binding type Argonaute selection method The ユビキチン化はRING フィンガーType E3リガーゼTakotsuboが聆こと、（ⅲ）TakotsuboをノックダウンするとTranscriptome レベルでmRNA の発 appear to rise がcognize められることwait を见出した. The above-mentioned のように, this study ではオートファジー（すなわち、オートファゴソームとリソソーム）によるmiRNA is not The decomposition of the combined type Argonaute's selection is a new regulation RNA control mechanism and the success is achieved.また、「ユビキチン化されたArgonauteは、Why プロテアソームではなくオートファゴソームによってKnowing されるのか」という新たな题目をget ることが出た.