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犬輪部由来上皮細胞株の増殖維持機構の解明と他家移植による角膜再生療法への応用

阐明犬角膜缘上皮细胞系的生长维持机制及其在同种异体移植角膜再生治疗中的应用

基本信息

批准号：
15J10878
负责人：
森田希輔
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

今年度はまず、犬角膜上皮細胞の増殖能維持機構の探索を行った。犬角膜上皮初代培養細胞および本研究で樹立した犬角膜上皮細胞株の培養上清をウサギ角膜上皮細胞に添加したところ、増殖を促進する傾向を認めた。一方、ウサギ角膜上皮細胞の培養上清を犬角膜上皮細胞（第１継代細胞）および細胞株に添加したところ、増殖が有意に抑制された。また遺伝子発現解析では、犬角膜上皮初代培養細胞と細胞株で角膜上皮の増殖促進作用を有する複数のEGF受容体リガンドが高発現していた。一方、ウサギ角膜上皮初代培養細胞では増殖抑制作用を有するCTGFとTGF-β2の高発現を認めた。以上より犬角膜上皮細胞の増殖能維持機構として、増殖促進因子の自己分泌もしくは増殖抑制因子の低分泌が示唆された。また、犬膜上皮細胞株から作製した細胞シートを犬角膜損傷モデルへ他家移植し、移植の安全性と有効性を検討した。シートは無縫合で移植し、対照群では損傷作製のみ行った。術後、移植群では早期の上皮化が得られたが、その後、上皮のターンオーバーが原因と考えられるシートの縮小とシート周囲のフルオレセイン陽性領域を認めた。対照群と比較し、移植群では角膜混濁が軽度であった。移植後7日目に角膜組織を採材し、病理組織学的評価に供した。細胞シート中の上皮の配列は不正であったが、移植部直下の角膜実質では、対照群と比較し炎症細胞の浸潤、角膜混濁の原因となる筋線維芽細胞の増殖が軽度であった。細胞シートへの明らかな拒絶反応所見は認められなかった。安全性についてはより長期の観察が必要であるが、細胞株由来シートの移植は、上皮組織の早期再建や角膜混濁の軽減が期待され、角膜再生療法として有用であると考えられた。

This year, the colonization of canine corneal epithelial cells and canine corneal epithelial cells can be maintained. Primary culture of canine corneal epithelium in this study, the supernatant of canine corneal epithelial cell line was cultured, the epithelial cell of canine cornea was added to the cell line of canine corneal epithelium, and the proliferation was promoted. On the one hand, the corneal epithelial cells were cultured in the supernatant of canine corneal epithelial cells (the first generation of corneal epithelial cells). The cells were added to the cell line, and the cells were deliberately suppressed. The primary culture of canine corneal epithelium has the effect of promoting the proliferation of primary cultured canine corneal epithelium. there is a complex number of EGF receptors. On the other hand, the primary culture of corneal epithelium showed a high level of CTGFTGF-β 2. The cellular colonization of the corneal epithelium of the above dogs can maintain the growth of the organ, and the colonization promoting factor secretes by itself and the low secretion of the growth inhibitory factor indicates that it is instigated. The cell lines of canine membrane epithelium and canine membrane epithelium were divided into two groups: canine cornea, canine cornea and canine cornea. Let's talk about how to transplant and follow the group to make sure that we don't have to. After the transplantation, the early stage of epithelialization of the transplantation group, the epithelialization of the transplanted group, the epithelialization, the epithelialization and the epithelialization of the transplantation group. The light group was compared, and the transplantation group was divided into corneal mixed group and corneal mixed group. The histological and histopathological changes of corneal tissue and histology were observed 7 days after transplantation. In the cell culture, the epithelial cells were arranged with abnormal epithelial cells, the corneas were placed directly below the transplantation site, the inflammatory cells were immersed, and the causes of corneal mixing were compared. Please tell me that you don't know what you've seen. Safety test: long-term monitoring of essential factors, origin of cell lines, transplantation of cell lines, early reconstruction of epithelial tissue, corneal mixed tissue reconstruction, corneal regeneration, and corneal regeneration.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

増殖因子およびフィーダー細胞非存在下での培養による犬輪部由来角膜上皮細胞株の樹立とその性状解析

无生长因子和饲养细胞培养犬角膜缘来源的角膜上皮细胞系的建立及其特性分析

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
0
作者：
森田希輔;藤田直己;林本考緒道;都築圭子;中川貴之;西村亮平
通讯作者：
西村亮平

無フィーダーで長期継代維持された犬輪部由来角膜上皮細胞の性状解析

长期无饲养条件下维持的犬角膜缘来源的角膜上皮细胞的特性分析

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
0
作者：
森田希輔;藤田直己;阿部桃子;都築圭子;中川貴之;西村亮平
通讯作者：
西村亮平

犬輪部由来角膜上皮細胞の増殖能維持機構の検討

犬角膜缘来源的角膜上皮细胞维持增殖能力的机制研究

DOI：
发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
0
作者：
Maresuke M.;Fujita N.;Takahashi A.;Nam ER.;Yui S.;Chung CS.;Kawahara N.;Lin HY.;Tsuzuki K.;Nakagawa T.;Nishimura R.;森田希輔，藤田直己，佐伯亘平，林本考緒道，都築圭子，中川貴之，西村亮平
通讯作者：
森田希輔，藤田直己，佐伯亘平，林本考緒道，都築圭子，中川貴之，西村亮平

犬角膜上皮細胞の種特異性と再生医療への応用

犬角膜上皮细胞的物种特异性及其在再生医学中的应用