Biochemische Charakterisierung der Glycosyltransferase WbpL von Pseudomonas aeruginosa als potentielles Target für neue Antiinfektiva

铜绿假单胞菌糖基转移酶 WbpL 作为新型抗感染药物潜在靶点的生化特征

• 批准号: 5438246
• 负责人: Dr. Michael Ramm
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Molekulare und Angewandte Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5438246?language=en
• 关键词: Biochemische; Charakterisierung; der; Glycosyltransferase; WbpL

Lipopolysaccharide (LPS) sind wichtige Virulenzfaktoren, die in der Zellwand Gram-negativer Bakterien verankert sind. Bei Pseudomonas aeruginosa werden zwei Typen von LPS gebildet, die bei Mukoviszidose-assoziierten Lungeninfektionen eine entscheidende Rolle im Krankheitsgeschehen spielen. Enzyme, die die Synthese des als O-Antigen bezeichnenen Polysaccharid-Anteils der LPS katalysieren, sind vielversprechende Targets für neue Antiinfektiva, die der extremen Resistenzentwicklung bei P. aeruginosa entgegenwirken könnten. Ein Schlüsselenzym der O-Antigensynthese ist die Glyxosyltransferase WbpL. Es initiiert die Bildung lipidgekoppelter Polysaccharide durch Übertragung eines Zuckerphosphates auf Undecaprenylphosphat. Eine spezifische Hemmung von WbpL führt zur Einlagerung O-Antigenfreier, "rauher" LPS in die bakterielle Zellwand. Die Erreger sind damit avirulent und können von der wirtseigenen Immunabwehr eliminiert werden. WbpL wird in E.coli kloniert und erstmalig (über)exprimiert. Zur Ermittlung der Enzymfunktion wird Undecaprenylphosphat aus Bakterien präpariert und auch chemisch synthetisiert. Die katalysierte Reaktion wird in vitro nachvollzogen und das Spektrum der von WvpL übertragenen Clycosylreste ermittelt. Mit Hilfe neu entwickelter Assays wird das Enzym biochemisch charakterisiert und ein Inhibitoren-Screening durchgeführt. Glycosyliertes Undecaprenylpyrophosphat wird als Ausgangsstoff für die Identifizierung und Charakterisierung der nachgeschalteten Glycosyltransferasen WbpXYZ isoliert.

内毒素(LPS)引起病毒感染，死于革兰氏阴性杆菌。铜绿假单胞菌是一种典型的von LPS型细菌，属于肺炎克雷伯菌属。酶，并合成这些O-抗原多糖类抗内毒素，以此为靶标，最极端的抗药性是铜绿假单胞菌。糖基转移酶WbpL。这是一种十一碳二烯基磷酸酯的多糖。Eine Spezifische hemmung von WbpL führt zur Einlagerung O-antigenfreier，“rauher”LPS in die bakterielle Zellwand.它是无毒的，也是无毒的。WbpL在E.colikLoniert和erstmalig(über)exmiert中存在。Zur Ermittlung der EnzymFunction With十一碳二烯基磷酸酯Aus Bakterien Präpariert和一种化学合成剂。[中英文摘要]nachvollzogen和das Spektrum der von WvpLübertragenen Clycoylrest e ermittelt.麻省理工学院的生物化学特性和抑制素的筛选。十一碳烯基焦磷酸糖基转移酶WbpXYZ等橄榄石。