Biochemische Charakterisierung der Glycosyltransferase WbpL von Pseudomonas aeruginosa als potentielles Target für neue Antiinfektiva

脂多糖（LPS）在Zellwand革兰氏阴性杆菌病中死亡。铜绿假单胞菌对LPS感染的影响，对小鼠肺感染的影响，对小鼠肺感染的影响。酶，die die Synthese des als O-Antigen bezeichnenen polysaccharides - anteils der LPS catalsieren, sind vielversprechende Targets, rneue Antiinfektiva, die der extremen Resistenzentwicklung bei P. aeruginosa entgegenwirken könnten。in schl<s:1>自旋酶der o -抗原合成物与Glyxosyltransferase。其起始物为：Bildung lipidgekoppelter多糖durch Übertragung eines zuckerphosp磷酸盐或十一戊烯基磷酸。[2] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [3]病毒学研究进展与进展können von der wirtseigenen immunabwehreliminiert werden。WbpL在大肠杆菌kloniert和erstmalig （ber）实验中的应用。Zur Ermittlung的酶功能与十一戊烯基磷酸（Bakterien präpariert）及其他化学合成。离体nachvolzogen的催化反应及WvpL <s:1> bertragenen Clycosylreste的光谱分析。麻省理工学院（Mit）最新的酶生化特性及酶抑制剂筛选技术——<s:1> hrt。糖基转移酶WbpXYZ的鉴定与特性研究[j]。

Lipopolysaccharide (LPS) sind wichtige Virulenzfaktoren, die in der Zellwand Gram-negativer Bakterien verankert sind. Bei Pseudomonas aeruginosa werden zwei Typen von LPS gebildet, die bei Mukoviszidose-assoziierten Lungeninfektionen eine entscheidende Rolle im Krankheitsgeschehen spielen. Enzyme, die die Synthese des als O-Antigen bezeichnenen Polysaccharid-Anteils der LPS katalysieren, sind vielversprechende Targets für neue Antiinfektiva, die der extremen Resistenzentwicklung bei P. aeruginosa entgegenwirken könnten. Ein Schlüsselenzym der O-Antigensynthese ist die Glyxosyltransferase WbpL. Es initiiert die Bildung lipidgekoppelter Polysaccharide durch Übertragung eines Zuckerphosphates auf Undecaprenylphosphat. Eine spezifische Hemmung von WbpL führt zur Einlagerung O-Antigenfreier, "rauher" LPS in die bakterielle Zellwand. Die Erreger sind damit avirulent und können von der wirtseigenen Immunabwehr eliminiert werden. WbpL wird in E.coli kloniert und erstmalig (über)exprimiert. Zur Ermittlung der Enzymfunktion wird Undecaprenylphosphat aus Bakterien präpariert und auch chemisch synthetisiert. Die katalysierte Reaktion wird in vitro nachvollzogen und das Spektrum der von WvpL übertragenen Clycosylreste ermittelt. Mit Hilfe neu entwickelter Assays wird das Enzym biochemisch charakterisiert und ein Inhibitoren-Screening durchgeführt. Glycosyliertes Undecaprenylpyrophosphat wird als Ausgangsstoff für die Identifizierung und Charakterisierung der nachgeschalteten Glycosyltransferasen WbpXYZ isoliert.