Biochemische Charakterisierung der Glycosyltransferase WbpL von Pseudomonas aeruginosa als potentielles Target für neue Antiinfektiva

铜绿假单胞菌糖基转移酶 WbpL 作为新型抗感染药物潜在靶点的生化特征

• 批准号: 5438246
• 负责人: Dr. Michael Ramm
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Molekulare und Angewandte Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5438246?language=en
• 关键词: Biochemische; Charakterisierung; der; Glycosyltransferase; WbpL

Lipopolysaccharide (LPS) sind wichtige Virulenzfaktoren, die in der Zellwand Gram-negativer Bakterien verankert sind. Bei Pseudomonas aeruginosa werden zwei Typen von LPS gebildet, die bei Mukoviszidose-assoziierten Lungeninfektionen eine entscheidende Rolle im Krankheitsgeschehen spielen. Enzyme, die die Synthese des als O-Antigen bezeichnenen Polysaccharid-Anteils der LPS katalysieren, sind vielversprechende Targets für neue Antiinfektiva, die der extremen Resistenzentwicklung bei P. aeruginosa entgegenwirken könnten. Ein Schlüsselenzym der O-Antigensynthese ist die Glyxosyltransferase WbpL. Es initiiert die Bildung lipidgekoppelter Polysaccharide durch Übertragung eines Zuckerphosphates auf Undecaprenylphosphat. Eine spezifische Hemmung von WbpL führt zur Einlagerung O-Antigenfreier, "rauher" LPS in die bakterielle Zellwand. Die Erreger sind damit avirulent und können von der wirtseigenen Immunabwehr eliminiert werden. WbpL wird in E.coli kloniert und erstmalig (über)exprimiert. Zur Ermittlung der Enzymfunktion wird Undecaprenylphosphat aus Bakterien präpariert und auch chemisch synthetisiert. Die katalysierte Reaktion wird in vitro nachvollzogen und das Spektrum der von WvpL übertragenen Clycosylreste ermittelt. Mit Hilfe neu entwickelter Assays wird das Enzym biochemisch charakterisiert und ein Inhibitoren-Screening durchgeführt. Glycosyliertes Undecaprenylpyrophosphat wird als Ausgangsstoff für die Identifizierung und Charakterisierung der nachgeschalteten Glycosyltransferasen WbpXYZ isoliert.

脂多糖（LPS）sind Wichtige virulenzfaktoren，死于der zellwand革兰氏神经bakterien verankert。 Bei Pseudomonas Aeruginosa Werden，死于LPS，死于Mukoviszidose-Assoziieren，死于2月，死于Entscheidende Rolle Im Krankeitsgesgesgehen Spielen。酶，死于多糖 - 抗抗原的lps katalysieren的酶，不仅是为了抗丰富，而且是为了缓解抗药性。 O-抗原的靶标是在糖基转移酶WBPL中死亡的靶标。 Bildung lipidgekoppelter多糖durchübertragungungeines zuckerphopphates auf duredcapeprenylphophophosphat的靶标。 Eine Spezifische Hemmung von wbplführtZur einlagerung o-antigenfreier的目标，Die Bakterielle Zellwand中的Rauher” LPS。 Die Erreger的Sind Dammit Avirulen undKönnenvon de de der Seigenen von deermérich。 wbpl野生大肠杆菌中的野生动物（über）Exprimiert。 Zur ermittlung der酶funktion野生decapeprenylphosphat aus bakterienpräpariertund auch chemisch合成剂。 die katalysierte reaktion野生在体外nachvollzogen und das spektrum der von glycosylansylansferase孤立株。在事务状态建立的糖基转移酶分离酶。在事务状态建立的糖基转移酶分离酶。