Functional analysis of Blow and Kette during the second wave of myoblast fusion during embryogenesis of Drosophila melanogaster

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In höheren Organismen ist es ein typisches Merkmal der Bewegungsmuskulatur, dass die einzelnen Myotuben Synzytien darstellen. Bei Drosophila entstehen die Myotuben durch eine zweistufige Fusion von Founder-/Precursor-Zellen mit fusionskompetenten Myoblasten (Fems). Die zweite Fusionswelle wird durch Rolling pebbles eingeleitet. Hier analysieren wir die nachgeschalteten Moleküle. Im Mittelpunkt des Antrages stehen Blow, ein PH-Domänen-Protein, und Kette, ein Regulator des Aktin-Zytoskeletts, sowie deren Interaktionspartner in der zweiten Fusionsstufe. Das zytoplasmatische Protein Blow wird für das Fortschreiten der Fusion nach dem Präfusionskomplex benötigt, während Kette zur vollständigen Ausbildung der elektronendichten Plaques kurz vor der Membranauflösung nötig ist. Wir analysieren, ob die Blow-Aktivität über Phosphorylierung reguliert wird, indem wir zwei Kandidaten-Kinasen untersuchen. Um weitere fusionsrelevante Proteine zu finden, analysieren wir weitere potentielle Interaktionspartner von Blow und Kette. Dies wird neue Erkenntnisse zum Fusionsmechanismus liefern. Komplementiert werden diese Analysen durch einen Fusionsassay in Drosophila und in myogenen Zellen von Wirbeltieren.