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油糧酵母を用いて褐藻から油脂への新しい炭素の流れを創造するための基盤研究

使用油酵母创造从褐藻到油和脂肪的新碳流的基础研究

基本信息

批准号：
22K05411
负责人：
河井重幸
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Ishikawa Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

我が国の海域を含む世界の海域では膨大な量の炭素が褐藻（コンブやアカモクなど）として海中に固定されている。本研究の目的は、褐藻および褐藻に含まれるアルギン酸とマンニトールから高い効率で油脂を生産できる油糧酵母Yarrowia lipolytica（Yli）株を構築し、そのYli株を用いて褐藻から油脂を生産する油脂生産系を確立すること、すなわちYli株を用いて褐藻から油脂への新しい炭素の流れを創造することである。既に、DEH（褐藻の主要多糖アルギン酸がエンド型およびエキソ型アルギン酸リアーゼで分解されて生成するモノウロン酸）資化に必要な4つの遺伝子をYli Po1f株に導入することによりDEHを資化できるようにした代謝改変Yli株を構築済みである。目的達成のための基盤研究として本年度は、①代謝改変Yli株におけるDEH代謝の律速段階の特定とDEH資化能の向上、②Yli株のマンニトール代謝機序の解明、③エンド型アルギン酸リアーゼのYli株での分泌発現とYli株で最も多く分泌されるエキソ型アルギン酸リアーゼの特定を試みた。①に関しては、DEH資化に必要な4つの遺伝子の各々を代謝改変Yli株で追加発現させたところ、若干のDEH資化能の向上を確認した。②に関しては、RNA-seq解析により、マンニトールの代謝に必要なマンニトールデヒドロゲナーゼ候補遺伝子とマンニトール輸送体候補遺伝子を見いだした。③に関しては、エンド型アルギン酸リアーゼA1-Iの分泌発現プラスミド（XPR2シグナル配列を含む）を導入したYli株を構築し、本株を用いてYli株におけるA1-Iの細胞外発現に成功した。A1-Iの細胞外発現にXPR2シグナル配列が効果的であることが明らかとなった。他方、エキソ型アルギン酸リアーゼ（Atu3025、oalC6、AlyA5）各遺伝子の分泌発現プラスミドを導入したYli株を構築した。

The sea area of our country includes the sea area of the world, the amount of carbon, brown algae, carbon, brown algae, brown algae In this study, brown algae, brown The main polysaccharides of brown algae, DEH (the main polysaccharides of brown algae, the main polysaccharides Objective to establish a genetic basis for this year's study. This year, the first generation of Yli strain modified DEH gene DEH generation showed that the specific DEH activation was up, the sequence of 2Yli strain was clear, and the secretion of Yli strain was the highest in this year's Yli strain. 1. It is necessary to increase the availability of health care and DEH data by adding additional information to the Yli plant for each generation change, and a number of DEH data can be updated to confirm the impact. 2. Please tell me that it is necessary to send a message to your child. The RNA-seq parser will tell you that it is necessary to send your body. 3. In this study, the XPR2 strain was introduced into the Yli strain, and the Yli strain was used to detect the success in the extracellular domain. The extracellular components of A1MUR I