OGR1オルソログを利用した微量金属特異性を感知するOGR1のアミノ酸配列の決定

使用 OGR1 直向同源物确定感知痕量金属特异性的 OGR1 氨基酸序列

• 批准号: 22K06049
• 负责人: 戸村 秀明
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Meiji University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06049/
• 关键词: OGR1; 微量金属

OGR1は細胞外pHの低下によって活性化するプロトン感知性GPCRである。これまでのOGR1の研究は、がん組織などpHが低下している組織で精力的になされてきた。一方、ヒト、マウスのOGR1が、プロトンに加えて微量金属によっても活性化される金属感知性GPCRであることが2015年に見いだされた。本研究では「OGR1が、いままで不明であった微量金属の感知、制御を司る分子であるのか、またそうであるのならOGR1は生理的、病態生理的にどのような機能を担っているのか」を実験及び解析により解明するため、まず「OGR1オルソログ間のキメラ受容体を利用して、金属の特異性を決定するOGR1のアミノ酸配列」を特定することを目的としている。本年度は、ヒトOGR1とラットOGR1間でのOGR1応答の比較解析を行った。OGR1の活性化は、HEK細胞に各OGR1を発現させ、OGR1の活性化の程度をレポーターアッセイの測定系を用いて測定した。そして各OGR1の活性化応答のEC50値を測定し、応答性の違いを定量化した。その結果、ラットOGR1はヒトOGR1と比べて、微量金属刺激による応答が右にシフトしていた。そこでこのシフトにラットOGR1のどの領域が関与しているのかを次に調べた。ヒトとラットOGR1間でキメラ受容体を作成した。そしてこのキメラ受容体の微量金属刺激による活性化を測定した結果、ラットの細胞外領域をもつキメラ受容体で活性化応答の減弱が観察された。この結果は、種特異的な活性化を司るアミノ酸配列がOGR1の細胞外領域に存在する可能性を示唆している。

OGR1 <s:1> low extracellular pH <s:1> activated するプロト <s:1> sensory GPCRである. こ れ ま で の OGR1 の research は, が ん organization な ど low pH が し て い る organization で energy に な さ れ て き た. Party, ヒ ト, マ ウ ス の OGR1 が, プ ロ ト ン に plus え て trace metals に よ っ て も activeness さ れ る metal perceptual GPCR で あ る こ と が 2015 に see い だ さ れ た. This study で は "OGR1 が, い ま ま で unknown で あ っ た trace metals の perception, suppression を department る molecular で あ る の か, ま た そ う で あ る の な ら OGR1 は physiological, pathological physiology に ど の よ う な function を bear っ て い る の か" を be 験 and analytical に び よ り interpret す る た め, ま ず "OGR1 オ ル ソ ロ グ between の キ メ ラ capacity Body を using し て, metal の specificity を decided す る OGR1 の ア ミ ノ acid with columns "を specific す る こ と を purpose と し て い る. This year, った, ヒトOGR1とラットOGR1 で <s:1> OGR1応 answer: comparison and analysis of を row った. OGR1 の activeness は, HEK cells に OGR1 を 発 now さ せ, OGR1 の activeness degree の を レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ の is を measure い て determination し た. Youdaoplaceholder0 て て each OGR1 <s:1> activation 応 answer <s:1> EC50 value を determination を, 応 answer <s:1> violation を を quantification た た. そ の results, ラ ッ ト OGR1 は ヒ ト OGR1 と than べ て, trace metal stimulation に よ る 応 が right answer に シ フ ト し て い た. そ こ で こ の シ フ ト に ラ ッ ト OGR1 の ど の field が masato and し て い る の か に を time adjustable べ た. The ヒトとラットOGR1 でキメラ acceptor を is made into た た. そ し て こ の キ メ ラ under let body の trace metal に よ る activeness を determination し た results, ラ ッ ト の extracellular domain を も つ キ メ ラ by let body で activeness 応 a weakened の が 観 examine さ れ た. こ の results は, species specific な activeness を department る ア ミ ノ acid with column が OGR1 の extracellular domain に exist す を る possibility in stopping し て い る.

项目成果

明治大学農学部生命科学科

明治大学农学院生命科学系

Mn2+応答におけるラット OGR1の N末アミノ酸配列の役割

大鼠 OGR1 N 端氨基酸序列在 Mn2+ 反应中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 田中朝陽;戸村秀明
• 通讯作者: 戸村秀明

Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) enhances cAMP production in human TDAG8-expressing cells

乙二胺四乙酸 (EDTA) 增强人 TDAG8 表达细胞中 cAMP 的产生

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2022.07.110
• 发表时间: 2022
• 期刊: Biochemical and Biophysical Research Communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Deai Masahito;Oya Rin;Saso Naosi;Tanaka Asahi;Uchida Izumi;Miyake Yuta;Tachihara Ryo;Otsugu Miku;Mine Ayumi;Sato Koichi;Tomura Hideaki
• 通讯作者: Tomura Hideaki

金属刺激によるヒト気道平滑筋細胞のインターロイキン-6産生とプロトン感知性OGR1受容体の関与

金属刺激和质子感应 OGR1 受体参与诱导人气道平滑肌细胞产生白细胞介素 6

• 发表时间: 2022
• 作者: 佐藤幸市;門脇麻衣子;石塚 全;ほか
• 通讯作者: ほか

OGR1機能欠損ゼブラフィッシュの骨組織の解析

OGR1功能缺陷斑马鱼骨组织分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 三宅雄太;戸村秀明
• 通讯作者: 戸村秀明