骨芽細胞による破骨細胞活性化の加齢に伴う変化の解析

成骨细胞活化破骨细胞的年龄相关变化分析

• 批准号: 08838031
• 负责人: 腰原 康子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08838031/
• 关键词: 骨芽細胞; 破骨細胞; 骨吸収; 細胞接触; 老化; ヒト

骨芽細胞が産生する破骨細胞活性化因子は、単独では弱い活性しか示さないが、複数の因子が加わることによって活性化が著しく亢進される。そこでヒト破骨細胞のヒトの骨芽細胞による活性化が加齢に伴なってどのように変化するのかを次のように明らかにした。これまでヒトの破骨細胞は、材料である骨髄が入手しずらいことや、前駆細胞からの形成が困難等からほとんど調べられていなかった。本研究においてまずヒト破骨細胞を効率よく形成する系の確立を試みた結果、骨髄より単核細胞を分離して10^7個の細胞を8cm^2ディッシュに播種して10^<-8>M1,25(OH)_2D_3および20%馬血清を含むα-MEMで2週間培養すると大量の破骨細胞が形成されることが判明した。つぎに材料が少ないことから少量の破骨細胞で感度よく吸収活性を調べる系を検討した。骨片では僅かな吸収しか得られなかった。しかし、骨塩成分であるヒドキシアパタイトを被覆した石英ガラス(osteologic)の中央に50μlの破骨細胞の懸濁液を置いて培養したところ、1,000-30,000個の細胞数に依存してまた1-12日の培養日数に依存して吸収活性が増加した。このosteologicにヒトI型コラーゲンを被覆して骨片に近い状態にして、骨芽細胞による破骨細胞の骨吸収調節を検討したところ破骨細胞と骨芽細胞の接触がない状態では吸収活性の亢進は見られずむしろ抑制された。一方両者の細胞が接触できる系では骨芽細胞によって骨吸収が亢進された。donor ageによる骨芽細胞の骨吸収促進作用の強さの順は20才,65才,88才であった。非常に若い10才のdonorの骨芽細胞はむしろ吸収を抑制した。これらのことから高齢者の骨芽細胞は骨吸収亢進作用が弱く骨代謝が低い可能性が示唆された。しかし若齢および閉経後の患者の骨芽細胞ではin vivoで見られるように骨代謝が高いことが示唆された。加齢における骨芽細胞による骨吸収活性の調節の変化機序を解明することが今後の課題である。

Bone が bud cells produce す る osteoclast activation factor は, 単 alone で は weakly い し か shown さ な い が, plural の factor が わ る こ と に よ っ て activeness が the し く hyperthyroidism さ れ る. そ こ で ヒ ト osteoclast の ヒ ト の bone bud cells に よ る activeness が plus 齢 に with な っ て ど の よ う に variations change す る の か を times の よ う に Ming ら か に し た. こ れ ま で ヒ ト の osteoclast は, material で あ る bone marrow with が し ず ら い こ と や, former 駆 cells か ら の forming difficulties が か ら ほ と ん ど adjustable べ ら れ て い な か っ た. This study に お い て ま ず ヒ ト osteoclast を sharper rate よ く form す る is の establish を try み た results, bone marrow よ り 単 nuclear cell separation を し て 10 ^ 7 の cells を 8 cm ^ 2 デ ィ ッ シ ュ に seeding し て 10 ^ < - > 8 M1, 25 (OH) _2D_3 お よ び contains 20% horse serum を む alpha MEM で between 2 weeks training す る と Measure the formation of osteoclasts が される とが とが determine the た. つ ぎ に less material が な い こ と か ら small の osteoclast で sensitivity よ く 収 absorption activity を adjustment べ る department を beg し 検 た. The bone fragment で で only the な is absorbed by the な られな った った. し か し, bone salt composition で あ る ヒ ド キ シ ア パ タ イ ト を coating し た quartz ガ ラ ス (osteologic) の central に 50 mu l の osteoclast の suspension を buy い て cultivate し た と こ ろ, 1000-30000 の cells number に dependent し て ま た の training days 1-12 に dependent し て 収 active absorption が raised plus し た. こ の osteologic に ヒ ト type I コ ラ ー ゲ ン を coating し て bone に nearly い state に し て bud cells, bone に よ る osteoclast の bone absorption 収 adjust を beg し 検 た と こ ろ osteoclast と bone bud cells の contact が な い state で は 収 active absorption の hyperthyroidism は see ら れ ず む し ろ inhibit さ れ た. When the <s:1> cells が come into contact with で る る る the で が bone bud cells によって the bone aspiration が is hyperactive された. The donor ageによる bone bud cell <s:1> bone resorption promoting effect <s:1> strong さ <e:1> <s:1> cation-dependent による 20,65,88 であった. Very に if the に 10 is the <s:1> donor <s:1> bone bud cell む ろ ろ aspiration を inhibition <s:1> た. こ れ ら の こ と か ら high 齢 の bone bud cells は bone 収 hyperfunction absorption が weak が く bone metabolism and low possibility い が in business さ れ た. If し か し 齢 お よ び closed 経 の bone bud cells in patients with の で は in vivo で see ら れ る よ う に bone metabolism が high い こ と が in stopping さ れ た. To clarify the <s:1> regulatory <e:1> sequence of <s:1> changes in the bone resorption activity of 齢における bone bud cells による and the する <s:1> とが とが future research topics である.

项目成果

腰原康子: "骨形成,in vitro石灰化におけるビタミンK_2の作用機序" Osteoprpsis Japan. 4(2). 191-200 (1996)

Yasuko Koshihara：“维生素 K_2 在骨形成和体外矿化中的作用机制”Osteoprpsis Japan 4(2) (1996)。

腰原康子: "ビタミンKと骨代謝" 日本油化学会誌. 45(5). 435-443 (1996)

Yasuko Koshihara：“维生素 K 和骨代谢”日本石油化学家协会杂志 45(5) (1996)。

Koshihara,Y.Hoshi,K.,Ishibashi,H.,Shiraki,M.,: "Vitamin K_2 promotes lα,25 (OH) _2D_3-induced mineralization in humanpeciosteal ostooblosts" Calcified Tissue International. 59. 466-473 (1996)

Koshihara, Y. Hoshi, K.、Ishibashi, H.、Shiraki, M.，：“维生素 K_2 促进人类骨骨成骨细胞中 lα,25 (OH) _2D_3 诱导的矿化”Calcified Tissue International，59. 466-473 (1996)。 ）

Sana Y.,Kikuchi,K.Tadangk,Hoshi,K.,Koshihara,Y': "Stimutaneous determination of menaquino n-4 and its metabolite in human osteoblasts by high performance liquid chromatography/atmosphere pressuro chemical ionization" Analytical Sciences. 13. 67-73 (1997)

Sana Y.，Kikuchi，K.Tadangk，Hoshi，K.，Koshihara，Y：“通过高效液相色谱/大气压化学电离快速测定人成骨细胞中的 menaquino n-4 及其代谢物”分析科学。