Molekulare und funktionelle Charakterisierung von Proteasedefekten, die mit neurodegenerativen Erkrankungen im Kindesalter assoziiert sind

与儿童神经退行性疾病相关的蛋白酶缺陷的分子和功能特征

• 批准号: 71002056
• 负责人: Professor Dr. Robert Steinfeld
• 金额: --
• 依托单位: Kinderspital Zürich
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2007-12-31 至 2012-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/71002056?language=en
• 关键词: Molekulare; und; funktionelle; Charakterisierung; von

Der Funktionsausfall unterschiedlicher lysosomaler Proteasen kann zu einer Neurodegeneration des Gehirns führen und mit der Akkumulation von charakteristischen Lipopigmenteinschlüssen in den Lysosomen einhergehen. Die hieraus resultierenden Erkrankungen werden zu den neuronalen Ceroid-Lipofuszinosen (NCL) gezählt. Beim Menschen führen Defekte der Tripeptidyl-Peptidase I (TPP-I) oder von Cathepsin D (CatD) zu einem fortschreitenden bereits im Kleinkindesalter beginnenden Verlust der motorischen und kognitiven Fähigkeiten sowie der Sehkraft. Im Tiermodell führen zusätzlich zum TPP-I- oder CatD-Defekt ein kombinierter Verlust von Cathepsin B und L sowie ein Ausfall von Cathepsin F zu einer NCL-ähnlichen Erkrankung. Allen NCL-Formen gemeinsam ist der selektive Untergang neuronaler Zellen und retinaler Rezeptorzellen, der sich als kortikale und cerebelläre Hirnatrophie sowie retinale Degeneration manifestiert. Dabei ist bisher nicht verstanden, warum der Funktionsausfall ubiquitär exprimierter Proteasen zu einem spezifisch neurodegenerativen Krankheitsbild führt. Im beantragten Projekt sollen die spezifisch neurodegenerativen Mechanismen, die aus einer Protease-Defizienz resultieren, untersucht werden. Neu entdeckte Protease-Mutanten sowie andere mit einer NCL-Erkrankung assoziierte mutante Proteine sollen exprimiert und ihre vollständigen oder partiellen Funktionsverluste charakterisiert werden. Weiterhin soll die Wirkung der Protease-Defizienz auf grundlegende zelluläre Vorgänge wie Teilungsrate, Energiehaushalt und Apoptoserate ermittelt werden. Schließlich sollen molekulare Interaktionspartner von TPP-I und CatD durch massenspektrometrische Analysen von Co-Affinitäts-gereinigten Proteinen identifiziert werden. Die Validität der identifizierten Interaktionen soll durch ergänzende Methoden wie Immunpräzipitation und Kolokalisation mittels Immunofluoreszenz-Mikroskopie belegt werden. Zur Klärung möglicher Interaktionen oder synergistischer Effekte von TPP-I und CatD sollen cln2 +/- Mäuse mit ctsd +/- Mäusen gekreuzt werden und die Auswirkungen auf Krankheitsverlauf und Überlebenszeit in den kombinierten Mausmodellen erforscht werden.

Der Funktionsausfall unterschiedlicher lysosomer蛋白酶kann zu einer Gehirns fhren神经退行性变和drmit de cdakululation von charakteristischen脂质色素llssen in den Lysosomen hergehen。神经磷脂-脂褐素（NCL）： gezählt。bem Menschen fhren defkte der tripeptide - peptidase I (TPP-I) der von Cathepsin D (CatD) zu einem fortschreitenden bereits im Kleinkindesalter beginnenden Verlust der motorischen and cognnitiven Fähigkeiten sowie der Sehkraft。[3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [4] [4] [4]Allen nhl - formen gemeinsam是一种选择性下神经细胞和视网膜细胞，这种细胞也有kortikale和cerebelläre视网膜变性表现。大北大学学报（自然科学版），中华大学学报（自然科学版），神经退行性krkheitsbild <s:1> hrt。研究方向：神经退行性变性机制研究项目，研究结果：蛋白质蛋白酶缺失，未发表。研究了新发现的蛋白酶突变体，并对NCL-Erkrankung联合蛋白突变体进行了实验研究，并对vollständigen蛋白突变体的功能特征进行了研究。weiterin soll die Wirkung der Protease-Defizienz auf grundlegende zelluläre Vorgänge weilungsate, energiehaushe and apoptosis ermittelet werden。schließ ßlich sollen molecular interaktionpartner von pp - i and CatD durch mass - spectretrische Analysen von Co-Affinitäts-gereinigten protein identifiierert werden。死亡Validität der identifizierten Interaktionen soll durch ergänzende方法Immunpräzipitation和Kolokalisation mitels免疫荧光-显微镜带。Zur Klärung möglicher ttp - 1与CatD - sollen cln2 +/- Mäuse mit ctsd +/- Mäusen gekreuzt werden and die Auswirkungen auf Krankheitsverlauf und Überlebenszeit in den kombinierten Mausmodellen erforscht werden。