Vergleichende Charakterisierung einer auf Alveolaten beschränkten Proteinfamilie, den "Inner Membrane Complex" Proteinen

一种新的蛋白质类在疟原虫和弓形虫的鉴定中发挥了重要作用，它与“内膜复合物”相关，并与IMC-蛋白质结合。我们对所有的泡囊动物（甲藻、纤毛虫、顶复门）中的蛋白质进行了鉴定，并对测序结果进行了分析。最近几年，我建立了IMC-蛋白质数据库，并对不同的Alveolaten进行了生物分析，以确定一个可重复使用的氨基酸序列，以及这些蛋白质的特征。通过免疫荧光分析，确定了IMC中的一般肽-抗体。该Antikörper韦尔登可用于研究Zielkompartiment、Reifung和Interaktion的靶向作用，以及与Zellfaktoren的相互作用。Zusätzlich韦尔登我们将对Apicomplexa（疟原虫和弓形虫）和Ciliaten（四膜虫）进行快速和稳定的转化，以进一步了解它们。为了使前mRNA在甲藻中的表达更加稳定，我们计划对甲藻的转化方案进行修改和建立。Zusammengefasst strebt dieser Antrag die Untersuchung des vereinenden Merkmals der Alveolaten and fokussiert dabei auf die IMC-Proteine，um ein Verständnis für die Ursache ihres so erfolgreichenden and hoch variablen Lebensstiles zu entwickeln.

Eine neue Klasse von Proteinen wurde jüngst in Plasmodium und Toxoplasma identifiziert, welche mit dem ‚inner membrane complex‘ assoziert sind und entsprechend IMC-Proteine genannt wurden. Wir haben diese Proteine in allen Alveolaten (Dinozoa, Ciliata, Apicomplexa) identifizieren können, für die Sequenzdaten vorhanden sind und planen eine vergleichende Analyse der IMC-Proteine und des Kompartiments. Bisherige Analysen einer im letzten Jahr von mir etablierten IMC-Protein Datenbank diverser Alveolaten hat zur Identifikation einer konservierten, repetitiven Aminosäurensequenz geführt, welche diese Proteine charakterisiert. Auf dieser Erkenntnis generierte Peptid- Antikörper lokalisieren den IMC mehrerer untersuchter Alveolaten durch Immunofluoreszenz- Assays. Diese Antikörper werden wir zur Untersuchung des Targetings zum Zielkompartiment, der Reifung und Interaktion der Proteine mit anderen Zellfaktoren einsetzen. Zusätzlich werden wir existierende und etablierte Transformationsprotokolle für Apicomplexa (Plasmodium and Toxoplasma) und Ciliaten (Tetrahymena) verwenden, um die oben erwähnten Untersuchungen zu unterstützen. Unter der Berücksichtigung aktueller Erkenntnisse über die pre-mRNA Prozessierung in Dinoflagellaten, planen wir ein bisher unzureichendes Transformationsprotokoll für Dinoflagellaten zu modifizieren und zu etablieren. Zusammengefasst strebt dieser Antrag die Untersuchung des vereinenden Merkmals der Alveolaten an und fokussiert dabei auf die IMC-Proteine, um ein Verständnis für die Ursache ihres so erfolgreichenden und hoch variablen Lebensstiles zu entwickeln.