Utilizing ageing-related clonal haematopoesisfor effective CAR-T cell therapy

利用衰老相关的克隆造血作用进行有效的 CAR-T 细胞治疗

基本信息

批准号：
22K19474
负责人：
井上聡
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19474/
关键词：
CAR=T細胞ゲノム異常クローン性造血加齢

项目摘要

加齢に伴い末梢血T細胞において蓄積される遺伝子変異を同定し、これらの変異遺伝子を野生型T細胞に付加することにより、その長期生存能を高め、同細胞から作製される抗腫瘍T細胞が持続的な治療効果を誘導できるという仮説を立て、研究を進めている。本研究計画では、本年度は、末梢血T細胞における加齢に伴う遺伝子変異を検出し、加齢に伴う遺伝子変異(群)が正常T細胞機能の長期生存能に寄与するか否かを解析した。健常人T細胞をCD34やCD38などの細胞表面マーカーなどで分画し、低頻度のアレル頻度ながら認められるゲノム異常の検出に成功した。これらの濃縮により、変異頻度（VAF)の増加が認められ、低頻度ながら正常末梢血中の遺伝子変異の検出に成功した。しかしながら、より多くの細胞表面マーカーを活用することで更なる変異頻度の増加が認められるケースも散見されており、現在、信頼性と効率面で優れた分画プロトコールの確立に向けて条件検討中である。加齢性クローン造血に好発する遺伝子変異として有名なTET2遺伝子やDNMT3A遺伝子をノックアウトさせたCAR-T細胞は、期待通り、顕著な分化障害による未分化性の亢進が認められた。新規の遺伝子変異として、低頻度ながら変異が認められたDUSP22について、CAR-T細胞の機能解析を行った。その結果、DUSP22-KO CAR-T細胞は、増殖能の増加が認められた。しかしながらT細胞分化、サイトカイン産生、グランザイムBなどの細胞障害性因子の産生に影響が認められなかった。現在、DUSP22以外の新規の加齢性クローン造血関連遺伝子変異を対象に、CAR-T細胞の機能解析（分化障害、サイトカイン産生、細胞障害性、細胞増殖）を検証している。

我们目前正在通过鉴定随着年龄的增长在外周血T细胞中积累的基因突变，并将这些突变基因添加到野生型T细胞中，从而改善其长期活力，并从同一细胞产生的抗肿瘤T细胞会诱导持续的治疗作用。在这项研究项目中，今年我们检测到外周血T细胞中与年龄相关的基因突变，并分析了与年龄相关的基因突变（组）是否有助于正常T细胞功能的长期生存能力。使用细胞表面标记（例如CD34和CD38）将健康的人类T细胞分离，并成功检测到尽管等位基因频率低，但仍发现了基因组异常。这些富集显示突变频率的增加（VAF），尽管经常被检测到，但我们能够检测正常外周血中的基因突变。但是，在许多情况下，通过利用更多的细胞表面标记来增加突变频率，并且目前正在研究条件以建立一种在可靠性和效率方面非常出色的分级方案。如预期的那样，将TET2和DNMT3A基因淘汰的CAR-T细胞以与年龄相关的克隆造血性很常见而闻名的TET2和DNMT3A基因，由于显着的分化障碍，未分化的未分化显着增加。 CAR-T细胞的功能分析是在DUSP22上进行的，DUSP22的突变是不常见的，作为一种新的基因突变。结果，DUSP22-KO CAR-T细胞显示出增殖能力的增加。然而，未观察到对T细胞分化，细胞因子产生或细胞毒性因子（例如GrenzymeB）的产生影响。目前，我们正在研究CAR-T细胞的功能分析（分化障碍，细胞因子产生，细胞毒性，细胞毒性，细胞增殖），靶向新的年龄与年龄相关的链lone蛋白血液相关的血压与基因相关的基因突变。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Genetic ablation of PRDM1 in antitumor T cells enhances therapeutic efficacy of adoptive immunotherapy

抗肿瘤 T 细胞中 PRDM1 的基因消除可增强过继免疫疗法的疗效

DOI：
10.1182/blood.2021012714
发表时间：
2022
期刊：
Blood
影响因子：
20.3
作者：
Toshiaki Yoshikawa;Zhiwen Wu;Satoshi Inoue;Hitomi Kasuya;Hirokazu Matsushita;Yusuke Takahashi;Hiroaki Kuroda;Waki Hosoda;Shiro Suzuki;Yuki Kagoya
通讯作者：
Yuki Kagoya

CD83 expression characterizes precursor exhausted T cell population.

CD83 表达是前体耗尽 T 细胞群的特征。