权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

三日熱マラリア原虫の実用的in vitro培養系の確立に向けた開発研究

旨在建立实用的间日疟原虫体外培养系统的开发研究

基本信息

批准号：
22K19441
负责人：
金子修
金额：
$ 4.08万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19441/
关键词：
マラリア培養 Plasmodium vivax Plasmodium cynomolgi Plasmodium knowlesi

项目摘要

三日熱マラリア原虫はヒトの幼若赤血球に侵入し増殖するが、大量のヒト幼若赤血球をルーチンに入手することは困難であるため実用的な培養系が存在しない。そこで、熱帯熱マラリア原虫のヒト成熟赤血球を認識するリガンドを三日熱マラリア原虫に導入することで、ヒト成熟赤血球に侵入し、発育することができる三日熱マラリア原虫の作出を目指す。この原虫を用いることで、本原虫の実用的な培養系が確立できると考える。初年度はP. knowlesiを用いて作製するリガンド発現プラスミドの評価とP. knowlesiにおける表現型を検討することを計画した。成熟ヒト赤血球を認識するリガンド一つの遺伝子読み枠を熱帯熱マラリア原虫のゲノムDNAから増幅し、三日熱マラリア原虫RBLプロモーターにて発現するコンストラクトを構築した。実験室でサル赤血球を用いて継代維持しているPlasmodium knowlesi培養株にリガンド発現プラスミドを導入実験を行った。もう一つのリガンドについてプラスミドデザインを終了した。一方、次年度に予定していたPlasmodium cynomolgiを使う実験のために、長崎大学で継代培養をする系の立ち上げを進めた。当初、本原虫の継代培養ができなかったため、さまざまな培養条件を検討した結果、使用するサルの赤血球（アカゲザル、カニクイザル、ニホンザル）のいずれでも問題なく増殖するが、培地に加える血清成分の種類が原虫が増殖できるか否かを左右する重要な因子であることを見出した。培養系が確立したため、次年度に計画していたP. cynomolgiへのEBA175発現プラスミドの導入を行った。

3 days ago, when the parasite invaded and propagated, a large number of immature erythrocytes were found in the culture system. The mature red blood cells are recognized by the heat transfer protozoa and introduced into the mature red blood cells. The mature red blood cells are invaded and developed by the heat transfer protozoa. The protozoan culture system for protozoa was established. The first year P. Knowlesi is used to control the development of a variety of products. knowlesi phenotype Mature erythrocytes are recognized by a variety of genes, such as DNA, DNA, and RBL. In the laboratory, the cells were maintained in the medium, and the Plasmodium knowlesi cells were introduced into the medium. The most important thing is that we should not lose sight of each other. The first year, the second year, the third year, the fourth year, the fourth year, the fourth At the beginning, the culture conditions of protozoa were discussed. The results showed that the use of red blood cells (red blood cells, red blood cells, red blood cells) was an important factor in the growth of protozoa. The cultivation system was established and the next year's plan was established. Cynomolgi EBA175 is now available for import.