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Identification and Functional Characterization of Babesia bovis Exportome

牛巴贝斯虫出口组的鉴定和功能表征

基本信息

批准号：
16F16105
负责人：
金子修
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16F16105/
关键词：
バベシア輸送タンパク質遺伝子組換え輸送タンパク質量分析

项目摘要

細胞内寄生原虫はその宿主細胞を改変することにより、栄養の取り込みや免疫回避など寄生適応を行っているとされる。バベシア原虫はダニ媒介性の赤血球寄生原虫であり、ウシを始め家畜に多大な経済的被害を与えている。特にウシのバベシア原虫Babesia bovisは病原性が高く、感染赤血球表面に発現する原虫由来のVESAタンパク質がその病原性に関わるとされるが、それ以外の赤血球改変分子については殆ど分かっていない。本研究ではB. bovis感染赤血球表面に発現する原虫由来タンパク質を同定し、それら分子がどのように輸送され、どのような機能を担っているのか明らかにすることを目的としている。2017年度は初年度質量分析により同定された候補分子を基に過発現する原虫を作製し、実際に候補分子が赤血球側に局在するか確認を行った。まず、候補分子について陰性対照群との比較により非特異的に検出されたと思われる分子を除いたうえで、ドメインや膜貫通領域、シグナル配列の有無を推定し、赤血球側に発現が予想される分子の絞り込みを行った。その上で、合計17の候補分子について過発現原虫を作製し、その局在について過発現タンパク質に付加したタグ配列を間接蛍光抗体法により検出することで解析を行った。その結果、多重コピー遺伝子にコードされていることが知られているSMORFタンパク質が宿主赤血球側にも局在していることが明らかになったほか、これまで全く報告の無い新規タンパク質が少なくとも3種類、原虫感染赤血球の表面近傍に局在することが明らかとなった。現在、本研究で同定された新規赤血球改変分子について機能解析を進めている。

Intracellular parasites change the host cell's immune system, protect the host cell from parasites, and protect the host cell from parasites. The parasite is a vector of erythrocytic parasites. In particular, the pathogen Babesia bovis is highly pathogenic and appears on the surface of infected red blood cells. The origin of the parasite is related to the pathogenicity of VESA molecules. This study was conducted by B. Bovis infection occurs on the surface of erythrocytes from the origin of protozoa, from the identity of molecules, from the transport of molecules, from the function of protozoa, from the purpose of protozoa, and from the expression of protozoa. In 2017, the quality analysis of the candidate molecules was carried out at the same time, and the candidate molecules were confirmed at the same time In addition, the candidate molecules are detected in the negative contrast group, compared with the non-specific molecules, detected in the membrane penetration field, detected in the red blood cell side, and detected in the molecule. A total of 17 candidate molecules were detected and analyzed by indirect light antibody method. As a result, SMORF cells were detected near the host red blood cell surface, and all three species were detected near the host red blood cell surface. Now, this study is to determine the new regulation of erythrocyte modification molecules, and to analyze the function of erythrocyte modification molecules.