細胞分化運命決定の遺伝子選択メカニズムの解明

阐明决定细胞分化命运的基因选择机制

• 批准号: 13J04024
• 负责人: 原田 哲仁
• 金额: $ 2.76万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J04024/
• 关键词: ヒストンバリアント; エピジェネティクス; 細胞分化

本年度は、H3.3と結合する分化責任因子の同定を試みた。内在性H3.3抗体による因子の同定と外来性のGFP-H3.3と結合する因子との2パターンを用いて共通する因子を探し出すことを予定していたが、ヒストン修飾状態に依存しないGFPタグを利用することにより結合タンパク質を網羅的に同定することを優先させた。遺伝子集積が起こっている未分化段階におけるH3.3-GFP発現C2C12細胞を大量に用意し、細胞質およびヌクレオソーム画分を抽出し、GFP抗体により複合体精製を行った。次に、質量分析計により構成タンパク質の同定を試みた結果、細胞質画分ではヒストンシャペロンがヌクレオソーム画分ではヒストン脱アセチル化酵素が多く検出されたものの大半が機能既知のものであった。現在は、得られた質量分析データを詳細に検証し、新規機能を持ちそうな候補因子を精査中である。質量分析解析の際に、複数の未知ヒストンバリアントが存在することが示唆された。その後の調査から、マウス未知ヒストンH3バリアント14種類、ヒト3種類を新たに同定した。(Epigenetics & Chromatin, 2015)。これら様々なヒストンH3バリアントが、骨格筋分化におけるジーンクラスタリングを介した選択的な遺伝子の転写制御に必要であることを示唆しており、当初の計画より複雑化していることが明らかとなった。そこで、本研究課題の成果は、研究会のシンポジウムおよび雑誌の執筆等で発表を行った。さらに、平成27年度より科学研究費補助金若手Bの研究課題「骨格筋分化における新規ヒストンH3バリアントH3mm7の遺伝子選択機構の解明」に取り組んでおり、今後、これらヒストンH3バリアントの骨格筋分化におけるジーンクラスタリングを介した選択的な遺伝子の転写制御機構の解明も行っていく予定である。

This year, H3.3 and combination of differentiation responsibility factors were tested. Intrinsic H3.3 antibody binding factors, exogenous GFP-H3.3 binding factors, and 2 binding factors. H3.3-GFP produced C2C12 cells in large quantities, cytoplasmic and molecular fractions were extracted, GFP antibody complexes were purified. Second, the quality analysis of the composition of the quality of the test results, cytoplasmic analysis of the composition of Now, get quality analysis, check in detail, check in new function, check in candidate factor. During mass analysis, a number of unknown variables are present. After the investigation, it is unknown whether the H3 type is different from the H3 type. (Epigenetics & Chromatin, 2015)。This is the first time that a person has ever been involved in a project. The results of this research project are presented in the paper. In 2007, Heisei 27 Science Research Grant Wakata B selected a research project entitled "New Rules for the Development of Bone Muscle Differentiation H3/H3

项目成果

骨格筋分化能はヒストンH3バリアントの取り込みによって制御される

骨骼肌分化潜力由组蛋白 H3 变体掺入控制

• 发表时间: 2014
• 作者: 原田 哲仁;前原 一満;佐藤 優子;木村 宏;大川 恭行
• 通讯作者: 大川 恭行

Tissue-specific expression of histone H3 variants diversified after species separation.

• DOI: 10.1186/s13072-015-0027-3
• 发表时间: 2015
• 期刊: Epigenetics & chromatin
• 影响因子: 3.9
• 作者: Maehara K;Harada A;Sato Y;Matsumoto M;Nakayama KI;Kimura H;Ohkawa Y
• 通讯作者: Ohkawa Y

Establishment of Neutralizing Rat Monoclonal Antibodies for Fibroblast Growth Factor-2

• DOI: 10.1089/mab.2013.0085
• 发表时间: 2014-08-01
• 期刊: Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy
• 作者: Tanaka, Masako;Yamaguchi, Maki;Ohkawa, Yasuyuki
• 通讯作者: Ohkawa, Yasuyuki

The linage potential of skeletal muscle is dictated by histone H3 variants

骨骼肌的谱系潜力由组蛋白 H3 变体决定

• 发表时间: 2013
• 作者: Akihito Harada;Kazumitsu Maehara;Yuko Sato;Hiroshi Kimura ;Yasuyuki Ohkawa;Yohei Watanabe;原田哲仁
• 通讯作者: 原田哲仁

Hsc70 contributes to cancer cell survival by preventing Rab1A degradation under stress conditions.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0096785
• 发表时间: 2014
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Tanaka M;Mun S;Harada A;Ohkawa Y;Inagaki A;Sano S;Takahashi K;Izumi Y;Osada-Oka M;Wanibuchi H;Yamagata M;Yukimura T;Miura K;Shiota M;Iwao H
• 通讯作者: Iwao H