Rôle des microparticules produites par les cellules mésenchymateuses

细胞间微粒产物的规律

• 批准号: RGPIN-2014-04404
• 负责人: Moulin, Véronique
• 金额: $ 2.55万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Discovery Grants Program - Individual
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2016-01-01 至 2017-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=611015
• 关键词: le; des; microparticules; produites; par

Mon programme de recherche a pour objectif de comprendre les interactions existantes entre les différentes cellules d’un tissu solide. Les microparticules sont de petites vésicules produites par les cellules dont le rôle est encore peu connu. L’hypothèse de ce projet est que les cellules utilisent les vésicules comme un moyen de communiquer entre elles. Mes recherches tendent donc à mieux comprendre à quoi servent les microparticules dans un contexte normal en utilisant un tissu, la peau, en cours de remodelage comme mécanisme modèle. Lors du remodelage tissulaire, des cellules spécialisées apparaissent, les myofibroblastes. Nous avons montré que les myofibroblastes produisaient des microparticules qui stimulent la croissance de différents types cellulaires. Mes objectifs sont de mieux comprendre les processus se déroulant lors du remodelage tissulaire sous l'action des microparticules. Basé sur les résultats obtenus grâce à une analyse de l’ensemble de protéines contenues dans les microparticules, les mécanismes étudiés seront la formation des vaisseaux sanguins dans les tissus (angiogenèse) ainsi que les changements de phénotypes des fibroblastes et myofibroblastes. L’angiogenèse sera explorée grâce à différents modèles in vitro permettant d’étudier un à un les mécanismes complexes de la formation des capillaires sanguins. La programmation génique des cellules endothéliales microvasculaires en présence des microparticules sera étudiée par biopuces suivi d’une validation par q-PCR de l’ARNm et western-blot/ELISA des protéines. Les mécanismes d’accrochage des microparticules sur les cellules aboutissant à l’augmentation de la croissance des cellules endothéliales seront étudiés. La migration des cellules endothéliales en présence des microparticules sera suivie grâce à deux modèles complémentaires de culture cellulaire alors que la formation de réseaux tubulaires sera analysée grâce aux modèles utilisant des matrices extracellulaires propices à la formation de capillaires. Les microparticules pouvant agir sur la sensibilité des cellules à mourir en réponse à certains facteurs, une étude sera effectuée sur des cellules endothéliales cultivées en monocouche. Une fois la réponse des cellules endothéliales considérée, une étude des facteurs (protéines ou ARN) présents dans les microparticules responsables des différents mécanismes de l’angiogenèse sera effectuée. Les résultats de l’étude des protéines contenues dans les microparticules ont montré que les microparticules produites par les myofibroblastes contiennent des protéines impliquées dans de nombreux mécanismes autres que l’angiogenèse. Nos résultats ayant montré que les myofibroblastes pouvaient également répondre à la présence de microparticules, notre hypothèse est que les microparticules pourraient jouer un rôle sur le phénotype des fibroblastes et myofibroblastes eux-mêmes. La réponse des cellules mésenchymateuses aux microparticules sera approfondie vis à vis de la production de protéines de la matrice extracellulaire, de leur protection contre l’apoptose et de la différenciation des fibroblastes en myofibroblastes. Les travaux proposés vont permettre de bien caractériser ce nouveau mode de communication entre les cellules.

Mon programme de recherche a pour objectif de comprendre les interactions existantes entre les différentes cellules d'un tissue solide.这些微粒是小血管通过细胞产生的，它们的作用并不重要。该项目的假设是，细胞利用血管，就像在细胞间交流一样。我们研究的趋势是，在一个正常的环境中，利用一个组织、一个皮，在类似机械模型的改造过程中，如何使用微粒。 在组织重塑、出现特殊细胞和肌纤维母细胞方面。我们认为肌成纤维细胞产生的微粒刺激了不同类型细胞的增殖。我们的目标是更好地理解微粒作用下组织重塑的过程。通过对微粒中蛋白质总量的分析，研究了成纤维细胞和成肌纤维细胞表型的变化，以及组织中血管生成的机制。 L'angiogenèse sera explorée grâce à différents modèles in vitro permettant d'étudier un à un les mécanismes complex de la formation des capillaires sanguins. La programmation génique des cellules endothéliales microvasculaires en présence des microparticles sera étudiée par biopuces suivi d'une validation par q-PCR de l'ARNm et western-blot/ELISA des Protéines. Les mécanismes d'accrochage des microparticules sur les cellules aboutissant à l'augmentation de la crosissance des cellules endothéliales seront étudiés.在存在微粒的情况下，内皮细胞的迁移可通过两种细胞培养补充模型进行，也可通过使用细胞外基质促进毛细血管形成的模型分析肾小管网络的形成。这些微粒能够刺激细胞的敏感性，从而对某些因素产生反应，因此，我们研究了它们对培养的内皮细胞的作用。考虑到内皮细胞的反应，对不同机制的血管生成血清中的因子（蛋白质或ARN）进行研究。 这些结果表明，肌成纤维细胞产生的微粒中含有蛋白，这些蛋白在其他血管生成机制中也含有。我们的结论是肌成纤维细胞可以对微粒的存在做出反应，我们的假设是微粒可以在成纤维细胞和肌成纤维细胞的表型中发挥作用。微颗粒对间充质细胞的反应与细胞外基质蛋白质的产生、抗纤维化的保护作用以及成纤维细胞在肌成纤维细胞中的分化相似。 这些工作建议在小房间之间采用新的通信方式。