Rôle des microparticules produites par les cellules mésenchymateuses

点击翻译按钮获取中文摘要

Mon programme de recherche a pour objectif de comprendre les interactions existantes entre les différentes cellules d’un tissu solide. Les microparticules sont de petites vésicules produites par les cellules dont le rôle est encore peu connu. L’hypothèse de ce projet est que les cellules utilisent les vésicules comme un moyen de communiquer entre elles. Mes recherches tendent donc à mieux comprendre à quoi servent les microparticules dans un contexte normal en utilisant un tissu, la peau, en cours de remodelage comme mécanisme modèle. Lors du remodelage tissulaire, des cellules spécialisées apparaissent, les myofibroblastes. Nous avons montré que les myofibroblastes produisaient des microparticules qui stimulent la croissance de différents types cellulaires. Mes objectifs sont de mieux comprendre les processus se déroulant lors du remodelage tissulaire sous l'action des microparticules. Basé sur les résultats obtenus grâce à une analyse de l’ensemble de protéines contenues dans les microparticules, les mécanismes étudiés seront la formation des vaisseaux sanguins dans les tissus (angiogenèse) ainsi que les changements de phénotypes des fibroblastes et myofibroblastes. L’angiogenèse sera explorée grâce à différents modèles in vitro permettant d’étudier un à un les mécanismes complexes de la formation des capillaires sanguins. La programmation génique des cellules endothéliales microvasculaires en présence des microparticules sera étudiée par biopuces suivi d’une validation par q-PCR de l’ARNm et western-blot/ELISA des protéines. Les mécanismes d’accrochage des microparticules sur les cellules aboutissant à l’augmentation de la croissance des cellules endothéliales seront étudiés. La migration des cellules endothéliales en présence des microparticules sera suivie grâce à deux modèles complémentaires de culture cellulaire alors que la formation de réseaux tubulaires sera analysée grâce aux modèles utilisant des matrices extracellulaires propices à la formation de capillaires. Les microparticules pouvant agir sur la sensibilité des cellules à mourir en réponse à certains facteurs, une étude sera effectuée sur des cellules endothéliales cultivées en monocouche. Une fois la réponse des cellules endothéliales considérée, une étude des facteurs (protéines ou ARN) présents dans les microparticules responsables des différents mécanismes de l’angiogenèse sera effectuée.Les résultats de l’étude des protéines contenues dans les microparticules ont montré que les microparticules produites par les myofibroblastes contiennent des protéines impliquées dans de nombreux mécanismes autres que l’angiogenèse. Nos résultats ayant montré que les myofibroblastes pouvaient également répondre à la présence de microparticules, notre hypothèse est que les microparticules pourraient jouer un rôle sur le phénotype des fibroblastes et myofibroblastes eux-mêmes. La réponse des cellules mésenchymateuses aux microparticules sera approfondie vis à vis de la production de protéines de la matrice extracellulaire, de leur protection contre l’apoptose et de la différenciation des fibroblastes en myofibroblastes. Les travaux proposés vont permettre de bien caractériser ce nouveau mode de communication entre les cellules.