Action des microvésicules dans les tissus solides

固体组织中微血管的作用

• 批准号: RGPIN-2019-06500
• 负责人: Moulin, Véronique
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Discovery Grants Program - Individual
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2022-01-01 至 2023-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=748779
• 关键词: Action; des; microv; sicules; dans

Mon programme de recherche a pour objectif de comprendre les interactions existantes entre les cellules d'un tissu. A court terme, mon but est de déterminer le rôle des microvésicules (MV), un moyen de communication intercellulaire, dans un contexte normal en utilisant un tissu en cours de remodelage comme modèle. 1- Action des MV a) Sur les cellules inflammatoires : Nous traiterons des cellules mononuclées de sang avec des MV afin d'évaluer leur capacité à stimuler la différenciation, l'activation et la croissance des différentes populations de cellules immunitaires. Les molécules (protéines et miARN) à l'origine de ces mécanismes seront étudiées par utilisation d'anticorps neutralisant ou en inhibant la production de la molécule par les cellules. b) Sur l'apoptose : Dans le remodelage tissulaire, l'apoptose est fortement régulée que ce soit au niveau des cellules immunitaires, des cellules endothéliales ou mésenchymateuses. Les MV pourraient avoir un rôle protecteur dans l'apoptose cellulaire ou induire celle-ci. Des cellules endothéliales et mésenchymateuses et des macrophages seront traités avec différents inducteurs de l'apoptose en présence ou absence de MV et le taux d'apoptose induites sera évalué par fluorométrie et TUNEL. Les molécules (protéines et miARN) potentiellement à l'origine de l'action apoptotique dans les MV seront étudiées. 2- Etude de la diffusion des MV dans un tissu solide : Les MV détectées dans le sang proviennent cependant de cellules présentes dans les tissus solides. Inversement, les MV présentes dans le sang peuvent jouer un rôle sur les cellules des tissus. La diffusion des MV dans les tissus est cependant inconnue. a) Migration des MV à travers la barrière endothéliale : Notre hypothèse est que le passage des MV entre le sang et les tissus s'effectue au niveau des cellules endothéliales, et plus particulièrement au niveau du réseau lymphatique. Des cellules endothéliales sanguines ou lymphatiques seront cultivées dans des Transwellr. La modification de la perméabilité de l'endothélium par les MV sera évaluée avec du FITC-dextran. La transcytose et/ou la diminution des jonctions intercellulaires, seront étudiées par ajout d'inhibiteurs, par cytométrie en flux et immunohistologie. b) Devenir des MV dans les tissus solides : Notre hypothèse est que les MV peuvent se lier à la matrice extracellulaire. Des MV fluorescentes seront ajoutées sur un film de protéines matricielles, puis rincées avant observation. Le mécanisme de liaison sera étudié grâce à une dégradation enzymatique des protéines ou à l'ajout d'anticorps neutralisants. La diffusion des MV dans des gels de collagène ou de fibrine contenant des MV fluorescentes et des cellules sera évaluée au microscope à fluorescence Time lapse. Nous évaluerons la distance parcourue par les MV vers les cellules cibles et inversement. Les travaux proposés vont permettre de bien caractériser ce nouveau mode de communication entre les cellules dans les tissus.

我的研究计划旨在了解组织中细胞之间存在的相互作用。这是一个法庭术语，但它是微泡 (MV) 作用的决定者，是细胞间通讯的最佳方式，在正常的环境中使用组织在商业模式重塑过程中。 1- MV 的作用 a) 对细胞炎症的作用：细胞单核的神经特征与 MV 的作用有关，它具有刺激分化、激活和免疫细胞不同群体的作用。分子（蛋白质和分子）是利用反军团中和或抑制细胞分子生产的机制的起源。 b) 关于细胞凋亡：在组织重塑中，细胞凋亡是细胞免疫、细胞内皮或间质细胞的强化调节。 MV 是细胞凋亡或细胞凋亡保护者的角色。细胞内皮细胞和间充质细胞和巨噬细胞的血清特征具有不同的凋亡诱导因素，如存在或缺乏 MV 和缺乏细胞凋亡诱导血清，可通过荧光法和 TUNEL 进行评估。 Les molécules (protéines et miARN) potentiellement à l'origin de l'action apoptotique dans MV seront étudiées. 2- MV 在固体组织中扩散的练习：在固体组织中检测到细胞的 MV。相反，MV 呈现在 le sang peuvent jouer un rôle sur les cellules des tissus 上。 MV 的扩散在组织中是不连续的。 a) MV 穿过内皮屏障的迁移：并非假设 MV 进入内皮细胞和内皮细胞组织的作用，以及淋巴组织的特殊作用。 Transwellr 培养的细胞内皮细胞或淋巴液。内皮细胞渗透性的修饰与 FITC-葡聚糖的 MV 血清评估有关。细胞转胞酶和细胞间连接减少、抑制剂研究、细胞计数流动和免疫组织学研究。 b) MV 与固体组织的关系：并非 MV 与细胞外基质相关的假设。 MV 荧光显示在蛋白质基质薄膜上，可进行先进的观察。我们研究了蛋白质降解酶或反军团中立剂的联络机制。 MV 在胶原蛋白凝胶或 MV 荧光和细胞血清中纤维含量的扩散，在显微镜和荧光上进行评估 时间流逝。 Nous évaluerons la distance parcourue par les MV les cellules cibles et inverses. 该作品提出了一种在细胞和组织之间进行交流的新模式。