Action des microvésicules dans les tissus solides

固体组织中的微泡作用

• 批准号: RGPIN-2019-06500
• 负责人: Moulin, Véronique
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Discovery Grants Program - Individual
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2021-01-01 至 2022-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=738945
• 关键词: Action; des; microv; sicules; dans

Mon programme de recherche a pour objectif de comprendre les interactions existantes entre les cellules d'un tissu. A court terme, mon but est de déterminer le rôle des microvésicules (MV), un moyen de communication intercellulaire, dans un contexte normal en utilisant un tissu en cours de remodelage comme modèle. 1- Action des MV a) Sur les cellules inflammatoires : Nous traiterons des cellules mononuclées de sang avec des MV afin d'évaluer leur capacité à stimuler la différenciation, l'activation et la croissance des différentes populations de cellules immunitaires. Les molécules (protéines et miARN) à l'origine de ces mécanismes seront étudiées par utilisation d'anticorps neutralisant ou en inhibant la production de la molécule par les cellules. b) Sur l'apoptose : Dans le remodelage tissulaire, l'apoptose est fortement régulée que ce soit au niveau des cellules immunitaires, des cellules endothéliales ou mésenchymateuses. Les MV pourraient avoir un rôle protecteur dans l'apoptose cellulaire ou induire celle-ci. Des cellules endothéliales et mésenchymateuses et des macrophages seront traités avec différents inducteurs de l'apoptose en présence ou absence de MV et le taux d'apoptose induites sera évalué par fluorométrie et TUNEL. Les molécules (protéines et miARN) potentiellement à l'origine de l'action apoptotique dans les MV seront étudiées. 2- Etude de la diffusion des MV dans un tissu solide : Les MV détectées dans le sang proviennent cependant de cellules présentes dans les tissus solides. Inversement, les MV présentes dans le sang peuvent jouer un rôle sur les cellules des tissus. La diffusion des MV dans les tissus est cependant inconnue. a) Migration des MV à travers la barrière endothéliale : Notre hypothèse est que le passage des MV entre le sang et les tissus s'effectue au niveau des cellules endothéliales, et plus particulièrement au niveau du réseau lymphatique. Des cellules endothéliales sanguines ou lymphatiques seront cultivées dans des Transwellr. La modification de la perméabilité de l'endothélium par les MV sera évaluée avec du FITC-dextran. La transcytose et/ou la diminution des jonctions intercellulaires, seront étudiées par ajout d'inhibiteurs, par cytométrie en flux et immunohistologie. b) Devenir des MV dans les tissus solides : Notre hypothèse est que les MV peuvent se lier à la matrice extracellulaire. Des MV fluorescentes seront ajoutées sur un film de protéines matricielles, puis rincées avant observation. Le mécanisme de liaison sera étudié grâce à une dégradation enzymatique des protéines ou à l'ajout d'anticorps neutralisants. La diffusion des MV dans des gels de collagène ou de fibrine contenant des MV fluorescentes et des cellules sera évaluée au microscope à fluorescence Time lapse. Nous évaluerons la distance parcourue par les MV vers les cellules cibles et inversement. Les travaux proposés vont permettre de bien caractériser ce nouveau mode de communication entre les cellules dans les tissus.

Mon programme de recherche a pour objectif de comprendre les interactions existantes entre les cellules d'un tisu.法庭泰尔梅，我只是在一个正常的环境中使用一个组织来确定微血管（MV）的作用，这是一种细胞间的交流。 1-MV的作用a）对炎症细胞的作用：通过MV评估单核细胞的增殖能力以刺激免疫细胞的不同群体的分化、活化和增殖。Les molécules（protéines et miARN）à l'origine de ces mécanismes seront étudiées par utilization d'aprops neutralisant ou en cancerant la production de la molécule par les cellules. B）蔗糖：在组织重塑过程中，免疫细胞、内皮细胞或间充质细胞的Au和Au之间存在规则性的增强。MV可以在细胞内或诱导细胞内发挥保护作用。内皮细胞、间充质细胞和巨噬细胞在存在或不存在MV时具有不同的果糖诱导特征，两种果糖诱导的血清通过荧光和TUNEL进行评价。分子（蛋白质和miARN）可能是MV血清中抗肿瘤作用的起源。2-MV在固体组织中的扩散研究：在固体组织中存在的细胞中检测到的MV。相反，MV在歌曲中可以在组织细胞上发挥作用。MV在组织中的扩散是不连续的。 （a）MV通过内皮屏障：我们假设MV通过内皮细胞，特别是通过内皮细胞网。血内皮细胞或血内皮细胞在体外培养。通过FITC-葡聚糖评估MV血清对内皮细胞渗透性的改变。胞质转移和/或细胞间连接减少，血清学研究包括抑制、细胞学流动和免疫组织学。B）MV在固体组织中的分布：我们假设MV可能存在于细胞外基质中。MV荧光血清在基质蛋白膜上显示，然后观察。Le mécanisme de liaison sera étudié grâce à une degradation enzymatique des Protéines ou à l'ajout d'Agrops neutralisants. La diffusion des MV dans des gels de collagène ou de fibrine contenant des MV fluorescentes et des cellules sera évaluée Au microscope à fluorescence Time lapse. Nous évaluerons la distance parcourue par les MV vers les cellules cibles et inversement. 这些工作建议在组织中的细胞之间建立一种新的通信模式。