Analyser le rôle de l'enzyme L-isoaspartyl méthyltransférase dans la transition du type épithéliale mésenchymateuse chez les cellules cancéreuses astrocytaires

本研究项目的长期泰尔梅是研究调节L-异戊酰（D-戊酰）甲基转移酶（PIMT）蛋白表达和活性的分子机制，并分析这种酶的生物化学和细胞功能，从而使蛋白质在氨基酸异常的情况下得以恢复。 该要求的法院泰尔梅目的是：1）明确TGF-β在诱导PIMT向上皮细胞间质转化过程中刺激PI 3 K/Akt/GSK-3/B-caténine信号通路的作用。2)研究TGF-B在诱导PIMT向上皮细胞间质转化过程中激活的TGFR 1/Smad 2和3/Smad 4/B-caténine信号通路的意义。 L'enzyme PIMT methyle des Protéines avec des résidus acetyls anormaux propylate de la desamidation des résidus asparagines et de l'isomérisation des résidus acetyls.这些蛋白质的非酶修饰是自发的，也是生物化学和细胞功能改变的积累。Peu d'études ont étudié les functions de la PIMT dans les processus de Pérogenèse.在检查的组织中，PIMT非常好。我们认为PIMT的新进展增加了胶质母细胞瘤（U87-MG）细胞外基质的分离。La PIMT ayant des propriétés anti-prostitutiques，la hausse de PIMT lors du dentachement des cellules pourrait discriminator la résistance à l'prostitution（mort cellaire）.另一方面，我们还分析了PI 3 K/Akt/GSK-3/B-caténine和Src/Raf/MEK/ERK/RSK信号通路在使用丙戊酸诱导PIMT治疗癫痫中的作用。提示，我们获得的结果表明，在PIMT依赖VEGF的情况下，血管内皮细胞形成类似于血毛细血管的结构。基于实验数据的总体分析，我们假设PIMT酶在获得相关表型向上皮细胞间充质细胞型转变过程中发挥着重要作用。在此，我们利用胶质母细胞瘤培养U87-MG，就像用TGF-B交叉因子进行细胞培养一样。 本文对TGF-β诱导PIMT过程中两种信号传导途径的作用进行了分子机制的研究，分析了TGF-β诱导PIMT过程中两种信号传导途径的作用。此外，这些工作旨在阐明PIMT在上皮细胞间充质细胞类型转变中的作用，并有助于我们理解不同组织中细胞生成的基础过程。

Les objectifs à long terme de mon programme de recherche sont d'investiguer les mécanismes moléculaires régulant l'expression et l'activité de la protéine L-isoaspartyl (D-aspartyl) méthyltransférase (PIMT) et d'analyser les fonctions biochimiques et cellulaires de cette enzyme qui reconnaît et souvent répare les protéines endommagées sur leurs acides aminés aspartyls anormaux. Les objectifs à court terme de cette demande sont de : 1) Caractériser le rôle de la voie de signalisation PI3K/Akt/GSK-3/B-caténine stimulée par le TGF-B dans l'induction de la PIMT lors de la transition épithéliale mésenchymateuse. 2) étudier l'implication de la voie de signalisation TGFRI/Smad2 et 3/Smad4/B-caténine activée par le TGF-B dans l'induction de la PIMT lors de la transition épithéliale mésenchymateuse. L'enzyme PIMT méthyle des protéines avec des résidus aspartyls anormaux provenant de la désamidation des résidus asparagines et de l'isomérisation des résidus aspartyls. Ces modifications non-enzymatiques des protéines sont spontanées et leurs accumulations altèrent leurs fonctions biochimiques et cellulaires. Peu d'études ont étudié les fonctions de la PIMT dans les processus de cancérogenèse. Parmi les tissus examinés, c'est dans le cerveau que la PIMT est la plus abondante. Nous avons démontré que le niveau de la PIMT augmentait lors du détachement de la matrice extracellulaire des cellules cancéreuses humaines de glioblastomes (U87-MG). La PIMT ayant des propriétés anti-apoptotiques, la hausse de PIMT lors du détachement des cellules pourrait favoriser la résistance à l'apoptose (mort cellulaire). D'autre part, nous avons aussi analysé la contribution des voies de signalisation PI3K/Akt/GSK-3/B-caténine et Src/Raf/MEK/ERK/RSK dans l'induction de la PIMT par l'acide valproque qui est utilisé pour traiter l'épilepsie. Récemment, nous avons obtenu des résultats prometteurs indiquant que la formation de structures semblables aux capillaires sanguins par les cellules endothéliales en présence du facteur de croissance VEGF était dépendante de la PIMT. Basé sur l'ensemble de ces données expérimentales, nous posons l'hypothèse que l'enzyme PIMT jouerait un rôle essentiel lors de l'acquisition du phénotype associé à une transition du type épithéliale mésenchymateuse. Dans ce but, nous utiliserons les glioblastomes en culture U87-MG comme modèle cellulaire traité avec le facteur de croissance TGF-B. L'originalité et l'importance de nos travaux reposent sur l'analyse des mécanismes moléculaires régulant l'abondance de l'enzyme PIMT par le TGF-B et en particulier du rôle de deux voies de signalisation dans cette induction de la PIMT par le TGF-B. De plus, ces travaux mettront en lumière le rôle critique de la PIMT dans la transition de type épithéliale mésenchymateuse et donc vont accroître notre compréhension de processus fondamentaux de la cancérogenèse dans différents tissus.