Funktionelle Charakterisierung von TPCN2 Kanälen in vitro und in vivo

Nikotinsäure-Adenin-Dinukleotide Phosphat（NAADP）是一种纳米级的钙离子拮抗剂，来自于Zelle freisetzt的溶酶体特异性。In zahlreichen Säugerzellen（z.B. in Kardiomyozyten，Neuronen und β-Zellen des Pankreas）wurden NAADP-abhängige Prozesse beschrieben.通过对“双孔道”（TPCN 1和TPCN 2）的识别，NAADP的高亲和性反应是一种高选择性的前向反应，NAADP可将信号转导途径引入分子水平。这是一种在功能和生理学上与TPCN 2 Kanälen埃尔兰根相关的缺陷。第一次血管紧张素转换酶抑制剂对细胞内Ca 2+信号转导TPCN 2细胞的作用。通过对TPCN 2激活机制和离子渗透的研究，发现TPCN 2-NAADPabhängigen Ca 2+的激活机制和离子渗透机制与Ca 2+的相关性。我们已经建立了一种平面膜片钳技术，这种技术可以使TPCN 2-vermittelte Ströme直接进入溶酶体，使其具有特征。第二次移植需要了解TPCN 2在TPCN 2敲除小鼠模型中的生理作用。我们将韦尔登我们的心脏系统和ZNS控制器连接起来。

Nikotinsäure-Adenin-Dinukleotid Phosphat (NAADP) ist ein sekundärer Botenstoff, der in nanomolaren Konzentrationen Ca2+ aus lysosomalen Speichern der Zelle freisetzt. In zahlreichen Säugerzellen (z.B. in Kardiomyozyten, Neuronen und β-Zellen des Pankreas) wurden NAADP-abhängige Prozesse beschrieben. Mit der Identifizierung der „two pore channels“ (TPCN1 und TPCN2) als hochaffine NAADP Rezeptoren ist eine der zentralen Voraussetzung dafür geschaffen, NAADP abhängige Signaltransduktionswege auf molekularer Ebene nachzuvollziehen. Ziel des vorliegenden Antrages ist es, umfassende Einblicke in die Funktion und die physiologische Relevanz von TPCN2 Kanälen zu erlangen. Der erste Antragsteil umfasst Untersuchungen zur Rolle von TPCN2 Kanälen bei der intrazellulären Ca2+ Signaltransduktion. Hierbei sollen der Aktivierungsmechanismus und die Ionenpermeation von TPCN2, sowie der Kopplungsmechanismus der TPCN2-getragenen NAADPabhängigen Ca2+ Freisetzung an sekundäre Ca2+ Speicher analysiert werden. Als wesentliches Werkzeug für das Erreichen dieser Ziele haben wir eine planare Patch Clamp Technik etabliert, die es ermöglicht TPCN2-vermittelte Ströme direkt in intakten Lysosomen zu charakterisieren. Der zweite Antragsteil beschäftigt sich mit Untersuchungen zur physiologischen Rolle von TPCN2 am Modell der TPCN2 Knockout Maus. Wir werden uns hierbei auf das kardiale System und das ZNS konzentrieren.