Molekularbiologische und biochemische Untersuchungen an den Fucoxanthin/Chlorophyll a/c bindenden Proteinen (Fcps) der zentrischen Diatomee Cyclotella cryptica
Molekularbiologische und biochemische Untersuchungen an den Fucoxanthin/Chlorophyll a/c bindenden Proteinen (Fcps) der zentrischen Diatomee Cyclotella cryptica
批准号:
5086260
负责人:
Privatdozent Dr. Erhard Rhiel
金额:
$0.0万
依托单位国家:
德国
项目类别:
Research Grants
财政年份:
1998
资助国家:
德国
项目状态:
已结题
起止时间:
1997-12-31 至 2005-12-31
中文摘要
通过对隐藻的分子生物学和生物化学的研究,发现隐藻与岩藻黄素/叶绿素结合蛋白质的异源性是隐藻的一个分子生物学和生物化学系统。三个基因在表达方面的克隆和第一个实验机构的实验是非常成功的。该fcp基因可表达,重组多肽可增强色素结合研究,并可用于韦尔登研究。在第一次2D晶体学实验中,使用色素保护多肽溶液。光系统的增长是非常快的。用同源和异源抗血清和抗血清进行Western免疫印迹,发现Fcp蛋白在基质中的特异性。在Thylakoidlumen exponierte Domänen erkennen,soll nachgewiesen韦尔登,welche Fcp Untereinheiten mit Photosystem I,bzw.光系统II与之相关。通过免疫金标试验和韦尔登试验,可获得这些结果。这是一个隐小环藻沃登的基因组数据库。这是因为基因组的克隆使韦尔登的基因组序列更加完整。Die genomischen Gensequenzen sollen auf mögliche Promotoren und weitere regulatorische Sequenzen hin untersucht韦尔登. Ein Vergleich dieser Sequenzen mit Daten der Lhc Genfamilien von Höheren Pflanzen soll die Untersuchungen abschließen.
英文摘要
Das heterogene, aus Fucoxanthin/Chlorophyll a/c bindenden Proteine bestehende Antennensystem der zentrischen Diatomee Cyclotella cryptica soll molekularbiologisch und biochemisch weiter untersucht werden. Die Klonierung von drei fcp Genen in Expressionsvektoren und erste Rekonstitutionsexperimente waren erfolgreich. Diese fcp Gene sollen überexprimiert und die rekombinanten Polypeptide aufgereinigt und in weitere Pigmentbindestudien eingesetzt werden. Die mit Pigment beladenen Polypeptide sollen in ersten 2D-Kristallisationsexperimenten eingesetzt werden. Die Auftrennung der beiden Photosysteme ist ebenfalls erfolgreich verlaufen. Durch Western-Immunoblotting mit homologen und heterologen Antiseren und mit Antiseren, die in den einzelnen Fcp Proteinen spezifische, im Stroma bzw. im Thylakoidlumen exponierte Domänen erkennen, soll nachgewiesen werden, welche Fcp Untereinheiten mit Photosystem I, bzw. Photosystem II assoziiert sind. Diese Untersuchungen sollen durch Immunogoldmarkierungsexperimente an Gefrierbruchreplika erhärtet werden. Weiterhin ist eine genomische Genbank von Cyclotella cryptica angelegt worden. Diese soll mit den bereits klonierten fcp Genen als Sonden gescreent werden, um die entsprechenden genomischen Sequenzen zu erhalten. Die genomischen Gensequenzen sollen auf mögliche Promotoren und weitere regulatorische Sequenzen hin untersucht werden. Ein Vergleich dieser Sequenzen mit Daten der Lhc Genfamilien von Höheren Pflanzen soll die Untersuchungen abschließen.
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