Molekularbiologische Charakterisierung der Orthomyxovirus-Replikation: Das ML-Protein von Thogoto-Virus als Interferon-Antagonist

Ziel des Projektes ist die Aufklärung der molekularen Mechanismen，auf denen die Regulation der Orthomyxovirus-dikation beruht.本文介绍了一种新的猪托戈托病毒（THOV）的模型系统。这是我们的基因，检测cDNA，感染，重组THOV（recTHOV）以产生。通过建立针对THOV的“逆转录-遗传学”机制，可以使病毒复制和与病毒功能的相互作用得到韦尔登。我们将继续研究这些前悲剧：1。Das 6. THOV的片段可用于基质蛋白和两种具有独特功能的基因产品。Die Bedeutung dieses zweiten Genproduktes für die Vermehrung von THOV soll charakterisiert韦尔登。2. THOV的基因组片段在结构上和前动力学上都没有3 '-和5'-序列。我们将把这段代码转换为最佳的病毒复制。3. THOV的实验将通过干扰素诱导的人源MxA蛋白质来进行。这种出血是由MxA和病毒核蛋白相互作用引起的。通过对节段的诱变，使核蛋白发生突变，我们将研究MxA耐药基因的产生，并进一步研究MxaA的血凝机制。

Ziel des Projektes ist die Aufklärung der molekularen Mechanismen, auf denen die Regulation der Orthomyxovirus-Replikation beruht. Dazu dient uns das einfach aufgebaute Thogotovirus (THOV) als Modellsystem. Es ist uns gelungen, ausgehend von cDNA, infektiöses, rekombinantes THOV (recTHOV) zu generieren. Mit der Etablierung der "Reversen-Genetik" für THOV kann nun die Bedeutung einzelner Genabschnitte für die Virusreplikation und die Interaktion mit Funktionen der Wirtszelle gezielt untersucht werden. Im Rahmen des vorliegenden Antrages wollen wir folgende Fragestellungen untersuchen: 1. Das 6. Segment von THOV kodiert für das Matrixprotein und ein zweites Genprodukt mit unbekannter Funktion. Die Bedeutung dieses zweiten Genproduktes für die Vermehrung von THOV soll charakterisiert werden. 2. Die genomischen Segmente des THOV unterscheiden sich in der Struktur und der Promotoraktivität ihrer 3'- und 5'-nichttranslatierten Sequenzen. Wir wollen diese Bereiche zwischen den Segmenten austauschen, um ihre Bedeutung für die Steuerung der Virusreplikation zu bestimmen. 3. Die Replikation von THOV wird durch das Interferon-induzierte humane MxA-Protein stark gehemmt. Diese Hemmung geht auf eine Interaktion zwischen MxA und dem viralen Nukleoprotein zurück. Durch Mutagenese des Segmentes, das für das Nukleoprotein kodiert, wollen wir versuchen, MxA-resistente recTHOV zu generieren, um so den Hemmmechanismus von MxaA weiter aufzuklären.