Molekularbiologische, biochemische und biophysikalische Charakterisierung der posttranslationalen Prenylierung von Ypt/Rab Proteinen sowie deren Wechselwirkung mit Effektorproteinen

Ypt/Rab 蛋白翻译后异戊二烯化的分子生物学、生物化学和生物物理特征及其与效应蛋白的相互作用

• 批准号: 5078640
• 负责人: Professor Dr. Axel J. Scheidig
• 金额: --
• 依托单位: Max-Planck-Institut für molekulare Physiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1996-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5078640?language=en
• 关键词: Molekularbiologische; biochemische; und; biophysikalische; Charakterisierung

Die posttranslationale Geranylgeranylierung von Ypt/Rab Proteinen (Ypt7 [Hefe], Rab5 [Mensch] und Rab7 [Hund]) wird in allen Teilschritten der Komplexbildung, der Prenylierungsreaktion und dem Zerfall des Komplexes kinetisch, mechanistisch und strukturell untersucht. Die wesentlichen Untersuchungsmethoden werden Fluoreszenzspektroskopie, die chemo-enzymatische Synthese und die Röntgenstrukturanalyse sein. Wir werden das System aus Hefe (Ypt7:MRS6:Bet2-Bet4) und aus Säugetier (Rab7:REP-1:RabGGTase) vergleichend charakterisieren. Im Rahmen des Projekts werden die Ypt/Rab-spezifischen GDP/GTP-Austauschfaktoren (GNEF) Rabex-5 (Rab5), Vps9 (Ypt51) und Dss4 (Ypt1) kinetisch und strukturell untersucht. Neben der vergleichenden Charakterisierung mit anderen GNEFs werden Ypt/Rab-spezifische Fragestellungen (z.B. Abhängigkeit der Austauschaktivität von Prenylierung und Membranassoziation) bearbeitet. Die kinetische und strukturelle Charakterisierung von Ypt/Rab-spezifischen, GTPase aktivierenden Proteinen (GAP) ist ein weiterer Schwerpunkt für die Analyse der Regulation des GDP/GTP-Zyklus durch Ypt/Rab-spezifische Proteine. Wir werden hierfür das Modellsystem Ypt7:Gyp7 aus Hefe untersuchen. Weiterhin soll im Rahmen des Projekts die Wechselwirkung der Effektorproteine Rabaptin-5 bzw. Rabaptin-5ß und EEA1 mit den Rab-Proteinen Rab5 und Rab4 mit biophysikalischen Methoden untersucht werden. Schwerpunkt hierbei liegt auf der Strukturanalyse einzelner wechselwirkender Domänen mittels NMR und/oder Röntgendiffraktion.

翻译后的Geranylgeranylierung von YPT/Rab Proteinen(Ypt7[Hefe]，Rab5[Mensch]and Rab7[Hund])Wind in Allen Teilschritten der Komplexbildung，der Prenylierungsreaktion and DEM Zerfall des Komplexes kinetisch，machistisch and strukturell untersuht.我们采用了荧光酶比色法、化学-酶合成法和结构分析法。我们是Aus Heefe(YPT7：MRS6：Bet2-Bet4)和Aus Säugetier(Rab7：rep-1：RabGGTase)的系统。Rahman des Projekts是Ypt/Rab-Spezifischen GDP/GTP-Austauschfaktoren(GNEF)RABEX-5(Rab5)，Vps9(Ypt51)和Dss 4(Ypt1)kinetisch and strukturell untersuht。Nben der vergleichenden Charakterisierung MIT和deren GNEF is den YPT/Rab-Spezifische Frasterellungen(Z.B.ABHänGigkeit der Austauschaktivität von Prenylierung und Membrassoziation)beitet.运动和结构特征YPT/Rab-Spezifischen，GTPase aktivierenden Proteinen(GAP)是Ein Weiterer Schwerpenkt für die analyder Reguling des GDP/GTP-Zykus duch YPT/Rab-Spezifische Proteine。我们是一个高级模块系统Ypt7：Gyp7 Aus Hefe unteruchen.Rahman des Projekts die Wechselwirkung der EffektorProteine Rabaptin-5 BZW.Rabaptin-5üund EEA1 MIT den Rab-Proteinen Rab5 and Rab4 MIT biPhysikalischen Methoden Methoden.Strukturanalyeeinzelner的核磁共振成像和Röntgen衍射谱。