Molekularbiologische, biochemische und biophysikalische Charakterisierung der posttranslationalen Prenylierung von Ypt/Rab Proteinen sowie deren Wechselwirkung mit Effektorproteinen

Die posttranslationale Geranylgeranylierung von Ypt/Rab Proteinen （Ypt7 [Hefe]， Rab5 [Mensch]和Rab7 [Hund]）在allen Teilschritten der Komplexbildung， der prenylierungsretion and dem Zerfall des Komplexes动力学、机理和结构研究中的应用。荧光光谱法，化学酶合成法，Röntgenstrukturanalyse sein。Wir werden das System aus Hefe （Ypt7:MRS6:Bet2-Bet4）和aus Säugetier (Rab7:REP-1:RabGGTase) vergleichend charterisien。在此基础上，研究了GNEF （GNEF）、Rabex-5 （Rab5）、Vps9 （Ypt51）和Dss4 （Ypt1）的动力学和结构分析。Neben der vergleichenden Charakterisierung mit anderen GNEFs werden Ypt/ rabb -spezifische Fragestellungen （z.B. Abhängigkeit der Austauschaktivität von Prenylierung and membranassociation）。GTPase aktivierenden Proteinen (GAP) ist in weiterer Schwerpunkt f<e:1> (GTP-Zyklus durch Ypt/ lab -spezifische protein)的调控分析。Wir - werden模型系统：Ypt7:Gyp7。研究题目：rabaptin - 5bzw。Rabaptin-5ß和EEA1与Rab5 - proteinen Rab5和Rab4的生物物理分析方法。Schwerpunkt hierbei light auf der struckturanalyse einzelner wehselwirkender Domänen mittelels NMR und/oder Röntgendiffraktion。

Die posttranslationale Geranylgeranylierung von Ypt/Rab Proteinen (Ypt7 [Hefe], Rab5 [Mensch] und Rab7 [Hund]) wird in allen Teilschritten der Komplexbildung, der Prenylierungsreaktion und dem Zerfall des Komplexes kinetisch, mechanistisch und strukturell untersucht. Die wesentlichen Untersuchungsmethoden werden Fluoreszenzspektroskopie, die chemo-enzymatische Synthese und die Röntgenstrukturanalyse sein. Wir werden das System aus Hefe (Ypt7:MRS6:Bet2-Bet4) und aus Säugetier (Rab7:REP-1:RabGGTase) vergleichend charakterisieren. Im Rahmen des Projekts werden die Ypt/Rab-spezifischen GDP/GTP-Austauschfaktoren (GNEF) Rabex-5 (Rab5), Vps9 (Ypt51) und Dss4 (Ypt1) kinetisch und strukturell untersucht. Neben der vergleichenden Charakterisierung mit anderen GNEFs werden Ypt/Rab-spezifische Fragestellungen (z.B. Abhängigkeit der Austauschaktivität von Prenylierung und Membranassoziation) bearbeitet. Die kinetische und strukturelle Charakterisierung von Ypt/Rab-spezifischen, GTPase aktivierenden Proteinen (GAP) ist ein weiterer Schwerpunkt für die Analyse der Regulation des GDP/GTP-Zyklus durch Ypt/Rab-spezifische Proteine. Wir werden hierfür das Modellsystem Ypt7:Gyp7 aus Hefe untersuchen. Weiterhin soll im Rahmen des Projekts die Wechselwirkung der Effektorproteine Rabaptin-5 bzw. Rabaptin-5ß und EEA1 mit den Rab-Proteinen Rab5 und Rab4 mit biophysikalischen Methoden untersucht werden. Schwerpunkt hierbei liegt auf der Strukturanalyse einzelner wechselwirkender Domänen mittels NMR und/oder Röntgendiffraktion.