Überexpression von Interferon tau (IFN-tau) in in vitro produzierten Rinderembryonen

Die fr<s:1> hembryonale Mortalität ist Die wichtigste Ursache der Trächtigkeitsverluste bem Rind。mitverantwortich könnte daf<e:1> eine unzureichende干扰素t （IFN-t）的产生des embryo sein， die zu einer Nichterkennung der Trächtigkeit von seiten des muttereres f<e:1> hrt。Das Ziel dieses forschungsprojets ist die Erhöhung der Trächtigkeitsrate durch Transfer von in vitro producdzierten Embryonen， die Das抗黄体水解蛋白（nf -t） ber den Weg des Gentransfers (f -t) berexprimieren。大族人对dna -构造原核病毒的研究。ivp -胚胎注射中卵磷脂浆化及细胞中nf -t的表达[7]/8。Entwicklungstag mittpcr许可。DNA-Konstrukte werden spezifisch；核与酶浆体注射；konzipiert。b-Aktin启动子和nf -t启动子。Die DNA-Konstrukte erhalten in Reportergen（新霉素耐药蛋白）。<s:1> r die zytoplasmatische注射液激活细胞结构zusätzlich eine小鼠扩增序列。[3] [endenengeeignetes Konstrukt] <s:2> [endenspermienvermittelten dnattransfer] [endenerzeugung]转基因胚胎ausgewählt.]在2000年，用Tag 60分析方法对转基因胚胎进行了研究（Entwicklungsfähigkeit）。

Die frühembryonale Mortalität ist die wichtigste Ursache der Trächtigkeitsverluste beim Rind. Mitverantwortlich könnte dafür eine unzureichende Interferon-t (IFN-t) Produktion des Embryos sein, die zu einer Nichterkennung der Trächtigkeit von seiten des Muttertieres führt. Das Ziel dieses Forschungsprojekts ist die Erhöhung der Trächtigkeitsrate durch Transfer von in vitro produzierten Embryonen, die das antiluteolytische Protein INF-t über den Weg des Gentransfers überexprimieren. Dazu werden in einem ersten Schritt verschiedene zu testende DNA-Konstrukte pronuklear bzw. zytoplasmatisch in IVP-Embryonen injiziert und die Expression von INF-t am 7./8. Entwicklungstag mittels RTPCR ermittelt. Die DNA-Konstrukte werden spezifisch für nukleare- und zytoplasmatische Injektion konzipiert. Als Promotoren werden dabei der b-Aktin und der endogene INF-t Promoter verwendet. Die DNA-Konstrukte erhalten ein Reportergen (Neomycin-Resistenz oder Grün-Fluoreszenz-Protein). Für die zytoplasmatische Injektion enthalten die Konstrukte zusätzlich eine murine Amplifikationssequenz. Aus diesen Exerimenten wird ein geeignetes Konstrukt für den spermienvermittelten DNATransfer zur Erzeugung transgener Embryonen ausgewählt. Im zweiten Schritt werden diese transgenen Embryonen gleichzeitig mit den Kontrollembryonen zum Studium ihrer Entwicklungsfähigkeit in 200 Rezipienten transferiert und die Trächtigkeitsraten am Tag 60 analysiert.