Molekularbiologische, biochemische und verhaltenspharmakologische Untersuchungen zur Bedeutung der Glutamatdecarboxylase (GAD1 und GAD2) als einem Kandidatengen der Alkoholabhängigkeit

在“数量性状基因座”(QTL)中，发现了一些新的数量性状基因座(QTL)，其中包括4号(Tyrpl)、1号(D1Mit206)、11号(D1Mit174)和2号(D2Mit9和D2Mit17)等。1997年)。我是Forschungsstipendium的一员，这是因为他们的染色体是4号染色体和2号染色体，这两条染色体的特征是不同的。我正在进行一项新的实验。Zur Erreichung Dieses Zieles Sollen Aus Dem am Portland酒精研究中心Enwickelten Chromosom 4同源基因D2.B6 Tyrpl Mausstam，Welcher selektiv entzugsProtecktive C57BL/6J(B6)等位基因Bereich des Chromosom 4 auf DEM Boden eines DBA/2J(D2)Hintergrundgenomms BBA/2J(D2)Hintergrundgenom beitzts，sgente te“区间特异性同源基因菌株”(ISCS)entwickelt and auf ire AlkoholentzugSemfindlichkeit getttet Wickelt and auf ire AlkoholentzugSemfindhkeit Gettet Wickelt and auf ire AlkoholentzugSemfindhkeit Gettet Wickelt and auf ire Alkoholentzugsefindhkeit gettden.在Ergänzung Dieser Versuhe中，在QTL Untersusuung zurunde liegenden Vorläuferstämmen(DBA/2J，C57BL/6J)zu equenzieren(DBA/2J，C57BL/6J)zu Sequenzieren(DBA/2J，C57BL/6J)zu equenzieren(DBA/2J，C57BL/6J)zu Sequenzieren(DBA在rekombinanten inzuchtstämman中，也有一个非常多的选择层次的种群。Der Vierte Projektabschnitt Dazu，die Funktionelle Bedeutung der GlutaatDecarboxylase 1 and 2(GAD-1，GAD-2)ALS unmitteldatengen en f rüAlholabhänGigkeit and Alkoholentzug nähu bechiben.Bide基因存在于染色体2和Schrittmacherase合成神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的QTL中。在Vorläufigen Untersuhugen Konnte eine eine Vertersuhugen Konnte eine eine Gad-Aktiität in den alkoholentzugSempfindlichen D2-Mäusen im Vergleich zu den B6-Mäusen geessen.Zur Erreichung des Projektzieles is sowohl die Sequenzierung beder gene，sowohl die Unterucsuung der Gad-1 and Gad-2mRNA在B6和D2 Mäusen的Verschiedenen Hirnarealen B6和D2 Mäusen中的表达。(文献：巴克，K.J.等人，1997，《神经科学杂志》，17(10)：3946)

In einer "quantitative trait loci" (QTL)-Untersuchung konnte eine signifikante Korrelation zwischen einer erhöhten Alkoholentzugsempfindlichkeit und Allelen auf Mauschromosom 4, (Tyrpl), Mauschromosom 1 (D1Mit206), mauschromosom 11 (D1Mit174) und auf zwei Genorten des Mauschromosoms 2 (D2Mit9 und D2Mit17) gezeigt werden (Buck et al. 1997). Im Rahmen des Forschungsstipendiums ist beabsichtigt, die beteiligten Genorte auf Chromosom 4 und Chromosom 2 näher zu charakterisieren und geeignete Kandidatengene zu untersuchen.Im ersten Schritt soll durch verhaltensgenetische Experimente eine genauere Lokalisation des QTL auf Mauschromosom 4 erzielt werden. Zur Erreichung dieses Zieles sollen aus dem am Portland Alcohol Research Center entwickelten Chromosom 4 Congenic D2.B6 Tyrpl Mausstamm, welcher selektiv entzugsprotektive C57BL/6J (B6) Allele im Bereich des Chromosom 4 auf dem Boden eines DBA/2J (D2) Hintergrundgenoms besitzt, sogenannte "Interval Specific Congenic Strains" (ISCS) entwickelt und auf ihre Alkoholentzugsempfindlichkeit getestet werden. In Ergänzung dieser Versuche ist geplant, plausible Kandidatengene der chromosomalen Region [z.B. Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type D (Ptprd), Phosphodiesterase 4B (Pde4B)] in den beiden der QTL Untersuchung zugrunde liegenden Vorläuferstämmen (DBA/2J, C57BL/6J) zu sequenzieren. Die funktionelle Bedeutung polymorpher Kandidatengene soll anhand von Assoziationsuntersuchungen sowohl in rekombinanten Inzuchtstämmen, als auch an verhaltensselektierten Tierpopulationen überprüft werden.Der vierte Projektabschnitt dient dazu, die funktionelle Bedeutung der Gene Glutamatdecarboxylase 1 und 2 (Gad-1, Gad-2) als unmittelbaren Kandidatengenen für Alkoholabhängigkeit und Alkoholentzug näher zu beschreiben. Beide Gene befinden sich in unmittelbarer Nähe der bisher identifizierten QTLs auf Chromosom 2 und kodieren die Schrittmacherenzyme für die Synthese des inhibitorischen Neurotransmitters Gamma-Aminobuttersäure(GABA). In vorläufigen Untersuchungen konnte eine verminderte GAD-Aktivität in den alkoholentzugsempfindlichen D2-Mäusen im Vergleich zu den B6-Mäusen gemessen werden. Zur Erreichung des Projektzieles ist sowohl die Sequenzierung beider Gene, sowohl die Untersuchung der Gad-1 und Gad-2 mRNA Expression in verschiedenen Hirnarealen in B6 und D2 Mäusen unter den Bedingungen des akuten Ethanolentzugs und Kontrollbedingungen vorgesehen. (Literatur: Buck, K.J. et al., 1997, J. Neurosci., 17 (10): 3946)