Polyadenylierung von mRNA: Kontrolle der Poly(A)-Schwanzlänge

真核组织蛋白3′-Ende - der mRNA在zwei Schritten、内核降解Spaltung、Polyadenylierung和5′- spalte产物中表达。Der zweite Schritt Der 3'-Prozessierung ist的体外研究：重组蛋白：聚(A)-聚合酶，裂解和聚腺苷化特异性因子（CPSF， ein异源四聚体）和聚(A)-结合蛋白2 （PABP2）。Diese drei Proteine verlängern eine 'vorgeschnittene' RNA在einer prozessiven反应中，die nach Erreichen der nat<s:1> rlichen Länge des Poly(A)Schwanzes (ca. 250 Adenylatreste) terminal bird, d.h. in eine distribution and daher langsame reaction bergeet。在Fortsetzung unserer bisherigen Arbeit planenwir中，die strucktur des polyadenylierungsk络合物和seine Verlängerung beder Termination der prozessiven Polyadenylierung zu untersuchen。in Mittelpunkt dieses Antrags steinseits die Analyse der Wechselwirkung von PABP2 and Poly(A)-Polymerase, underseits die Untersuchung des immobilisiten polyadenylierungskcomplexes and die Überprüfung vorläufiger Befunde eines selektiven Verlustes der 30 kDa-Untereinheit von CPSF。

Das 3'-Ende der eukaryontischen mRNA entsteht durch eine Prozessierungsreaktion in zwei Schritten, endonukleolytische Spaltung gefolgt von Polyadenylierung des 5'-Spaltproduktes. Der zweite Schritt der 3'-Prozessierung ist in vitro aus drei Proteinen rekonstituiert worden: Poly(A)-Polymerase, cleavage and polyadenylation specificity factor (CPSF, ein Heterotetramer) und Poly(A)-Bindungsprotein 2 (PABP2). Diese drei Proteine verlängern eine 'vorgeschnittene' RNA in einer prozessiven Reaktion, die nach Erreichen der natürlichen Länge des Poly(A)Schwanzes (ca. 250 Adenylatreste) terminiert wird, d.h. in eine distributive und daher langsame Reaktion übergeht. In Fortsetzung unserer bisherigen Arbeit planen wir, die Struktur des Polyadenylierungskomplexes und seine Verlängerung bei der Termination der prozessiven Polyadenylierung zu untersuchen. Im Mittelpunkt dieses Antrags steht einerseits die Analyse der Wechselwirkung von PABP2 und Poly(A)-Polymerase, andererseits die Untersuchung des immobilisierten Polyadenylierungskomplexes und die Überprüfung vorläufiger Befunde eines selektiven Verlustes der 30 kDa-Untereinheit von CPSF.