Molekulare Analyse der Eisenassimilation in der einzelligen Grünalge Chlamydomonas reinhardtii

Das Ziel ist die Aufklärung der mechanism， die and der规整的Fe-Aufnahme in der gralge Chlamydomonas reinhardtii and dikotylen pflzen in light sind。在二氯乙烯中对铁的还原，在衣藻中对铁的还原，在衣藻中对铁的还原，在衣藻中对铁的还原。衣藻中Fe3+-还原酶、Fe3+-转运蛋白、Fe3+-氧化酶和Fe3+-氧化酶的脱氮酶活性与Fe-Aufnahme的关系。在酵母和脊椎动物中Fe-Aufnahme的再氧化作用。在二氯乙烯中，存在两种不同类型的铁氧化酶，即铁氧化酶和铁氧化酶。在民主党beantragten Projekt sollen死Arbeiten苏珥Klonierung des Oxidasegens改衣藻fortgesetzt和死Bedeutung这本Enzyms毛皮死Fe-Aufnahme charakterisiert了。Um weitere Komponenten des fe - aufnahmessystems zu identifizieren， wurden Änderungen在Fe-Mangel条件下的蛋白表达。Mittels zweidimensionaler eletrophorese konten 15 plasmamen膜-和15 lösliche protein in Chlamydomonas identifiziert werden，在Fe-Mangel差分实验下死亡。Diese protein sollen mittelels maldi - tof massenspectrometer分析及鉴定方法。GFG。sollen unbekannte oder fgr - aufnahme - aufnah - Gene duch den Einsatz von degenerierten oligonukleotiden klonierden werden。

Das Ziel ist die Aufklärung der Mechanismen, die an der regulierten Fe-Aufnahme in der Grünalge Chlamydomonas reinhardtii und in dikotylen Pflanzen beteiligt sind. Anhand unserer Ergebnisse konnte gezeigt werden, daß, genauso wie in dikotylen Pflanzen, die Fe-Reduktion in Chlamydomonas eine notwendige Voraussetzung für die Fe-Aufnahme ist. Desweiteren Scheint in Chlamydomonas zusätzlich zu einer Fe3+-Reduktase und einen Transporter eine kupferhaltige Oxidase an der Fe-Aufnahme beteiligt zu sein. Aufgrund dieser Reoxidation des Fe2+ zeigt der gesamte Mechanismus Ähnlichkeit zur Fe-Aufnahme in Saccharomyces und Vertebraten. In dikotylen Pflanzen existieren bislang keinerlei Hinweise auf die Beteiligung einer Ferroxidase an Fe-Aufnahme. In dem beantragten Projekt sollen die Arbeiten zur Klonierung des Oxidasegens auf Chlamydomonas fortgesetzt und die Bedeutung dieses Enzyms für die Fe-Aufnahme charakterisiert werden. Um weitere Komponenten des Fe-Aufnahmesystems zu identifizieren, wurden Änderungen in der Proteinexpression unter Fe-Mangel untersucht. Mittels zweidimensionaler Elektrophorese konnten 15 Plasmamembran- und 15 lösliche Proteine in Chlamydomonas identifiziert werden, die unter Fe-Mangel differentiell exprimiert sind. Diese Proteine sollen mittels MALDI-TOF-Massenspektrometrie analysiert und identifiziert werden. GFG. sollen unbekannte oder für die Fe-Aufnahme wichtige Gene durch den Einsatz von degenerierten Oligonukleoitiden kloniert werden.