Spezifische Interaktion von Mutanten p53 mit MAR-DNA Elementen: Molekulare Basis der dominant-onkogenen Wirkung von Mutanten p53?

约50%阿勒人肿瘤切除p53（突变p53），而90%的人p53突变为“错义突变"。这种p53突变并不只是野生型p53的肿瘤抑制功能，它是一种显性癌基因特征，我们将进一步研究其分子基础。我们知道，p53是必需的，而不是p53，它与色谱结构的调节因子MAR-DNA元件（MARs）有很大的关系。Demnach könnte eine onkogene Funktion von mut p53 darin liegen，über eine Interaktion mit MAR die chromatin-vermittelte Regulation nukleärer Prozesse zu modulieren. Ziele des vorliegenden Antrags sind deshalb（A.）（B.）研究突变p53的MAR-结合的生物学相关性。研究韦尔登证实了MAR/mut p53在体内对转录、脱蛋白和重组过程的相互作用。大足sollen MAR-freie bzw. MAR-haltige Vektoren mit Indikatorgenen construiert，in geeignete Testzellen transfiziert，and der Einfluencies von mut p53 auf diese Prozesse bestimmt韦尔登.

Ca. 50% aller humanen Tumoren exprimieren mutiertes p53 (mut p53), wobei über 90% der p53-Mutationen `missense`-Punktmutationen sind. Diese p53 Mutanten haben nicht nur die Tumorsuppressorfunktionen von Wildtyp (wt) p53 verloren, sondern zeigen dominant-onkogene Eigenschaften, deren molekularen Grundlagen wir erforschen wollen. Wir konnten zeigen, daß mut p53, nicht aber wt p53, mit hoher Affintät an übergeordnete Regulatorelemente der Chromatinstruktur, die MAR-DNA Elemente (MARs), bindet. Demnach könnte eine onkogene Funktion von mut p53 darin liegen, über eine Interaktion mit MARs die chromatin-vermittelte Regulation nukleärer Prozesse zu modulieren. Ziele des vorliegenden Antrags sind deshalb (A.) die weitere Charakterisierung der MAR-DNA-Bindung in vitro und in vivo über biochemische und zellbiologische Methoden; (B.) Untersuchungen zur biologischen Relevanz der MAR-Bindung von mut p53. Untersucht werden soll der in vivo Effekt der MAR/mut p53-Interaktion auf Transkriptions-, Replikations- und Rekombinationsprozesse. Dazu sollen MAR-freie bzw. MAR-haltige Vektoren mit Indikatorgenen konstruiert, in geeignete Testzellen transfiziert, und der Einfluß von mut p53 auf diese Prozesse bestimmt werden.