Klonierung und funktionelle Charakterisierung von PASKIN, einem neuen, potentiellen Sauerstoffsensor in Säugetierzellen

新世纪：所有的国家和地区都是这样的国家，他们的国家和地区都是这样的。Trotz der egerenten Bedeutung Dieses Voranges(Be Z.B.ischämie，Wundheilung，Embrygenese oder TumorProgress)is der Eigentliche zelluläre Sauerstoff传感器immer noch unbekannt.您的位置：我也知道>教育/科学>教育/科学>教育科学与科学>，我们的工作由S负责，并由他负责。这是一件很重要的事情，因为它是一件很重要的事情，因为它是一件很重要的事情。齐尔：表达和功能的表达和功能的特征。Arbeits程序：1.Vollständige测序分析von kLonierten Paskin基因Aus Mensch and Maus；2.Herstellung von rekombinantem Paskin蛋白质BZW.Bakterienkulturen中的Fragmenten Davon；3.Herstellung von antikörpern gegen Paskin；4.分析von Paskin和原位表达产物von Paskin；5.Spektroskopische Untersusuung and Analyst der Kinaseaktiität von rekombinantem Paskin；6.Funktionsen Analyzer von Paskin-Defizenten von Paszmellen Mäusen；7.KLonierung von Subzellenden Proteimen von Paskin“双杂交酵母系统”。

Hintergrund: Alle Säugetierzellen besitzen die Fähigkeit, eine Reduktion des verfügbaren Sauerstoffes (Hypoxie) zu messen und sich sehr rasch durch die Aktivierung entsprechender Gene an die veränderten Umweltbedingungen anzupassen. Trotz der eminenten Bedeutung dieses Vorganges (bei z.B. Ischämie, Wundheilung, Embryogenese oder der Tumorprogression) ist der eigentliche zelluläre Sauerstoffsensor immer noch unbekannt. Vorarbeiten: Kürzlich konnten wir ein neues Säugetiergen klonieren, das einem bakteriellen Sauerstoffsensor ähnelt. Das Genprojekt erhielt den Namen PASKIN, da es eine PAS und eine Kinase Domäne enthält, die für die bakterielle Sauerstoffmessung und Signalweitergabe von essentieller Bedeutung sind. Ziel: Die umfassende Charakterisierung der Expression und Funktionen von PASKIN. Arbeitsprogramm: 1. Vollständige Sequenzanalyse der klonierten PASKIN Gene aus Mensch und Maus; 2. Herstellung von rekombinantem PASKIN Protein bzw. Fragmenten davon in Bakterienkulturen; 3. Herstellung von Antikörpern gegen PASKIN; 4. Analyse des subzellulären und in situ Expressionsmusters von PASKIN; 5. Spektroskopische Untersuchung und Analyse der Kinaseaktivität von rekombinantem PASKIN; 6. Funktionelle Analysen von PASKIN-defizienten embryonalen Stammzellen und Mäusen; 7. Klonierung von mit PASKIN interagierenden Proteinen im "Yeast two-Hybrid" System.