Rekonstitution, funktionelle Analyse und Regulation von Mureinsynthese Multienzymkomplexen aus Escherichia coli

在Rahmen des Vorhabens sollen中，多酶复合物用于基因重组蛋白的结构和功能特性，在细菌外骨骼中，在mureinacculus中，在光线下合成。Der mureininsacculus ist ein einziges makromolek<e:1> 1, gebildet aus Zuckerketten, die durch kurze Peptide quervernetzt sind。Der saculus umschliesst die Zelle vollständig and stabilisiert die cytoplasmatische membrane。Während des Wachstums der Zelle wind der mureinacculus vergrössert和während der Zellteilung in zwei Tochtersacuculi geteilt。Dabei将永远努尔新胞壁质synthetisiert和在窝bestehenden球囊eingebaut, sondern欧什alt胞壁质来自民主党球囊herausgeschnitten (Murein-Turnover)。本文主要研究合成酶和水解酶的作用机理。Tatsächlich konnten in vorhergehenden Untersuchungen directe Protein-Protein-Interaktionen zwischen beestimmten Mureinsynthasen和-hydrolasen of Escherichia coli的特点是，在体内死亡的Murein合成的多酶复合物ausbilden könnten。在möglichst天然形式下体外培养的Diese复合物。Mit Hilfe eines funcktionellen Mureinsynthesetests sollen die Bedingungen fgr die Ausbildung der Komplexe gefunden werden und mögliche weitere, bislang unbekante Komponenten (Strukturproteine, Kofaktoren) identifiziert werden。体外合成体系的结构分析及体内生物降解的研究。平行大通量分析在einem中的应用，对anatz周围质粒蛋白和膜蛋白进行了鉴定，并对其与muin结合和调节功能进行了研究。-水解haben könnten。体外合成鼠蛋白的研究及鼠蛋白非依赖性蛋白的鉴定。

Im Rahmen des Vorhabens sollen Multienzymkomplexe aus den gereinigten Proteinen rekonstituiert und funktionell charakterisiert werden, die an der Synthese des bakteriellen Exoskeletts, dem Mureinsacculus, beteiligt sind. Der Mureinsacculus ist ein einziges Makromolekül, gebildet aus Zuckerketten, die durch kurze Peptide quervernetzt sind. Der Sacculus umschliesst die Zelle vollständig und stabilisiert die cytoplasmatische Membran. Während des Wachstums der Zelle wird der Mureinsacculus vergrössert und während der Zellteilung in zwei Tochtersacuculi geteilt. Dabei wird nicht nur neues Murein synthetisiert und in den bestehenden Sacculus eingebaut, sondern auch altes Murein aus dem Sacculus herausgeschnitten (Murein-Turnover). Hierfür ist ein reguliertes Zusammenspiel zwischen synthetischen und hydrolytischen Enzymen notwendig. Tatsächlich konnten in vorhergehenden Untersuchungen direkte Protein-Protein-Interaktionen zwischen bestimmten Mureinsynthasen und -hydrolasen aus Escherichia coli charakterisiert werden, die in vivo Murein synthetisierende Multienzymkomplexe ausbilden könnten. Diese Komplexe sollen in vitro in möglichst nativer Form aus den Einzelkomponenten rekonstituiert werden. Mit Hilfe eines funktionellen Mureinsynthesetests sollen die Bedingungen für die Ausbildung der Komplexe gefunden werden und mögliche weitere, bislang unbekannte Komponenten (Strukturproteine, Kofaktoren) identifiziert werden. Die Struktur von in vitro synthetisiertem Murein soll analysiert und mit dem in vivo gebildeten verglichen werden. Parallel dazu sollen in einem globalen Ansatz periplasmatische Proteine und Membranproteine identifiziert werden, die an Murein binden und dadurch eine regulierende Funktion auf die Mureinsynthese bzw. -hydrolyse haben könnten. Die Funktionen der identifizierten Murein-bindenden Protein sollen u.a. im in vitro Mureinsynthesetest untersucht werden.