Charakterisierung genetischer Veränderungen im Rahmen der malignen Transformation von Telomerase-immortalisierten humanen Hepatozyten

肝细胞癌的分子病原体仅仅是一个例子。在上皮细胞肿瘤中最好的是，有一种有效的端粒稳定性，可用于增殖性泽伦引起的肿瘤的发展。Im vorliegenden Projektantrag韦尔登是人类不死肝细胞生长素，不适用于细胞增殖。通过对端粒酶阳性的Zellklone进行恶性转化，并通过对端粒酶阳性的Zellklone的Verantwortlichen Signalwege进行鉴定，韦尔登可在自然条件下和氧化应激条件下进行遗传转化。逆转录病毒插入突变的解决方案是遗传学上的差异性韦尔登，它在一个恶性转化的传播中永久性地消失。通过体外鉴定和体内Nacktmaus-Modell模型的菌落测定，通过一种连接方法和一种Wachstum方法，在个体克隆中进行转化。Zellklone韦尔登可用于不转化Zellen分子、遗传学和其全球蛋白质表达特征。在特定的遗传学背景下，通过对端粒稳定性相关性的研究，韦尔登发现，端粒在转化过程中的活性受到抑制，端粒的稳定性下降，而克隆的功能特性也有所改善。

Die molekulare Pathogenese von hepatozellulären Karzinomen ist nur unzureichend bekannt. Beobachtungen in epithelialen Tumoren bestätigen, dass eine effiziente Telomerstabilisierung Voraussetzung für die Entwicklung von Karzinomen aus proliferierenden Zellen ist. Im vorliegenden Projektantrag werden Telomerase-immortalisierte humane Hepatozyten als nicht-malignes Zellkulturmodell für proliferierende Leberzellen eingesetzt. Um die Suszeptibilität Telomerase-positiver Zellklone für eine maligne Transformation zu erfassen und um die verantwortlichen Signalwege zu identifizieren, werden wir die Entstehung zytogenetischer Veränderungen in Langzeitkulturen spontan und unter oxidativen Stress untersuchen. Mittels retroviraler Insertionsmutagenese sollen genetische Veränderungen indiziert werden, die in den immortalisierten Klonen eine maligne Transformation propagieren. Maligne Transformation in individuellen Klonen wird durch einen Verlust der Kontaktinhibition und ein Wachstum im Colony-Assay in vitro identifiziert und im Nacktmaus-Modell in vivo bestätigt. Transformierte Zellklone werden dann im Vergleich zu nicht-transformierten Zellen molekular, zytogenetisch und hinsichtlich ihrer globalen Proteinexpression charakterisiert. Zur Untersuchung der Relevanz einer Telomerstabilisierung im Kontext spezifischer genetischer Veränderungen, werden wir die Telomeraseaktivität in den transformierten Klonen inhibieren, die Telomere destabilisieren und die Klone dann funktionell charakterisieren.