Funktionelle Charakterisierung des Tumor-assoziierten Antigens EpCAM in embryonalen Stammzellen

胚胎干细胞中肿瘤相关抗原 EpCAM 的功能表征

• 批准号: 163413005
• 负责人: Professor Dr. Olivier Gires
• 金额: --
• 依托单位: Klinik und Poliklinik für Hals-, Nasen- und Ohrenheilkunde (Klinikum Großhadern)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2009-12-31 至 2014-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/163413005?language=en
• 关键词: Funktionelle; Charakterisierung; des; Tumor; assoziierten

Das epitheliale Zelladhäsionsmolekül EpCAM ist ein Transmembranprotein, welches in einer Vielzahl von humanen Karzinomen stark exprimiert vorliegt und mit einer schlechten Prognose korreliert. Die erste beschriebene Funktion von EpCAM als Zelladhäsionsmolekül wurde kürzlich durch Arbeiten aus dem Labor des Antragstellers maßgeblich ergänzt. EpCAM ist ein signaltransduzierender Rezeptor mit onkogenem Potential. Die Aktivierung des Signalweges erfolgt durch eine regulierte proteolytische Spaltung EpCAMs, einhergehend mit der Translokation des intrazellulären Anteils EpICD in den Zellkern. In einem hochmolekularen Komplex mit FHL2, β-Catenin und Lef-1 bindet EpICD an DNA und steuert auf diese Weise die Expression von Zielgenen wie c-myc. Diese onkogene Funktion ist im Einklang mit einer beschriebenen starken Überexpression von EpCAM in Krebs-initiierenden, Stammzell- ähnlichen Zellen in diversen Karzinomentitäten (Cancer Stem Cells).Kürzlich gelang dem Labor des Antragstellers der Nachweis einer essenziellen Funktion von murinem EpCAM (mEpCAM) in Maus embryonalen Stammzellen (ES Zellen). mEpCAM ist sehr stark an der Oberfläche von ES Zellen exprimiert und wird im Verlauf der Differenzierung von ES Zellen herunterreguliert. Unter Kulturbedingungen, welche eine Aufrechterhaltung des ES Zellphänotyps gewährleisten, führte die siRNA-vermittelte Hemmung der mEpCAM Expression zu einem deutlichen Verlust der Proliferationskapazität, zur Differenzierung und zu verminderten Expression von klassischen Stammzellmarkern wie Oct3/4 und c-Myc. Umgekehrt induzierte die konstitutive Expression von mEpCAM unter Differenzierungsbedingungen eine Stabilisierung von ES Zellmarkern und von der Proliferation.Im Rahmen des vorliegenden Antrages sollen Signalwege, welche durch mEpCAM in ES Zellen angesteuert werden, molekularbiologisch definiert werden. Erkenntnisse über die Signalwege von Ep- CAM in Tumorzellen und über angesteuerte Zielgene sollen in murinen ES Zellen untersucht werden. Die Bildung eines EpICD/Protein/DNA Komplexes und die Funktion von EpICD in der Regulation des ES Zellphänotyps wird in vitro und in vivo analysiert. Das Wissen um die Funktion von EpCAM in ES Zellen erlaubt eine Optimierung von ES Zellkultur Bedingungen, eine gezielte Steuerung deren Differenzierungsprogramms und nicht zuletzt ein Eingreifen in die Biologie von Cancer Stem Cells.

EpCAM是一种跨膜蛋白，在人类的各种疾病中表现出明显的优势，并具有明显的预后作用。EpCAM的第一个最佳功能是通过Antragstellers的劳动力来实现的。EpCAM是一种具有肿瘤发生潜能的信号转导受体。信号传导的活动通过一种调节蛋白水解的EpCAM进行，通过在Zellkern中的Intrazellulären Anteils EpICD的翻译进行。在一个含有FHL 2、β-Catenin和Lef-1的高分子复合物中，EpICD与DNA结合，并与c-myc一起指导Zielgenen的表达。在Krebs-initiierenden，Stammzell- ähnlichen Zellen的多种癌症干细胞中，EpCAM在Einklang中有一种独特的表达。在Maus embryonalen Stammzellen（ES Zellen）中，Nachweis的Antragstellers的实验中发现了小鼠EpCAM（mEpCAM）的一种重要功能。mEpCAM在ES Zellen的Oberfläche中表现得很明显，并且在ES Zellen的差异中表现得很明显。在培养条件下，通过对ES Zellphänotyps的扩增，发现mEpCAM表达的siRNA-vermittelte Hemmung在一个德国的表达水平上存在差异，并在Oct 3/4和c-Myc的经典Stammzellmarkern上表达。在ES细胞标记和增殖的稳定性差异下诱导mEpCAM的结构性表达，这是一个非常重要的信号通路，通过mEpCAM在ES细胞中的作用，分子生物学意义明确。Ep- CAM信号通路在肿瘤中的作用和在小鼠ES- CAM中的作用均在韦尔登中得到证实. EpICD/蛋白质/DNA复合物的形成及其在ES细胞表型调节中的作用将在体外和体内进行分析。EpCAM在胚胎干细胞中的作用是对胚胎干细胞培养的最优化，是一个差异化的程序，而不是对肿瘤干细胞生物学的一个补充。