权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Funktionelle Charakterisierung von Mediatoren und Zielgenen des "crosstalks" zwischen TGFß- und Ras-Signalkaskaden im Pankreaskarzinom

胰腺癌中 TGFα 和 Ras 信号级联之间“串扰”的介质和靶基因的功能特征

基本信息

批准号：
68523282
负责人：
Professor Dr. Malte Buchholz
金额：
--
依托单位：
Zentrum für Tumor- und Immunbiologie (ZTI)
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2008
资助国家：
德国
起止时间：
2007-12-31 至 2011-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/68523282?language=en
关键词：
Funktionelle Charakterisierung von Mediatoren und

项目摘要

Im Rahmen eines laufenden Projektes haben wir in hoch-parallelisierten Zell-basierten Assays eine große Anzahl von neuen Pankreaskarzinom-Kandidatengenen auf bisher unbekannte Tumor-relevante Funktionen getestet. Insgesamt wurden 14 vielversprechende Kandidaten für weitergehende detaillierte Analysen ausgewählt. Eine erste Publikation zur Rolle des Kandidatengens Galectin-3 (Gal-3) im Pankreaskarzinom ist bereits erschienen (Hann et al., 2011); zwei weitere Manuskripte zu neuen onkogenen Funktionen von Cofilin-1 und FASTK sind eingereicht bzw. in Vorbereitung. Als einer der interessantesten Kandidaten erschien in diesem Zusammenhang das Gen placenta-specific 8 (Plac8), das für ein kleines Protein mit einer Masse von ca. 16 KDa kodiert, dessen physiologische Funktion bisher unbekannt ist. Unsere bisherigen Untersuchungen zeigen, dass Plac8 weder im gesunden noch im entzündlich veränderten Pankreas anzutreffen ist, jedoch in mindestens 70 % der invasiven Adenokarzinome des Pankreas stark überexprimiert wird. Interessanterweise findet sich die gleiche Situation in transgenen Mausmodellen des Pankreaskarzinoms, in denen in der Folge der Pankreas-spezifischen Aktivierung von onkogen mutiertem K-Ras duktale Adenokarzinome mit starker ektopischer Expression von murinem Plac8 entstehen.RNAi-vermittelter knockdown der Plac8-Expression führte zu einer massiven Inhibition der Proliferation in allen untersuchten Pankreaskarzinom-Zelllinien, die sich auch in einer signifikant verminderten Fähigkeit der Zellen zu substratunabhängigem Wachstum äußerte. Apoptoseraten waren hingegen nicht verändert. Durchflusszytometrische Untersuchungen ergaben, dass sowohl der G1/S- als auch der G2/M-Phasenübergang im Zellzyklus nach Plac8-knockdown verlangsamt waren. Da die molekulare Funktion von Plac8 bisher völlig ungeklärt ist, existieren bisher jedoch keine Anhaltspunkte dafür, über welche Mechanismen diese Effekte vermittelt werden.In dem hier beantragten Projekt sollen diese molekularen Mechanismen aufgeklärt und somit auch mögliche neue Ansatzpunkte für therapeutische Interventionen identifiziert werden. In Zusammenarbeit mit Kooperationspartnern sollen hierbei unter anderem reverse phase protein arrays eingesetzt werden, um Veränderungen in zellulären Signalkaskaden nach Plac8-knockdown zu charakterisieren. Metabolische Markierung von Proteinen mit stabilen Isotopen (SILAC) mit anschließender Plac8-Immunpräzipitation und massenspektroskopischen Analysen soll eingesetzt werden, um direkte Interaktionspartner von Plac8 zu identifizieren. Parallel dazu sollen gut definierte transgene Mausmodelle des Pankreaskarzinoms auf den generalisierten Plac8-knockout-Hintergrund gezüchtet werden, um die Auswirkungen des Wegfalls der ektopischen Plac8-Expression auf die Entstehung und Progression von Pankreastumoren bzw. Vorläuferläsionen zu analysieren.

我的研究项目是在高度并行的 Zell-basierten Assays 中进行的，它是一个大的 Anzahl von Neuen Pankreaskarzinom-Kandidatengenen auf bisher unbekannte 肿瘤相关功能 getestet。 Insgesamt wurden 14 vielversprechende Kandidaten für weitergehende 详细分析 ausgewählt。 Eine erste Publikation zur Rolle des Kandidateengens Galectin-3 (Gal-3) im Pankreaskarzinom ist bereits erschienen (Hann et al., 2011)；这是 Cofilin-1 和 FASTK 的新 Onkogenen Funktionen 手册。在 Vorbereitung 中。 Als einer der interessantesten Kandidaten erschien in the diesem Zusammenhang das Gen placenta-specific 8 (Plac8), das für ein kleines Protein mit einer Masse von ca. 16 KDa 是生理学功能的一部分。 Unsere bisherigen Untersuchungen zeigen, dass Plac8 weder im gesunden noch im entzündlich veränderten Pankreas anzutreffen ist, jedoch in mindestens 70 % der Invasiven Adenokarzinome des Pankreas stark überexprimiert wird. Interessanterweise findet sich die gleiche Situation in transgenen Mausmodellen des Pankreaskarzinoms, in denen in der Folge der Pankreas-spezifischen Aktivierung von onkogen mutiertem K-Ras duktale Adenokarzinome mit starker ektopischer Expression von murinem Plac8 entstehen.RNAi-vermittelter 击倒 Plac8 表达，以抑制在所有 Pankreaskarzinom-Zelllinien 中的增殖，从而在最重要的 Verminderten Fähigkeit der Zellen zu substratunabhängigem Wachstum äußerte 中发挥重要作用。凋亡血清是指细胞凋亡的产物。 Durchflusszytometrische Untersuchungen ergaben, dass sowohl der G1/S- as auch der G2/M-Phasenubergang im Zellzyklus nach Plac8-knockdown verlangsamtwaren. Plac8 的分子功能是非常重要的，它存在于机械装置中，其机械装置的作用非常明显。 mögliche neue Ansatzpunkte für therapeutische Interventionen identifiziert werden。在与合作伙伴合作的项目中，反相蛋白芯片在反相蛋白阵列中的应用，是在 Signalkaskaden 中使用 Plac8 敲低特性的。具有稳定同位素的蛋白质代谢标记 (SILAC) 与 Plac8 免疫操作和大规模分析均在我们的指导下，直接由 Plac8 的 Interaktionspartner 进行识别。并行大祖索伦肠定义转基因Mausmodelle des Pankreaskarzinoms auf den Generalisierten Plac8-knockout-Hintergrund gezüchtet werden，um die Auswirkungen des Wegfalls der ektopischen Plac8-Expression auf die Entstehung und Progression von Pankreastumoren bzw。 Vorläuferläsionen zu analysieren。