Funktionelle Charakterisierung von Mediatoren und Zielgenen des "crosstalks" zwischen TGFß- und Ras-Signalkaskaden im Pankreaskarzinom

胰腺癌中 TGFα 和 Ras 信号级联之间“串扰”的介质和靶基因的功能特征

• 批准号: 68523282
• 负责人: Professor Dr. Malte Buchholz
• 金额: --
• 依托单位: Zentrum für Tumor- und Immunbiologie (ZTI)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2007-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/68523282?language=en
• 关键词: Funktionelle; Charakterisierung; von; Mediatoren; und

Im Rahmen eines laufenden Projektes haben wir in hoch-parallelisierten Zell-basierten Assays eine große Anzahl von neuen Pankreaskarzinom-Kandidatengenen auf bisher unbekannte Tumor-relevante Funktionen getestet. Insgesamt wurden 14 vielversprechende Kandidaten für weitergehende detaillierte Analysen ausgewählt. Eine erste Publikation zur Rolle des Kandidatengens Galectin-3 (Gal-3) im Pankreaskarzinom ist bereits erschienen (Hann et al., 2011); zwei weitere Manuskripte zu neuen onkogenen Funktionen von Cofilin-1 und FASTK sind eingereicht bzw. in Vorbereitung. Als einer der interessantesten Kandidaten erschien in diesem Zusammenhang das Gen placenta-specific 8 (Plac8), das für ein kleines Protein mit einer Masse von ca. 16 KDa kodiert, dessen physiologische Funktion bisher unbekannt ist. Unsere bisherigen Untersuchungen zeigen, dass Plac8 weder im gesunden noch im entzündlich veränderten Pankreas anzutreffen ist, jedoch in mindestens 70 % der invasiven Adenokarzinome des Pankreas stark überexprimiert wird. Interessanterweise findet sich die gleiche Situation in transgenen Mausmodellen des Pankreaskarzinoms, in denen in der Folge der Pankreas-spezifischen Aktivierung von onkogen mutiertem K-Ras duktale Adenokarzinome mit starker ektopischer Expression von murinem Plac8 entstehen.RNAi-vermittelter knockdown der Plac8-Expression führte zu einer massiven Inhibition der Proliferation in allen untersuchten Pankreaskarzinom-Zelllinien, die sich auch in einer signifikant verminderten Fähigkeit der Zellen zu substratunabhängigem Wachstum äußerte. Apoptoseraten waren hingegen nicht verändert. Durchflusszytometrische Untersuchungen ergaben, dass sowohl der G1/S- als auch der G2/M-Phasenübergang im Zellzyklus nach Plac8-knockdown verlangsamt waren. Da die molekulare Funktion von Plac8 bisher völlig ungeklärt ist, existieren bisher jedoch keine Anhaltspunkte dafür, über welche Mechanismen diese Effekte vermittelt werden.In dem hier beantragten Projekt sollen diese molekularen Mechanismen aufgeklärt und somit auch mögliche neue Ansatzpunkte für therapeutische Interventionen identifiziert werden. In Zusammenarbeit mit Kooperationspartnern sollen hierbei unter anderem reverse phase protein arrays eingesetzt werden, um Veränderungen in zellulären Signalkaskaden nach Plac8-knockdown zu charakterisieren. Metabolische Markierung von Proteinen mit stabilen Isotopen (SILAC) mit anschließender Plac8-Immunpräzipitation und massenspektroskopischen Analysen soll eingesetzt werden, um direkte Interaktionspartner von Plac8 zu identifizieren. Parallel dazu sollen gut definierte transgene Mausmodelle des Pankreaskarzinoms auf den generalisierten Plac8-knockout-Hintergrund gezüchtet werden, um die Auswirkungen des Wegfalls der ektopischen Plac8-Expression auf die Entstehung und Progression von Pankreastumoren bzw. Vorläuferläsionen zu analysieren.

Im Rahmen Eines laufenden projektes haben wil in Hoch-Parallelisierten Zell-Basierten分析EineGroßeAnzahlanzahl von neuen pankreaskreaskarzinom-kandidatengenen auf-kandidatengenen auf Bisher-Bisher unbekannte unbekannte unbekannte tume tumor-relevane-relevante funkte funkteenen getestet。 Insgesamt Wurden 14 VielversPrechende Kandidatenfürweitergehende detaillierte analysenausgewählt。 eine ereste Publikation Zur Rolle des Kandidatengens Galectin-3（Gal-3）Im Pankreaskarzinom ist bereits erschienen（Hann等，2011）; Zwei Weitere manuskripte Zu Neuen Onkogenen funktionen von cofilin-1 und fastk sind eingereicht bzw.在Vorbereitung。 diesem Zusammenhang das gen Gen gen placenta特异性8（plac8），dasfüreinkleines蛋白质蛋白质蛋白MIT Einer Masse Masse von Ca中的Als einer der insessantesten kandidaten erschien。 16 Kda Kodiert，Dessen Physiologische Funktion Bisher Unbekannt是一个不稳定的地方，Plac8 Weder im Gesunde，Plac8 Weder im Gesunde，Plac8 Weder im Gesunde，Plac8 Weder im Gesunde，Plac8 Mindesting，时间为70％的时间，Pankreas stark stark uberexprimimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimiimii rimiimiimiimii riveert wild wild wild。 Denen的转基因Mausmodellen des Pankreaskarzinoms中的Intersesanterweise Findet在Denen的der folge Pankreas-spezifischen Aktivierung von onkogen von onkogen the k-ras duktale duktale duktale adenokarzinome mit starker starker starker ektopischer表达von murinem pers8。 RNAi-Vermittelter敲低plac8-ExpressionführteZu einer在所有Untersuchten Pankreaskarzinom-Zelllinien中大规模扩散，在Einer Inginer sigh Auch in einer sigh auch in einer signifikantvermindertenfähigkeitde Zellen Zellen Zellen Zulen Zulen Zu Zu Zusudtatunabhängängängäulwachstumauloustee。 Apoptoserateen警告Hingegen Nicht Verndert。 Durchflusszytometrische Untersuchungen，g1/s-g2/m-lashubergang，Zellzyklus plac8-Knockdown verlangsamt Warren。除Plac8外，该公司还拥有强大的业务，目前正在提供各种服务，包括Plac8，这是居住在该国的人们的热门选择。机构Aufgeklärt和somitauchmöglicheneueansatzpunktefürtherapeutischeInterventionen Isventionen识别Werden。在Zusammenarbeit中，MIT Kooperationspartnern Sollen Hierbei Unter Anderem反相蛋白阵列Eingesetzt Werden，umveränderungeninZellulärensignallärensignallärennachennach nach nach nach nach plac8-Knockdown-nockdown zu zu charakterisieren。代谢Markierung von蛋白蛋白MIT稳定剂同位素（SILAC）MITANSCHLIEßERDERPLAC8-IMMUNPRäZipitation是一个流行的分析目的地，InteraktionsPartner对Plac8产生了强大的影响。平行的Dazu sollen肠道defenerte threcte trainerte mausmodelle des pankreaskarzinoms auf den generalisierten plac8-knockout-hindgrundgezüchtetwerden和wegfalls plac8 plac8-expression auf auf auf die entstehung die die entstehung die die die die die von und progression von pankreastumorin belseastumorin bbzw. VorläuferläsionenZu分析仪。

项目成果

Claudin-4-targeted optical imaging detects pancreatic cancer and its precursor lesions

• DOI: 10.1136/gutjnl-2012-302577
• 发表时间: 2013-07-01
• 期刊: GUT
• 影响因子: 24.5
• 作者: Neesse, Albrecht;Hahnenkamp, Anke;Michl, Patrick
• 通讯作者: Michl, Patrick