Dissektion der Rolle von CIC-5 und anderen vesikulären CLCs bei der renalen Endozytose und tubulären Transportprozessen

CIC-5是近端肾小管上皮细胞(apikalen endosomen des apikalen tubulus，PT)外基质中的CI-/H-Gegenaustauscher。在Mäusen führt zu einem Endozyto Flowkt im PT and zur Dent schen Erkrankung im Menschen中，Der基因敲除了von CIC-5。我是细胞质CIC-5 Ein PY-Motiv，Dasüber Interaktion Mit WW-Domänen von Ubiquiquiinrigasen zu einer Verstärkten Internalisierung von der Prommam an füHRT.Wir wollen nnn den Effekt einer Punktt，die die interaktion Mit Ubiquiquinigasen体外培养，体内试验。大足是在近端肾小管的内切酶和内切酶的作用下，在近端肾小管发生了一系列的基因突变。用免疫组织化学方法分析了一种杂合子Webchen、Chimär für CIC-5 SIND、ERFLOGen的内切酶von荧光标记蛋白。我们在CIC-5和UBUBIQUIINIINIERRONG Für De Renale Endozytose Endozytose Aluch Erkenntnisseüber den Machismus der Proteinurie and Ander Symptome Be der Dent Schen Erkrankung des Menschen中找到了新的概念。在Einem Zweiten Teilprojekt WolledWire WolledWire Die Beteiligung Ander Endoosomaler Clc and der Endozytose im PT Durch Generierung and analyze gewebsSpezifischer dopel-kos unteruchen.

CIC-5 ist ein CI-/H+-Gegenaustauscher, der insbesondere in apikalen Endosomen des proximalen Tubulus (PT) exprimiert ist. Der knock-out von CIC-5 in Mäusen führt zu einem Endozytosedefekt im PT und zur Dent schen Erkrankung im Menschen. Im cytoplasmatischen Carboxy-Terminus besitzt CIC-5 ein PY-Motiv, das über Interaktion mit WW-Domänen von Ubiquitinligasen zu einer verstärkten Internalisierung von der Plasmamembran führt. Wir wollen nun den Effekt einer Punktmutation, die die Interaktion mit Ubiquitinligasen in vitro zerstört, in vivo testen. Dazu werden wir eine knock-in Maus herstellen, bei der wir im Clcn5 Gen die entsprechende Punktmutation einbauen und die Endozytose im proximalen Tubulus untersuchen. Dies wird unter anderem durch immunzytochemische Analyse des Zeitverlaufs der Endozytose von fluoreszenzmarkierten Proteinen an heterozygoten Weibchen, die chimär für CIC-5 sind, erfolgen. Wir erhoffen uns sowohl wichtige neue Einblicke in die Rolle von CIC-5 und Ubiquitinierung für die renale Endozytose als auch Erkenntnisse über den Mechanismus der Proteinurie und anderer Symptome bei der Dent schen Erkrankung des Menschen. In einem zweiten Teilprojekt wollen wir die Beteiligung anderer endosomaler CLC an der Endozytose im PT durch Generierung und Analyse gewebsspezifischer Doppel-KOs untersuchen.