Dissektion der Rolle von CIC-5 und anderen vesikulären CLCs bei der renalen Endozytose und tubulären Transportprozessen

CIC-5在豚鼠近端小管内泌体（PT）实验中的表达。在Mäusen fhrt中敲除CIC-5在PT和zur Dent schen Erkrankung in Menschen中的表达。in cytoplasmatischen Carboxy-Terminus besitzt CIC-5 in py - motive, das ber Interaktion mit WW-Domänen von Ubiquitinligasen zu einer verstärkten Internalisierung von der Plasmamembran f<e:2> hrt。泛素连接素在体外的相互作用zerstört，体内试验。大足是用基因敲入鼠腔，用基因敲入鼠腔，用基因敲入鼠腔，用基因敲入鼠腔，用基因敲入鼠腔，用酶切法敲入近端小管腔。荧光标记蛋白与杂合子Weibchen， die chimär f<e:1> r CIC-5 sind, erfolgen。与此同时，研究人员还发现了一种新的酶切酶切方法，即酶切酶切酶切方法和酶切酶切方法。在einem的teilproject中，研究了内质胞质CLC和内质胞质PT下的内质胞质酶（Endozytose）的生成和分析。

CIC-5 ist ein CI-/H+-Gegenaustauscher, der insbesondere in apikalen Endosomen des proximalen Tubulus (PT) exprimiert ist. Der knock-out von CIC-5 in Mäusen führt zu einem Endozytosedefekt im PT und zur Dent schen Erkrankung im Menschen. Im cytoplasmatischen Carboxy-Terminus besitzt CIC-5 ein PY-Motiv, das über Interaktion mit WW-Domänen von Ubiquitinligasen zu einer verstärkten Internalisierung von der Plasmamembran führt. Wir wollen nun den Effekt einer Punktmutation, die die Interaktion mit Ubiquitinligasen in vitro zerstört, in vivo testen. Dazu werden wir eine knock-in Maus herstellen, bei der wir im Clcn5 Gen die entsprechende Punktmutation einbauen und die Endozytose im proximalen Tubulus untersuchen. Dies wird unter anderem durch immunzytochemische Analyse des Zeitverlaufs der Endozytose von fluoreszenzmarkierten Proteinen an heterozygoten Weibchen, die chimär für CIC-5 sind, erfolgen. Wir erhoffen uns sowohl wichtige neue Einblicke in die Rolle von CIC-5 und Ubiquitinierung für die renale Endozytose als auch Erkenntnisse über den Mechanismus der Proteinurie und anderer Symptome bei der Dent schen Erkrankung des Menschen. In einem zweiten Teilprojekt wollen wir die Beteiligung anderer endosomaler CLC an der Endozytose im PT durch Generierung und Analyse gewebsspezifischer Doppel-KOs untersuchen.