Identifikation und Charakterisierung von Mutanten der Kopfsegmentierung im Mehlkäfer Tribolium castaneum (Coleoptera)

赤拟谷盗(鞘翅目)头节突变体的鉴定和表征

基本信息

项目摘要

Es ist nicht bekannt, wie der Drosophila-Kopf segmentiert wird. Allerdings weiß man, dass das Prinzip anders sein muss als im Rumpf und dass einige homologe Gene sowohl bei Vertebraten als auch bei Drosophila an der Kopfentwicklung beteiligt sind. Als Modellsystem der Kopfentwicklung ist Drosophila ungeeignet, weil die abgeleitete Morphologie des larvalen Kopfes die Interpretation von Mutationen erschwert. Deshalb wird von uns der Reismehlkäfer Tribolium castaneum als Insekten-Modellsystem für die Kopfentwicklung etabliert. Derzeit ist unser Labor an einem Insertionsmutagenese Screen beteiligt, in dem 20.000 homozygot lethale Linien sowie Enhancer-Trap-Linien identifiziert werden. In dem hier beantragten Projekt sollen alle Insertions-Linien auf Enhancer-Traps oder Phänotypen im Kopf gescreent werden. Die Mutationen werden molekular charakterisiert und der Phänotyp molekular und histologisch untersucht. Die beteiligten Gene und ihre Interaktionen werden analysiert um sie in ein regulatorisches Netzwerk einzuordnen und dieses mit der Situation in Drosophila und Vertebraten zu vergleichen. Zudem sollen zwei Techniken der funktionellen Genanalyse etabliert werden: 1) hitzeschockinduzierte Missexpression von Genen. 2) Die ortsspezifische Integration von Konstrukten an der attP Sequenz mit Hilfe der (C31 Integrase. Da der Mutator des Insertionsmutagenese-Screens die attP Sequenz trägt, kann man dadurch Integrationen aus dem Screen in Werkzeuge umwandeln. So zum Beispiel Enhancer-Trap Linien in Gal4 Treiber-Linien zur ektopischen Expression von Genen. Auch kann die attP Stelle des Mutators zu Rettungsexperimenten genutzt werden. Dieses Projekt kann Gene identifizieren, von denen bisher nicht bekannt war, dass sie an der Kopfentwicklung beteiligt sind.
这不像果蝇-科普夫那样容易。因此,这些原则和它们必须存在于Rumpf中,并且在脊椎动物中的一个同源基因也存在于果蝇中,并且具有更好的功能。果蝇是一个很好的基因突变模型系统,因为果蝇幼虫的形态学可以解释突变。本文将介绍一种用于建立摩擦磨损试验模型的方法。目前我们正在进行一项插入突变筛选试验,在20000例同型混合物致死性菌株中使用增强子-捕获物-鉴定韦尔登。在该项目中,所有插入线都位于增强子陷阱上,或位于Kopf中的Phänotypen上,这是韦尔登。突变的韦尔登分子特征和表型分子及组织学特征。在果蝇和脊椎动物中,更好的发光基因和它们的相互作用韦尔登分析是一种调节网络和疾病。因此,需要解决两种功能基因分析技术:1)基因表达缺失。2)在C31整合酶的帮助下,构建体与attP序列的最佳整合。插入突变体-筛选的attP序列转移,可以在工作中从筛选中进行整合。因此,在Gal 4基因的表达调控中,增强子-捕获子的作用是非常重要的。也可以把突变体的标本送到韦尔登。这个项目可以进行基因鉴定,但这并不意味着它可以作为一种基因识别工具。

项目成果

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