Post-transcriptional regulation by CCCH-type zinc finger family of Plasmodium parasites

疟原虫CCCH型锌指家族的转录后调控

• 批准号: 21K06985
• 负责人: 新澤 直明
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06985/
• 关键词: マラリア原虫; RNA結合タンパク質; TRIBE法; 局在解析; 転写後調節; ジンクフィンガー; 遺伝子発現

マラリア原虫のステージ形成に必要な秩序立ったタンパク質発現には、発現遺伝子群の転写活性化に続くRNAの翻訳、安定化・分解などの転写後調節機構が必須である。本研究では、各ステージ形成に共通する転写後調節機構の基本原理を明らかにするため、原虫生活環全体にファミリー分子が存在し、マラリア原虫種間に高い保存性を持つTZFファミリーに着目した。新規標的RNA同定法と革新的ゲノム編集法の2つを基盤技術として、TZFファミリーの機能を明らかにすることで、各ステージ形成におけるTZFファミリーによる転写後調節機構の共通原理の解明を目指す。本年度は、生殖母体期TZFの標的RNA解析を試みた。昨年度に作出した生殖母体期のTZFのADAR融合遺伝子発現株(TZF-G::ADAR)を用いたTRIBE法を実施した。バイオインフォマティクス解析によってmRNAが編集された遺伝子を解析し、標的RNAのリストアップを試みた。ADARのみを強制発現させたコントロール株においても、多数のmRNAに編集が観察された。TZF-G::ADARとコントロール株における編集mRNAに明確な差は検出することはできなかった。一方、TZF-GのGFP融合株における詳細な局在解析を行った結果、雄雌両方の生殖母体の細胞質においてドット状に発現することが明らかになった。また、受精後に発現するTZF-G3に関してもGFP融合株における局在解析を行った結果、同様に細胞質におけるドット状の発現パターンを示した。このドット状の発現パターンは、P-bodyやストレス小胞のような無膜オルガネラであることが予想され、TZFファミリーは翻訳抑制複合体と関わることが予想された。

The regulation mechanism of RNA translation, stabilization, decomposition and post-writing is necessary for the formation of protozoa. In this study, the basic principles of post-writing regulatory mechanisms common to all protozoan species were clarified, and the molecular existence of all protozoan life cycles was investigated. The new standard RNA identification method and the innovation of the two kinds of base plate technology, TZF, TZF, TZF, This year, we tried to analyze the target RNA of TZF in reproductive maternal stage. The ADAR fusion gene of TZF was developed in the reproductive maternal stage last year (TZF-G::ADAR) and implemented using the TRIBE method. For example, the expression of mRNA in the genome is analyzed and the expression of target RNA is analyzed. ADAR gene expression was detected in the middle of the cell, and most of the mRNA was encoded in the cell. TZF-G::ADAR is the first to compile mRNA. The results of analysis of GFP fusion strains of TZF-G and TZF-G were as follows: Cytoplasmic morphology of male and female reproductive mothers was observed. TZF-G3 fusion protein was detected after fertilization. The results of the analysis were as follows: The P-body structure of the cell is composed of a membrane and a TZF.

项目成果

Generation of Transgenic Mosquitoes Harboring a Replication-Restricted Virus

携带复制限制病毒的转基因蚊子的产生

• DOI: 10.3389/fitd.2022.850111
• 发表时间: 2022
• 期刊: Frontiers in Tropical Diseases
• 作者: Shinzawa Naoaki;Kashima Chisako;Aonuma Hiroka;Takahashi Kei;Shimojima Masayuki;Fukumoto Shinya;Saiki Erisha;Yamamoto Daisuke S.;Yoshida Shigeto;Matsuoka Hiroyuki;Kawaoka Yoshihiro;Kanuka Hirotaka
• 通讯作者: Kanuka Hirotaka

マラリア原虫デンスグラニュールタンパク質の局在解析

疟疾寄生虫致密颗粒蛋白的定位分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 森田 将之;湯口 貴聡;新澤 直明;坪井 敬文;高島 英造
• 通讯作者: 高島 英造

オーキネートのクリスタロイドタンパク質 PyCryPH2 は唾液腺侵入に関与する

植物生长素晶体蛋白 PyCryPH2 参与唾液腺侵袭

• 发表时间: 2023
• 作者: 橘 真由美;鳥居 本美;新澤 直明;馬場 みなみ;Richard Culleton;石野 智子
• 通讯作者: 石野 智子

CRISPR/Cas9 ゲノム編集法を用いた熱帯熱マラリア原虫の薬剤耐性遺伝子の再評価

利用CRISPR/Cas9基因组编辑方法重新评估恶性疟原虫耐药基因

• 发表时间: 2021
• 作者: 窪田 理恵;新澤 直明;岩永 史朗
• 通讯作者: 岩永 史朗

非必須遺伝子間領域を用いたmCherry恒常発現熱帯熱マラリア原虫の作出

使用非必需基因间区域构建组成型表达 mCherry 的恶性疟原虫

• 发表时间: 2023
• 作者: 関根 崇;窪田 理恵;大久保 和;石野 智子;新澤 直明
• 通讯作者: 新澤 直明