エンドセリン受容体cDNAを利用したその発現調節因子及び細胞内情報伝達機構の解明

利用内皮素受体cDNA阐明内皮素受体表达调节因子和细胞内信号转导机制

• 批准号: 03268217
• 负责人: 影山 龍一郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03268217/
• 关键词: エンドセリン; エンドセリン受容体; 組織分布; 細胞内情報伝達系

エンドセリンは3種類の内在性ペプチドETー1、ETー2、ETー3からなり、循環器系を中心に広範な薬理作用を持っている。我々は最近、2種類のエンドセリン受容体ET_A及びET_BのcDNAクロ-ンを得、構造解析を行ってきたが、さらに以下に述べるような詳細な組織分布及び機能解析を行ったので報告する。イン・サイツ・ハイブリダイゼ-ション及びノザン法によるmRNAの組織分布を見たところ、ET_Aは種々の臓器の血管平滑筋細胞、気管支平滑筋細胞、心筋及び脳下垂体前葉に高発現がみられた。一方、ET_Bは中枢神経系のグリア細胞、脈絡叢の上皮細胞、脳室周囲の上衣層、心筋、腎糸球体の内皮細胞、ヘレン・ル-プの細い脚の上皮細胞などに高発現がみられた。以上から、2種類の受容体は中枢及び末梢組織において全く異なる発現分布を示すことが明らかとなった。次に、2種類の受容体を哺乳動物細胞で発現させて結合能をしらべたところ、ET_AはETー1>ETー2>ETー3の順に高い親和性を示し、ET_Bは3種のTEに対してほぼ同等の親和性を示した。さらに、各受容体の情報伝達を解析したところ、(1)両受容体はETの刺激によりIP_<3->Ca^<2+>系を活性化すること、(2)両受容体の刺激はアラキドン酸の遊離を亢進すること、(3)ET_AはG蛋白質を介してアデニル酸シクラ-ゼ促進系に共役し細胞内CAMP濃度を上昇させるが、ET_Bは抑制系に共役しホルスコリンで刺激したCAMPが生成を抑制することが明らかとなった。以上の結果は、両受容体がそれぞれ異なるG蛋白質を介して複数の細胞内情報伝達系とサブタイプ特異的に共役することを示している。これらの研究成果は、高血圧や血管攣縮などの病態におけるエンドセリンの作用を明らかにする上で重要な基礎になるものと考えられる。

エ ン ド セ リ ン は 3 kinds の internality ペ プ チ ド ET ー 1, 2, ET ET ー ー 3 か ら な り, circulator を center に hiroo van な 薬 conditioning を hold っ て い る. I 々 は recently, 2 species の エ ン ド セ リ ン let body ET_A and び ET_B の cDNA ク ロ - ン を, structure line を っ て き た が, さ ら に に below mentioned べ る よ う な な organization in detail analytical を line distribution and function of び っ た の report で す る. イ ン · サ イ ツ · ハ イ ブ リ ダ イ ゼ - シ ョ ン and び ノ ザ ン method に よ る mRNA の organization distribution を see た と こ ろ, ET_A は kind 々 の viscera の vascular smooth muscle cells, 気 tube smooth muscle cells, heart muscle and び 脳 pituitary under high に 発 now が み ら れ た. Side, ET_B は central 経 god is の グ リ ア cells, epithelial cells of the choroid plexus の, 脳 room weeks 囲 の coat layer, the heart muscle, kidney, ヘ si sphere の endothelial cells レ ン · ル - プ の fine い foot の epithelial cells な ど に high 発 now が み ら れ た. Above か ら は central, 2 kinds の capacity and び peripheral tissue に お い て く all different な る を 発 now distribution in す こ と が Ming ら か と な っ た. に, 2 species の is let body を mammalian cells で 発 now さ せ て binding energy を し ら べ た と こ ろ, ET_A は ET ー 1 2 > > ET ー ET ー 3 の shun に high い affinity を し, ET_B は three の TE に し seaborne て ほ ぼ equal の affinity を shown し た. さ ら に, each by the capacity of body の intelligence 伝 を parsing し た と こ ろ, (1) under let body は ET の struck に よ り IP_ < 3 - > Ca ^ 2 + > < department を activeness す る こ と, (2) under let body の struck は ア ラ キ ド の ン acid free を hyperthyroidism す る こ と, (3) ET_A は G protein を interface し て ア デ ニ ル acid シ ク ラ - に ゼ promote department Total service し intracellular concentration CAMP を rise さ せ る が, ET_B し は inhibition of に jointly service ホ ル ス コ リ ン で stimulus し た CAMP が を inhibition of す る こ と が Ming ら か と な っ た. の above results は, struck the body が そ れ ぞ れ different な る G protein を interface し て plural intelligence 伝 da is の cell と サ ブ タ イ プ す に of specific service る こ と を shown し て い る. は こ れ ら の research results, high blood 圧 や vascular contracture な ど の pathological に お け る エ ン ド セ リ ン の role を Ming ら か に す る で important な based に な る も の と exam え ら れ る.

项目成果

Kageyama,R.: "In vitro transcription of epidermal growth factor receptor" Methods in Enzymology. 198. 242-250 (1991)

Kageyama,R.：“表皮生长因子受体的体外转录”酶学方法。

Kageyama,R.: "Molecular charactrization of transcription factors that bind to the cAMP responsive region of the substance P prewrsor gene:cDNA cloning of a novel C/EPBーrelated factor." Jounal of Biological Chemistry. 266. 15525-15531 (1991)

Kageyama, R.：“与 P 前体基因的 cAMP 反应区结合的物质转录因子的分子特征：新型 C/EPB 相关因子的 cDNA 克隆。”《生物化学杂志》266。15525-15531（1991 年） ）

Hirata,M.: "Cloning ang expression of cDNA for a human thromboxane A_2 receptor" Nature. 349. 617-620 (1991)

Hirata,M.：“人血栓素 A_2 受体 cDNA 的克隆和表达”《自然》杂志。