Wirkung von Entzündungsmediatoren auf enterische Neurone

炎症介质对肠神经元的影响

基本信息

项目摘要

Ziel dieses Projektes ist es, die Wirkung zweier Entzündungsmediatoren, Thromboxan A2 (TXA2) und NO, auf enterische Neurone zu untersuchen und die beteiligten Signaltransduktionswege abzuklären.Dazu sollen intakte Ganglien aus dem Plexus myentericus von neugeborenen Ratten präpariert und in Primärkultur gehalten werden. Vorbefunde zeigen, dass sowohl TXA2 als auch NO eine Hyperpolarisation der Membran (gemessen in Whole-Cell Patch-Clamp Ableitungen) auslösen, die mit einem Anstieg der zytosolischen Ca2+ -Konzentration einhergeht, wie entsprechende Imaging-Versuche mit Fura-2 belegen. Durch Einsatz von spezifischen Inhibitoren zur gezielten Entleerung intrazellulärer Speicher bzw. von Blockern von spannungsabhängigen Ca2+-Kanälen soll herausgefunden werden, ob der Ca2+-Anstieg durch eine Ca2+ -Freisetzung via IP3- bzw. Ryanodinrezeptoren oder einen Ca2+ -Einstrom aus dem Extrazellulärraum hervorgerufen wird. In Whole-Cell Patch-Clamp Experimenten sollen durch Wahl geeigneter Pipetten- bzw. Perfusionslösungen Ca2+-Ströme und ihre Modulierbarkeit durch Entzündungsmediatoren direkt gemessen werden.Die Frage, wie enterische Ganglien solche Mediatoren herstellen, soll durch molekularbiologischen Nachweis (RT-PCR) bzw. immunhistochemische Markierung der Schlüsselenzyme für ihre Bildung (TXA2-Snythase bzw. NO-Synthase(n)) erfolgen.
这些研究项目包括两种介导因子,血栓素A2(TXA 2)和一氧化氮(NO),它们对神经元的损伤和信号转导的影响。首先,TXA 2也不会引起膜超极化(在全细胞膜片钳技术中出现),这与Fura-2的影像学检查一样。在特殊情况下,可通过特殊的抑制剂来实现特殊的内部抑制。通过IP 3- bzw阻断Ca 2 +-通道,使Ca 2 +-通道通过一个Ca 2 +-通道阻断,从而获得韦尔登。Ryanodinrezeptoren或一个Ca 2 + -Einstrom从dem Extrazellulärraum hervorgerufen wird。在全细胞膜片钳实验中,通过Wahl geigneter Pipetten- bzw。通过韦尔登介导的灌流产生Ca ~(2+)-Ströme和其调节剂。免疫组织化学标记Schlüsselenzyme für irre Bildung(TXA 2-Snythase bzw.一氧化氮合酶(n)。

项目成果

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