Development of a novel genome editing method through transient arrest control of the tumor suppressor protein p53

通过肿瘤抑制蛋白 p53 的瞬时抑制控制开发新型基因组编辑方法

• 批准号: 20H02873
• 负责人: 坂口 和靖
• 金额: $ 11.4万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H02873/
• 关键词: 癌抑制タンパク質p53; 多量体形成; ゲノム編集; ペプチド; 一過的阻害

ゲノム編集は、次世代の遺伝子治療法として大きな注目を集めている。しかしながら、CRISPR/Cas9においても、癌抑制タンパク質p53が変異・欠損している細胞に対して優先的にゲノム編集が起こり、治療後に細胞癌化の副作用の恐れがある。このため、有効な治療法が遺伝子治療のみである遺伝性疾患等の治療のために、より安全なゲノム編集法の開発が求められている。安全なゲノム編集のためには、細胞癌化の抑制機構経路の中心であるp53機能を『一過的』に停止制御することが必須である。本研究では、癌抑制タンパク質p53機能の時間的制御による新規ゲノム編集法の開発研究を実施する。すなわち、p53の機能発現に必須な四量体形成を介して、ゲノム編集するときのみp53活性を停止させ、効率的なゲノム編集を達成し、編集後にp53活性を回復させることにより細胞癌化を抑止可能な安全なゲノム編集法の開発を目指す。初年度は、コイルドコイルペプチドによる機能性ペプチドの多量体化がその生理活性に及ぼす効果を制御することを見出した。今年度は、機能性ペプチドとして我々が発見した抗菌活性ペプチドr-Pep1を用い、その多量体化により大腸菌および哺乳細胞の増殖に対する効果を顕著に変化させることを見出した。さらに、一過的にp53の機能を阻害した際のゲノム編集効率を解析するため、ID-p53Tetペプチドの機能解析のためのp53活性およびゲノム編集効率を同時にモニターするレポーター系を確立した。本研究における、多量体化を基盤とした新規機能性ペプチドの創成および癌抑制タンパク質p53のヘテロオリゴマー化を介した一過的機能阻害ペプチドID-p53Tetの開発により、安全かつ効率的なゲノム編集法の開発が強く期待される。

To compile the next generation of genetic therapy, we need to focus on the next generation. CRISPR/Cas9 gene expression, cancer suppressor gene expression, p53 gene expression, cell damage, and side effects of cell carcinogenesis after treatment. The development of safe and effective methods for the treatment of genetic diseases The safety of the system is the key to the prevention of cancer. This study aims to investigate the development of a new method for controlling the timing of tumor suppressor gene p53 function. The functional development of p53 requires the formation of four molecules, the activation of p53, the activation of p53, the completion of p53, the recovery of p53 activity, the inhibition of cell carcinogenesis, and the development of safe p53. At the beginning of the year, the functional properties of the multi-dimensional structure and the control of the effect were revealed. This year, we have found that the antibacterial activity of the functional protein is very high, and that the activity of the protein is very high. We have also found that the activity of the protein is very high, and the activity of the protein is very high. In addition, the function of p53 has been blocked, and the composition efficiency has been analyzed. The function analysis of p53 activity and composition efficiency of ID-p53Tet has been established simultaneously. This study aims to provide a new functional approach to the development of multi-dimensional, multi-dimensional, multi

项目成果

Interaction of Arginine Residues with phosphate group in the Active Site of Ser/Thr Phosphatase PPM1A

精氨酸残基与丝/苏氨酸磷酸酶 PPM1A 活性位点磷酸基团的相互作用

• 发表时间: 2021
• 作者: Shogo Ito;Itsumi Tani;Yukiko Shirahata;Yasuyuki Shimohigashi;Rui Kamada;Kazuyasu Sakaguchi
• 通讯作者: Kazuyasu Sakaguchi

コイルドコイルを介したペプチドの多量体化による生理活性増強効果

卷曲螺旋肽多聚化的生理活性增强作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 布川優奈;坂口周弥;碓井拓哉;鎌田瑠泉;坂口和靖
• 通讯作者: 坂口和靖

Ser/Thr ホスファターゼPPM1D による好中球サブタイプの多様性制御

Ser/Thr 磷酸酶 PPM1D 对中性粒细胞亚型多样性的调节

• 发表时间: 2021
• 作者: 友田 千尋;矢野 陽;花島 慎弥;河村 奈緒子;安藤 弘宗;村田 道雄;Erwin London;後藤佑樹;鎌田瑠泉
• 通讯作者: 鎌田瑠泉

生細胞蛍光プローブTriazapentalene誘導体を用いた生細胞の刺激応答解析

使用活细胞荧光探针三氮杂戊二烯衍生物进行活细胞的刺激反应分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 崎谷愛未;鎌田瑠泉;池内和忠;谷野圭持;坂口和靖
• 通讯作者: 坂口和靖

p53ファミリー四量体形成ドメインの脊椎動物の進化における安定化機構

脊椎动物进化中p53家族四聚化结构域的稳定机制

• 发表时间: 2020
• 作者: 坂口周弥;中川夏美;鎌田瑠泉;James G. Omichinski;坂口和靖
• 通讯作者: 坂口和靖