骨格筋適応の性差を司るアンジオテンシン受容体制御機構の解明

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当該年度は、AT1Rの阻害剤であるロサルタンおよび組換え型アデノ随伴ウイルスベクターによる遺伝子導入法を用いて、AT1Rの阻害あるいは発現制御が筋萎縮過程における活性酸素種産生やタンパク質分解系のシグナル伝達の活性化に与える影響について、遺伝子・タンパクレベルで検討した。実験1：若齢のWistar系雄性・雌性ラットをプラセボ群およびロサルタン投与群に分け、7日間の尾部懸垂により筋萎縮を誘導した。ロサルタンは尾部懸垂開始直後に腹腔内（20 mg/kg）へ投与し、その後は実験終了まで自由飲水（0.3g/L）により摂取させた。尾部懸垂前、1日後および7日後に抗重力筋であるヒラメ筋を摘出した。その結果、尾部懸垂7日後の相対筋重量および筋線維横断面積は雄雌ともに低下したが、ロサルタン投与は雌ラットでのみ軽減効果を示した。また、雌ラットでは、尾部懸垂1日後にSmad2 /3のリン酸化状態によって評価されるCanonical TGF-βシグナル伝達経路の活性化が認められたが、ロサルタン投与群の雌ラットでは有意に低下した。実験2：若齢のWistar系雄性・雌性ラットを用いて、片脚のヒラメ筋に生理食塩水で希釈したAT1受容体ショートヘアピンRNAを注入することでAT1受容体遺伝子発現を低下させる処置を行った後、4週間の回復期間を設けて7日間の尾部懸垂により筋萎縮を誘導した。また、反対脚には生理食塩水のみを注入し、コントロールとした。尾部懸垂前、尾部懸垂1日後および7日後にAAV脚および対照脚からそれぞれヒラメ筋を摘出し、分析を行った。その結果、雌性ラットではAT1受容体の発現低下による筋萎縮の軽減が認められることを明らかにした。引き続き解析を行い、AT1受容体を介した性別特異的な筋萎縮抑制メカニズムについて明らかにする予定である。