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Integrated molecular basis for herpesvirus replication and pathogenesis

疱疹病毒复制和发病机制的综合分子基础

基本信息

批准号：
20H05692
负责人：
川口寧
金额：
$ 126.55万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-08-31 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H05692/
关键词：
単純ヘルペスウイルス感染の不均一性免疫・抵抗性因子回避機構ウイルスの細胞内輸送・粒子成熟感染享受 HSV SLC35E1 N型糖鎖修飾抵抗性因子回避機構免疫回避機構 Pcyt2 ホスファチジルエタノールアミンメクリジンケミカル・プロテオミクス AIM2 細胞内輸送・流星成熟機構宿主免疫回避機構

项目摘要

本申請課題では、研究代表者が長年の基礎研究で蓄積してきた様々な感染現象に関する知見を基盤に、先端的テクノロジーにより紐解く各感染現象を生体レベルのin depth解析に落とし込み、多階層的知見を単純ヘルペスウイルス(HSV)の増殖・病態発現機構の全体像として統合的に理解することを目標としている。今期は、以下の知見を解明した。1.イメージングとCRISPRスクリーニングを併用することで、HSV粒子の核膜通過を司る新規宿主因子として、Orphan transporter SLC35E1を同定した。SLC35E1が核膜間に出芽したウイルス粒子を包む小胞と核外膜間の融合段階に関与していたこと、SLC35E1のtransporter活性を司ると想定されるアミノ酸残基における変異導入(K142A)時、SLC35E1欠損と同様の表現系が認められたことから、核膜間領域への物質のやり取りが、効率的なHSV粒子の核膜通過に必要であることが示唆された。2.シングル・セルテクノロジーにより、HSV遺伝子発現の不均一性を生み出す宿主因子の有力な候補を得た。実際、候補宿主因子のKO細胞を樹立後、多段階のウイルス遺伝子発現をリアルタイムに可視化できる組換えHSVを用いて、HSV遺伝子発現を1細胞単位で詳細に解析することで、候補宿主因子がHSV遺伝子発現の不均一性を司ることを見出した。3. HSV主要エンベロープ蛋白質におけるN型糖鎖修飾が、中和抗体からの回避に関与することを解明した。今後は、ヒト・ガンマグロブリン投与マウスを用いて、本糖鎖修飾の生体レベルにおける役割の解明を試みる。また、変異HSVを用いたマウス病態解析モデルで得られた知見と想定される分子機構を突破口に、変異HSVとKOマウスを用いた病態解析を実施し、生体レベルにおけるHSV抵抗性因子とHSVによる回避機構を解明しつつある。

The subject of this application is to study the basic knowledge accumulated by research representatives over the years on infection phenomena, to explore the basic knowledge, to analyze the depth of each infection phenomenon, to analyze the depth of each infection phenomenon, to explore the comprehensive understanding of the growth and development mechanism of HSV. The following is an explanation of the current situation. 1. The new host factor for HSV particle nuclear membrane passage and Orphan transporter SLC35E1 are determined. SLC35 E1 has a similar behavior system when the SLC35E1 has a different acid residue (K142A) introduced into the nuclear membrane, and when the SLC 35 E1 transporter activity is determined, the HSV particles are included in the fusion stage between the nuclear membrane and the outer membrane. 2. The heterogeneity of HSV gene expression and the generation of powerful candidates for host factors are obtained. In fact, after candidate host factor KO cells are established, multi-stage HSV gene expression is visualized in a multi-cell format, HSV gene expression is analyzed in detail in a single cell format, and heterogeneity in HSV gene expression of candidate host factors is demonstrated. 3. HSV is mainly composed of N-type glycan modification, neutralizing antibody and avoidance protein. In the future, we will try to solve the problem of sugar chain modification in vivo. Pathological analysis of HSV resistance factors in organisms is performed using different HSV resistance factors.