Integrated molecular basis for herpesvirus replication and pathogenesis

疱疹病毒复制和发病机制的综合分子基础

基本信息

批准号：
20H05692
负责人：
川口寧
金额：
$ 126.55万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-08-31 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H05692/
关键词：
単純ヘルペスウイルス感染の不均一性免疫・抵抗性因子回避機構ウイルスの細胞内輸送・粒子成熟感染享受 HSV SLC35E1 N型糖鎖修飾抵抗性因子回避機構免疫回避機構 Pcyt2 ホスファチジルエタノールアミンメクリジンケミカル・プロテオミクス AIM2 細胞内輸送・流星成熟機構宿主免疫回避機構

项目摘要

本申請課題では、研究代表者が長年の基礎研究で蓄積してきた様々な感染現象に関する知見を基盤に、先端的テクノロジーにより紐解く各感染現象を生体レベルのin depth解析に落とし込み、多階層的知見を単純ヘルペスウイルス(HSV)の増殖・病態発現機構の全体像として統合的に理解することを目標としている。今期は、以下の知見を解明した。1.イメージングとCRISPRスクリーニングを併用することで、HSV粒子の核膜通過を司る新規宿主因子として、Orphan transporter SLC35E1を同定した。SLC35E1が核膜間に出芽したウイルス粒子を包む小胞と核外膜間の融合段階に関与していたこと、SLC35E1のtransporter活性を司ると想定されるアミノ酸残基における変異導入(K142A)時、SLC35E1欠損と同様の表現系が認められたことから、核膜間領域への物質のやり取りが、効率的なHSV粒子の核膜通過に必要であることが示唆された。2.シングル・セルテクノロジーにより、HSV遺伝子発現の不均一性を生み出す宿主因子の有力な候補を得た。実際、候補宿主因子のKO細胞を樹立後、多段階のウイルス遺伝子発現をリアルタイムに可視化できる組換えHSVを用いて、HSV遺伝子発現を1細胞単位で詳細に解析することで、候補宿主因子がHSV遺伝子発現の不均一性を司ることを見出した。3. HSV主要エンベロープ蛋白質におけるN型糖鎖修飾が、中和抗体からの回避に関与することを解明した。今後は、ヒト・ガンマグロブリン投与マウスを用いて、本糖鎖修飾の生体レベルにおける役割の解明を試みる。また、変異HSVを用いたマウス病態解析モデルで得られた知見と想定される分子機構を突破口に、変異HSVとKOマウスを用いた病態解析を実施し、生体レベルにおけるHSV抵抗性因子とHSVによる回避機構を解明しつつある。

基于主要研究者在多年基础研究中积累的各种感染现象所获得的知识，其目的是通过对感染现象进行的每一个深入分析，通过尖端技术将其揭示为生物学级别的深入分析，并提供对多层陈述的整体理解，并提供了整体式的图像，并提供了整体的理解。（HSV）。在这个财政年度，我们阐明了以下发现：1。通过结合成像和CRISPR筛选，孤儿转运蛋白SLC35E1被确定为负责HSV颗粒通过核膜的新型宿主因素。 SLC35E1参与了囊泡之间的融合阶段，这些囊泡包裹在核膜和核外膜之间萌芽的病毒颗粒，并在诱变（K142a）（K142a）中观察到SLC35E1的类似缺失，该氨基酸在氨基酸中应在氨基酸中进行启用，以使SLC35E的替代量的替代品的迁移量，该氨基酸均具有较大的启动量，该区域的迁移量是在SLC35E的范围内，该氨基酸的迁移率是在较大的诱变。 HSV颗粒通过核膜的传递。 2.单细胞技术为产生HSV基因表达异质性的宿主因子提供了潜在的候选者。实际上，在建立KO细胞为候选宿主因素之后，我们发现候选宿主因子在HSV基因表达中是通过使用重组HSV在HSV基因表达中的异质性，这些HSV可以实时可视化多阶段的病毒基因表达。 3。我们已经阐明了HSV主要包膜蛋白中的N型聚糖修饰参与避免中和抗体。将来，我们将尝试使用人γ-球蛋白处理的小鼠在生物学水平上阐明糖基化修饰的作用。此外，使用使用突变体HSV从小鼠病理分析模型获得的发现和预期的分子机制，我们现在使用突变体HSV和KO小鼠进行病理分析，并开始阐明生命体内HSV抗性因子和HSV的避免机制。

项目成果

期刊论文数量（28）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

単純ヘルペスウイルス感染の分子機構

单纯疱疹病毒感染的分子机制

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
Rho S.;Kobayashi I.;Oguri-Nakamura E.;Ando K.;Fujiwara M.;Kamimura N.;Hirata H.;Iida A.;Iwai Y.;Mochizuki N.;Fukuhara S.;川口　寧
通讯作者：
川口　寧

単純ヘルペスウイルスVP22のDNA結合能はウイルス感染によって誘導されるAIM2 inflammasome活性化からの回避に必須である

单纯疱疹病毒 VP22 的 DNA 结合能力对于逃避病毒感染诱导的 AIM2 炎性体激活至关重要