EBウイルスによる宿主細胞の腫瘍化初期過程の解析

EB病毒致宿主细胞致瘤的初始过程分析

• 批准号: 16021221
• 负责人: 川口 寧
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021221/
• 关键词: EBV; EBNA-LP; 不死化

本研究の目的は、EBVによる細胞の腫瘍化において極めて初期の段階に機能するこれらのウイルス因子に焦点を絞り、これらウイルス因子の機能発現機構を宿主細胞機構との相互作用の観点より解析することにより、新たな抗ウイルス剤開発や抗EBV戦略構築に向けての基礎的な知見を蓄積することにある。今年度は、EBNA-LPが発現することによって引き起こされる宿主細胞の変化を、マイクロアレイによって網羅的に解析し、EBNA-LPの新規機能の解明を試みた。以下の結果を得た。(i)レトロウイルスベクターを用いて、EBNA-LPを安定に発現するB細胞株およびコントロールの細胞株を樹立した。コントロールの細胞株およびEBNA-LP発現B細胞株5クローンを混ぜたものよりRNAを抽出し、マイクロアレイに供した。(ii)13,440個のヒト遺伝子をスクリーニングした結果、EBNA-LPの発現によって14個の宿主細胞遺伝子の発現が有意に変化することが明らかになった。その中で、最も発現が増強されたTARC遺伝子に焦点をあてた。TARC遺伝子は、Th2 typeのT細胞を特異的に遊走させるケモカインをコードしている。(iii)Northern解析およびELISA解析の結果、TARC遺伝子の発現が、転写およびタンパク質レベルでEBNA-LPによって増強されることを確認した。また、EBVをB細胞に感染させると、TARCの発現が増強することが明らかになった。(iv)幾つかのEBV陽性B細胞株について、TARCの発現を解析した。その結果、各細胞株のTARCの発現量は、機能的なEBNA-LPの発現と相関していた。以上の結果より、EBVがB細胞に感染するとケモカインTARCの発現が誘導され、その責任ウイルス因子はEBNA-LPであることが明らかになった。前述のように、TARCはTh2 T細胞を特異的に遊走させるケモカインである。Th2 T細胞は、B細胞を活性化するサイトカインを産生する。また、Th2 T細胞が産生するサイトカインは細胞性免疫に主要な役割を果たすTh1 T細胞を抑制することが知られている。EBV感染細胞においてEBNA-LPがTARCを誘導することによってTh2 T細胞が引き寄せられ、間接的に感染B細胞の増殖が刺激され、さらに、Th1 T細胞を抑制することによって感染細胞が宿主の細胞性免疫より回避されることが想像される。

The purpose of this study is to analyze the interaction between host cell and host cell in the early stages of EBV cell proliferation, and to develop and accumulate knowledge about EBV resistance. This year, EBNA-LP was developed in the context of host cell transformation, analysis of host cell networks, and interpretation of EBNA-LP's new functions. The following results were obtained. (i)A B cell line and a C cell line were established for the stable development of EBNA-LP. A B cell line was developed from EBNA-LP and a B cell line was isolated from EBNA-LP. (ii)13,440 gene expression results, EBNA-LP development and 14 host cell gene development were intentionally modified. In the middle of the game, the most important thing is to increase the focus of TARC. TARC gene, Th2 type T cell specific migration in the future (iii)Northern analysis and ELISA analysis results, TARC gene discovery, and identification of EBNA-LP gene enhancement. EBV infection, TARC development and growth are increasing. (iv)Several EBV positive B cell lines were detected and analyzed. The results showed that the expression of TARC in each cell line was correlated with the expression of EBNA-LP. These results indicate that EBV infection can be induced by TARC, and that EBNA-LP is responsible for TARC infection. TARC Th2 T cell specific migration Th2 T cells and B cells are activated. Th2 T cell production and suppression of Th1 T cells are important for cellular immunity. EBV-infected cells are induced by EBNA-LP and Th2 T cells are stimulated by indirect infection of B cells. Th1 T cells are inhibited by EBV-infected cells.

项目成果

Construction of recombinant herpes simplex virus type 1 expressing green fluorescence protein without loss of any viral genes.

构建表达绿色荧光蛋白且不丢失任何病毒基因的重组单纯疱疹病毒 1 型。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Virol. 78
• 作者: Harazaki;M.;et al.;M.Kanamori et al.
• 通讯作者: M.Kanamori et al.

Formation of aggresome-like structures in herpes simplex virus type 2-infected cells and a potential role in virus assembly.

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2004.06.010
• 发表时间: 2004-10
• 期刊: Experimental cell research
• 影响因子: 3.7
• 作者: N. Nozawa;Y. Yamauchi;K. Ohtsuka;Y. Kawaguchi;Y. Nishiyama

Herpes simplex virus type 1 UL51 protein is involved in maturation and egress of virus particles

• DOI: 10.1128/jvi.79.11.6947-6956.2005
• 发表时间: 2005-06-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Nozawa, N;Kawaguchi, Y;Nishiyama, Y
• 通讯作者: Nishiyama, Y

The HSV-2 membrane protein UL56 associates with the kinesin motor protein KIF1A.

HSV-2 膜蛋白 UL56 与驱动蛋白运动蛋白 KIF1A 结合。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Gen.Virol. 86
• 作者: Tamura K;Oue A;Tanaka A;Shimizu N;Takagi H;Kato N;Morikawa A;Hoshino H.;Ueda Takumi et al.;Sakakura Masayoshi et al.;T.Koshizuka et al.
• 通讯作者: T.Koshizuka et al.

Cell lines that support replication of a novel herpes simplex 1 UL31 deletion mutant can properly target UL34 protein to the nuclear rim in the absence of UL31.

支持新型单纯疱疹 1 UL31 缺失突变体复制的细胞系可以在没有 UL31 的情况下将 UL34 蛋白正确靶向核边缘。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Virology 329
• 作者: Tamura K;Oue A;Tanaka A;Shimizu N;Takagi H;Kato N;Morikawa A;Hoshino H.;Ueda Takumi et al.;Sakakura Masayoshi et al.;T.Koshizuka et al.;F.Shaku et al.;M.Tanaka et al.;L.Liang et al.
• 通讯作者: L.Liang et al.