EBウイルスによる宿主細胞の腫瘍化初期過程の解析

EB病毒致宿主细胞致瘤的初始过程分析

基本信息

批准号：
16021221
负责人：
川口寧
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021221/
关键词：
EBV EBNA-LP 不死化

项目摘要

本研究の目的は、EBVによる細胞の腫瘍化において極めて初期の段階に機能するこれらのウイルス因子に焦点を絞り、これらウイルス因子の機能発現機構を宿主細胞機構との相互作用の観点より解析することにより、新たな抗ウイルス剤開発や抗EBV戦略構築に向けての基礎的な知見を蓄積することにある。今年度は、EBNA-LPが発現することによって引き起こされる宿主細胞の変化を、マイクロアレイによって網羅的に解析し、EBNA-LPの新規機能の解明を試みた。以下の結果を得た。(i)レトロウイルスベクターを用いて、EBNA-LPを安定に発現するB細胞株およびコントロールの細胞株を樹立した。コントロールの細胞株およびEBNA-LP発現B細胞株5クローンを混ぜたものよりRNAを抽出し、マイクロアレイに供した。(ii)13,440個のヒト遺伝子をスクリーニングした結果、EBNA-LPの発現によって14個の宿主細胞遺伝子の発現が有意に変化することが明らかになった。その中で、最も発現が増強されたTARC遺伝子に焦点をあてた。TARC遺伝子は、Th2 typeのT細胞を特異的に遊走させるケモカインをコードしている。(iii)Northern解析およびELISA解析の結果、TARC遺伝子の発現が、転写およびタンパク質レベルでEBNA-LPによって増強されることを確認した。また、EBVをB細胞に感染させると、TARCの発現が増強することが明らかになった。(iv)幾つかのEBV陽性B細胞株について、TARCの発現を解析した。その結果、各細胞株のTARCの発現量は、機能的なEBNA-LPの発現と相関していた。以上の結果より、EBVがB細胞に感染するとケモカインTARCの発現が誘導され、その責任ウイルス因子はEBNA-LPであることが明らかになった。前述のように、TARCはTh2 T細胞を特異的に遊走させるケモカインである。Th2 T細胞は、B細胞を活性化するサイトカインを産生する。また、Th2 T細胞が産生するサイトカインは細胞性免疫に主要な役割を果たすTh1 T細胞を抑制することが知られている。EBV感染細胞においてEBNA-LPがTARCを誘導することによってTh2 T細胞が引き寄せられ、間接的に感染B細胞の増殖が刺激され、さらに、Th1 T細胞を抑制することによって感染細胞が宿主の細胞性免疫より回避されることが想像される。

这项研究的目的是关注这些病毒因素，这些因素在EBV诱导的肿瘤发生的早期阶段起作用，并从与宿主细胞机制的相互作用的角度分析这些病毒因子的功能表达的机制，从而积累了新的抗病毒药物质和抗eebv策略的发展的基本知识。今年，我们全面分析了使用微阵列EBNA-LP表达引起的宿主细胞变化，以阐明EBNA-LP的新功能。获得以下结果：（i）使用逆转录病毒载体，B细胞系和对照细胞系稳定地表达EBNA-LP。从对照细胞系的混合物和5个表达EBNA-LP的B细胞系中提取RNA，并进行微阵列。（ii）筛选13,440个人基因表明，EBNA-LP的表达显着改变了14个宿主细胞基因的表达。其中，重点是TARC基因，该基因的表达最高。 TARC基因编码特异性迁移Th2型T细胞的趋化因子。（iii）北部和ELISA分析证实，在转录和蛋白质水平上，EBNA-LP增强了TARC基因的表达。还揭示了感染EBV增强TARC表达的B细胞。（iv）分析了几种EBV阳性B细胞系的TARC表达。结果，每个细胞系中TARC的表达水平与功能性EBNA-LP的表达相关。以上结果表明，当EBV感染B细胞时，诱导了趋化因子TARC的表达，该病毒的负责病毒因子为EBNA-LP。如上所述，TARC是一种专门迁移Th2 T细胞的趋化因子。 Th2 T细胞产生激活B细胞的细胞因子。此外，已知由Th2 T细胞产生的细胞因子抑制Th1 T细胞，在细胞介导的免疫中起主要作用。可以预见的是，EBNA-LP在EBV感染的细胞中诱导TARC吸引Th2 T细胞，间接刺激感染的B细胞的增殖，并抑制Th1 T细胞以避免受宿主的细胞介导的免疫力感染细胞。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Formation of aggresome-like structures in herpes simplex virus type 2-infected cells and a potential role in virus assembly.

DOI：
10.1016/j.yexcr.2004.06.010
发表时间：
2004-10
期刊：
Experimental cell research
影响因子：
3.7
作者：
N. Nozawa;Y. Yamauchi;K. Ohtsuka;Y. Kawaguchi;Y. Nishiyama
通讯作者：
N. Nozawa;Y. Yamauchi;K. Ohtsuka;Y. Kawaguchi;Y. Nishiyama

Construction of recombinant herpes simplex virus type 1 expressing green fluorescence protein without loss of any viral genes.

构建表达绿色荧光蛋白且不丢失任何病毒基因的重组单纯疱疹病毒 1 型。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
J.Virol. 78
影响因子：
0
作者：
Harazaki;M.;et al.;M.Kanamori et al.
通讯作者：
M.Kanamori et al.

The HSV-2 membrane protein UL56 associates with the kinesin motor protein KIF1A.

HSV-2 膜蛋白 UL56 与驱动蛋白运动蛋白 KIF1A 结合。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
J.Gen.Virol. 86
影响因子：
0
作者：
Tamura K;Oue A;Tanaka A;Shimizu N;Takagi H;Kato N;Morikawa A;Hoshino H.;Ueda Takumi et al.;Sakakura Masayoshi et al.;T.Koshizuka et al.
通讯作者：
T.Koshizuka et al.

Cell lines that support replication of a novel herpes simplex 1 UL31 deletion mutant can properly target UL34 protein to the nuclear rim in the absence of UL31.

支持新型单纯疱疹 1 UL31 缺失突变体复制的细胞系可以在没有 UL31 的情况下将 UL34 蛋白正确靶向核边缘。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Virology 329
影响因子：
0
作者：
Tamura K;Oue A;Tanaka A;Shimizu N;Takagi H;Kato N;Morikawa A;Hoshino H.;Ueda Takumi et al.;Sakakura Masayoshi et al.;T.Koshizuka et al.;F.Shaku et al.;M.Tanaka et al.;L.Liang et al.
通讯作者：
L.Liang et al.