ウイルスプロテインキナーゼによる宿主細胞制御とそれに基づくウイルス増殖機構の解析

病毒蛋白激酶对宿主细胞控制的分析及基于其的病毒繁殖机制

基本信息

批准号：
19041017
负责人：
川口寧
金额：
$ 5.5万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19041017/
关键词：
ヘルペスウイルスプロテインキナーゼ

项目摘要

ヘルペスウイルスはプロテインキナーゼ(PK)をコードしており、宿主細胞因子やウイルス因子をリン酸化し、その活性を制御することによって効率的なウイルスの増殖・生存および病原性に関与している。また、ウイルスPKはウイルス特異酵素であるので、抗ウイルス剤開発の理想的な標的でもある。本研究では、申請者らが世界に先駈けて確立したヘルペスウイルスPKの試験管内アッセイ系を利用して、ウイルスPKの標的宿主細胞因子および標的ウイルス因子を網羅的にスクリーニングすることによって同定し、それらリン酸化の感染細胞における生物学的意義を解析する。これらの解析を通じてウイルスPKによる宿主細胞制御機構およびそれに基づくウイルス増殖調節機構の全体像を明らかにすることを目的と。本年度は、以下の結果を得た。(i)単純ヘルペスウイルス(HSV)がコードするPKUs3の新規基質としてエンベロープ糖蛋白質gBを同定した。(ii)gBのUs3によるリン酸化部位として887番目のスレオニンを同定した。(iii)gBのリン酸化部位の変異体を用いた解析より、Us3によるリン酸化によってgBの細胞表面の発現量が制御されていることが明らかになった。Us3の自己リン酸化は感染細胞の形態を制御していた。以上、Us3PKの機能発現機構の一端を解明し、Us3の新規機能としてメンブレントラフィックを制御していることが明らかになった。

疱疹病毒编码蛋白激酶（PK），并通过宿主细胞和病毒因子的磷酸化并控制其活性参与有效的病毒增殖，存活和致病性。病毒PK也是抗病毒剂的理想靶标，因为它们是病毒特异性酶。在这项研究中，我们使用我们在全球范围内建立的疱疹病毒PK的体外测定系统，通过全面筛查和分析感染细胞中其磷酸化的生物学意义来鉴定靶宿主细胞因子和靶向病毒PK的病毒因子。通过这些分析，目的是阐明病毒PK的宿主细胞调节机制的总体图表以及基于它们的病毒增殖调节机制。今年，获得了以下结果：（i）包膜糖蛋白GB被确定为PKUS3的新型底物，该底物由单纯疱疹病毒（HSV）编码。（ii）在887位的苏氨酸被US3鉴定为GB的磷酸化位点。（iii）在GB的磷酸化位点使用突变体的分析表明，US3磷酸化控制了细胞表面GB的表达水平。 US3的自磷酸化调节感染细胞的形态。这揭示了US3PK表达机制的一部分，并揭示了它是控制膜流量的US3的新功能。