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非侵襲生体イメージング法による生体内修復機構の解明：次世代DSBセンサーマウス

利用非侵入性生物成像方法阐明体内修复机制：下一代 DSB 传感器小鼠

基本信息

批准号：
18K11653
负责人：
小池学
金额：
$ 2.91万
依托单位：
National Institutes for Quantum Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K11653/
关键词：
Ku70 DSB XLF NHEJ Live cell imaging

项目摘要

放射線により誘発されたDNA二本鎖切断損傷(DSB)は生体にとって最も重篤なDNA損傷であり、修復することができなかった場合には細胞死や細胞老化などの原因に、また、もし正確に修復できなかった場合には変異や発がんの原因になりうる。ヒトや齧歯類の培養細胞などを用いた解析の結果から、哺乳類の細胞ではDSBは、主に、非相同末端結合(NHEJ)と相同組換え(HR)の2つの機構によって修復するとされている。一方、生体内では、DSBを修復する2つの機構はより複雑な調節を受けていると予想されるが、損傷直後から始まる修復過程を生体内で検出する方法は未開発であるため、ほとんど情報がない。最近、私達はNHEJ機構を生体皮膚で検出し、トレースするためのDSBセンサーマウスの開発に成功した。本研究では新たな次世代DSB修復センサーマウスを開発し、生体内で損傷直後から始まるDNA修復の分子機構を非侵襲的にリアルタイムに解析することを通じて、DNA修復に関わる未解明な生理的意義を提示したいと考えている。本年度は、マウスにおけるDSB修復蛋白質の発現解析等を行うために、これまでの結果と論文情報等を基にマウス培養細胞等を材料に新たな抗体等を用いて、ひき続き固定法などの検出条件や抗体の特異性などについて検討を行った。また、新たな分子について損傷直後から始まるDNA修復の分子機構を非侵襲的にリアルタイムに解析するための予備実験と新たなマウス作成のための予備実験を進めた。

Radiation-induced DNA double-lock cleavage damage (DSB) is the cause of cell death and cell aging in the case of most severe DNA damage and repair in vivo. The results of the analysis of DSB, NHEJ and HR in cultured mammalian cells showed that DSB, NHEJ and HR in cultured mammalian cells could be repaired. 1. In vivo, DSB repair 2. The mechanism of DSB repair 2. Recently, NHEJ has successfully developed its own DSB system. This study provides new insights into the physiological significance of DNA repair in the next generation of DNA repair, and the molecular mechanisms for DNA repair in vivo. This year, DSB repair protein production analysis, etc., research results, paper information, etc., basic culture cells, etc., new antibodies, etc., use, fixation method, detection conditions, antibody specificity, etc., research. DNA repair molecular mechanism is not invasive, but it is prepared to be analyzed.