ポリオ経口生ワクチンを利用した組織特異性を持つRNA発現ベクタ-の開発

使用脊髓灰质炎口服活疫苗开发组织特异性 RNA 表达载体

• 批准号: 01870101
• 负责人: 野本 明男
• 金额: $ 9.92万
• 依托单位: The University of Tokyo (1991)Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research (1989-1990)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01870101/
• 关键词: ポリオウイルス; キメラウイルス; CATmRNA; RNAレプリコン; RNA発現ベクタ-; A型肝炎ウイルス; 中和抗体; エピト-プ; 感染性cDNA; DI粒子; トランスフェクション; 組織特異性; 変異RNA; 外来mRNA

昨年度までに、ポリオウイルスRNAは、カプシド蛋白質コ-ディング領域を欠損させても、欠損部位下流のウイルス蛋白質合成のフレ-ムに変化が生じなければ、RNAレプリコンとしての活性を持ち、しかも約6.0Kb以上の長さがあれば、ウイルス粒子中に取り込まれることを明らかにした。また欠損したゲノム領域の代りに外来mRNAとしてCAT(クロラムフェニコ-ルアセチルトランスフェラ-ゼ)mRNAを組み込むと、CATmRNAをゲノムの一部として持つ変異ポリオウイルス粒子を作製することが出来、そのウイルスが感染した細胞中にはCATが産生されることを明らかにした。本年度は、ポリオウイルスベクタ-の性質をさらに解明する研究を推進させると同時に、最終年度であるためA型肝炎ウイルス抗原の発現実験を行った。1.変異ポリオウイルス作製のための知見をさらに得るために、スタンダ-ドウイルスRNAのカプシド蛋白質コ-ディング領域に約660塩基のCATmRNAをコ-ディングフレ-ムを壊わさぬように挿入した。このRNAはRNAレプリコンとしての活性を持ち、スタンダ-ドウイルスの重感染により、ウイルス粒子内にも取り込まれた。しかしながら継代を繰り返すと、スタンダ-ドウイルスによって急速に駆逐されてしまうことが明らかとなった。以上の結果は、ポリオウイルスのゲノムRNAとしては短い方が複製効率が高いことを示唆している。2.A型肝炎ウイルスの抗原をコ-ドするゲノムRNA領域をポリオウイルスベクタ-に組み込んだキメラウイルスを感染させた細胞内にA型肝炎ウイルス抗原の発現が観察された。しかしながら、この抗原は中和単クロ-ン抗体には認識されず、中和のエピト-プの活性は持っていなかった。サルヘも投与したが中和抗体は得られなかった。

Last year, in the field of RNA, protein, protein and protein. In the field of foreign mRNA, the CAT (extraneous CAT infection), the CAT infection, the infection. This year's study has promoted the detection of hepatitis A virus antigens in the same period and this year. 1. I am sorry to hear that I am aware that I have received information that I have learned that I am not aware of the cost of RNA. I am aware of the fact that the area of interest is about 660 yuan. I need to know that I have received a lot of money in the field of CATmRNA. "RNA", "RNA", "active", "active", "severe infection", "severe infection", "intra-particle infection", "anti-infection". I don't know if I'm going back. I'm sorry. I'm sorry. The above results show that the RNA is very short and the copy rate is very high. 2. Hepatitis A, hepatitis A, antigens, hepatitis An antigens, hepatitis An antigens. Antigens, antigens The neutralizing antibody was injected into the mouse to get the antibody.

项目成果

Kyoko Tsukiyama-Kohara: "A second group of hepatitis C virus" Virus Genes. 5. 243-254 (1991)

Kyoko Tsukiyama-Kohara：“第二组丙型肝炎病毒”病毒基因。

Yoshiyuki Takahara: "Purification of enzymatically active poliovirus proteinase 3C produced in Escherichia coli." Gene. 79. 249-258 (1989)

Yoshiyuki Takahara：“纯化大肠杆菌中产生的具有酶活性的脊髓灰质炎病毒蛋白酶 3C。”

Narushi Iizuka: "Construction of less neurovirulent polioviruses by introducing doletions into the 5′noncoding sequence of the genome." Journal of Virology. 63. 5354-5363 (1989)

Narushi Iizuka：“通过在基因组 5 非编码序列中引入修饰来构建神经毒性较低的脊髓灰质炎病毒。”《病毒学杂志》63. 5354-5363 (1989)

Noriyuki Kawamura: "Determinants in the 5′noncoding region of poliovirus Sabin1 RNA that influence the attenation phenotype." Journal of Virology. 63. 1302-1309 (1989)

Noriyuki Kawamura：“脊髓灰质炎病毒 Sabin1 RNA 5非编码区影响减毒表型的决定因素。”病毒学杂志 63. 1302-1309 (1989)

Shusuke Kuge: "Strong inclination toward trarsition mutation in nucleotide substitutions by poliovirus replicase" Journal of Molecular Viology. 207. 175-182 (1989)

Shusuke Kuge：“脊髓灰质炎病毒复制酶在核苷酸取代中强烈倾向于转移突变”《分子病毒学杂志》。