Exploitation of a tool for analyzing molecular interactions on the plasma membrane by using membrane-bound antibodies

利用膜结合抗体分析质膜上分子相互作用的工具

• 批准号: 23657142
• 负责人: TAIRA Masanori
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23657142/
• 关键词: 膜結合型抗体; 一本鎖抗体; 細胞間架橋; 力学的相互作用; 抗原抗体反応; 分子間相互作用; 細胞間張力; 張力センサーモジュール; 細胞運動

We cloned cDNAs for anti-HA and anti-Myc monoclonal antibodies, and made membrane-bound antibody constructs, which were verified to function as antibodies against HA- and Myc-tagged proteins. We further made single-stranded antibodies, which were verified to function as antibodies. Using membrane-bound antibodies, we next tried to measure the tension between two adjacent cells in Xenopus embryos by using the FRET-based tension sensor module (TSMod). In addition, we found that development of Xenopus gastrulae is affected when cells are bridged with the membrane-bound antibodies and membrane-bound antigens. This bridging method can be used as a tool for investigation of intercellular plasticity during morphogenesis.

我们克隆了抗HA和抗Myc单克隆抗体的cDNA，并制备了膜结合的抗体构建体，经验证其作为抗HA和Myc标记蛋白的抗体发挥作用。我们进一步制备了单链抗体，证实其具有抗体功能。使用膜结合抗体，我们接下来尝试使用基于FRET的张力传感器模块（TSMod）测量非洲爪蟾胚胎中两个相邻细胞之间的张力。此外，我们发现，非洲爪蟾原肠胚的发展受到影响时，细胞与膜结合的抗体和膜结合的抗原桥接。这种桥接方法可作为研究形态发生过程中细胞间可塑性的工具。

项目成果

Heparan sulfate nanostructures regulate extracellular Wnt distribution and act asa core for Wnt/Dishevelled signalosome formation

硫酸乙酰肝素纳米结构调节细胞外 Wnt 分布并充当 Wnt/散乱信号体形成的核心

• 发表时间: 2012
• 作者: Yukihiko Kubota;Yusuke Takabayashi;Rika Maruyama;Asako Sugimoto;Masanori Taira and Yusuke Mii
• 通讯作者: Masanori Taira and Yusuke Mii

Heparan sulfate nanostructures regulate extracellular Wnt distribution and act as a core for Wnt/Dishevelled signalosome formation

硫酸乙酰肝素纳米结构调节细胞外 Wnt 分布并充当 Wnt/散乱信号体形成的核心

• 发表时间: 2012
• 作者: 村田昌之;加納ふみ;山本(日野)美紀;Yusuke Mii
• 通讯作者: Yusuke Mii

Xenopusの眼の初期形成に関わるOtx2の活性調節におけるC2H2型Znフィンガー蛋白質Zbtb11とZnf668の役割

C2H2型锌指蛋白Zbtb11和Znf668在调节爪蟾早期眼形成中Otx2活性中的作用

• 发表时间: 2011
• 作者: 佐藤夢子;柴野卓志;儘田博志;安岡有理;高橋秀治;浅島誠;平良眞規
• 通讯作者: 平良眞規

Secreted Frizzled-related proteins (sFRPs) regulate extracellular distribution of Wnt ligands via interactions with heparan sulfate.(分泌性 Frizzled 関連蛋白質 (sFRPs) はヘパラン硫酸を介して細胞外の Wnt リガンドの分布を制御する。)

分泌性卷曲相关蛋白 (sFRP) 通过与硫酸乙酰肝素的相互作用来调节 Wnt 配体的细胞外分布。

• 发表时间: 2011
• 作者: Yusuke Mii;Kenichi Nakazato;Atsushi Mochizuki and Masanori Taira
• 通讯作者: Atsushi Mochizuki and Masanori Taira

The molecular entity of positional information revealed by ChIP-sequence analysis for Lim1 and Otx2 in the head organizer and its application for evolutionary analysis

ChIP 序列分析揭示头部组织中 Lim1 和 Otx2 位置信息的分子实体及其在进化分析中的应用

• 发表时间: 2012
• 作者: Yuuri Yasuoka;Norihiro Sudou;Shuji Takahashi;Yukiko Tando;Yutaka Suzuki;Sumio Sugano;Kaoru;Kubokawa;Makoto Asashima;Masanori Taira
• 通讯作者: Masanori Taira