膜タンパク質を利用した肺腺がん早期診断マーカーの獲得と実用化に向けた基礎的検討

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肺がん全体の半数以上を占めている腺がんは特有の症状がないまま進行するため、身近な検査で早期がんを検出可能なマーカーの獲得が求められている。膜タンパク質は細胞外に分泌される分子も多く存在することから血清診断マーカーとして有用である。本研究では新たな診断マーカーとなり得る候補分子の探索のため、膜タンパク質に焦点を当てたショットガン解析を行い、肺腺がん細胞特異的に発現している膜タンパク質を網羅的に同定した。以下に実施した概要を示す。異なる3種類の肺がん細胞株（腺がん由来：A549細胞、扁平上皮がん由来：RERF-LC-AI細胞、小細胞がん由来：N231細胞）それぞれに対して、細胞表面タンパク質単離キットを使って膜タンパク質を回収した。これらの回収した膜タンパク質分画は質量分析装置を用いたショットガン解析を行うことにより、網羅的にタンパク質を同定した。その結果、それぞれ1100個、1742個、1193個のタンパク質が同定された。このうち、3種類の細胞すべてにおいて同定されたタンパク質は549個あり、A549細胞のみに同定されたタンパク質は254個、RERF-LC-AI細胞では630個、N231細胞では214個であった。また、細胞膜局在が報告されている膜タンパク質は、それぞれ71個、91個、53個であった。同定された膜タンパク質のうち、A549細胞にだけ発現していた膜タンパク質にはIntegrin beta-4（ITGB4）やATP-binding cassette sub-family C（ABCC3）などが含まれていた。今後、これらの同定されたタンパク質について肺腺がん細胞での発現と細胞外への分泌を確認し、さらに組織診断、並びに血清診断マーカーとしての有用性についても検討を行う。