転写因子TFAP2Eによる口腔がん細胞の細胞周期制御機構の解明

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転写因子TFAP2Eは多くの悪性腫瘍においてがん抑制遺伝子として機能していることが知られているが、その作用機序については不明な点が多い。最近私は、口腔がん細胞におけるTFAP2Eの発現を抑制すると、細胞増殖速度が進行すること、さらにそれがG2/M期の進行速度の増大の結果生じていることを見出した。また、この現象がTP53変異型細胞に特徴的であり、野生型TP53を持つ細胞では観察されなかったことから、TFAP2EがTP53の関与するシグナル伝達経路に作用して細胞周期を制御している可能性が考えられた。そこで本研究ではTFAP2Eによる細胞周期制御の詳細な分子機序を解明することを目的とし、特にTP53との関連に焦点を当てて研究を開始した。令和4年度は、TP53変異型細胞であるHSC4にTFAP2E shRNAまたはコントロールshRNAを導入し、安定発現クローンを複数樹立した。これらの細胞の細胞増殖速度を調べたところ、TFAP2Eノックダウン(KD)群細胞ではコントロールと比較して明らかに細胞増殖速度が亢進していた。一方、シスプラチンや活性酸素を投与し、その後の生存率を調べたところ、大きな違いは見られなかった。なお、細胞周期解析のためにこれらのクローンを二重チミジン法でG1期に同期させ、その後の細胞周期の進行を調べる実験を試みたが、この細胞ではG1期への同期ができなかった。次に、既にTFAP2E KD株を作成済みのCa9-22細胞にTFAP2Eを安定的に過剰発現させ、同様の機能解析を行った。その結果、ストレス耐性には変化は見られなかったが、KDした場合とは逆に、細胞増殖速度の低下とG2/M期の進行速度の低下が確認できた。