急性相反応蛋白質の糖鎖分析による炎症の病態解析

通过急性期反应蛋白的聚糖分析进行炎症病理学分析

• 批准号: 12771479
• 负责人: 飯島 史朗
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12771479/
• 关键词: 急性相反応蛋白質; 糖蛋白質; 等電点電気泳動; 手術; 炎症; レクチン; ミクロヘテロジェニティー

急性相反応蛋白糖鎖構造変化の検出が、炎症の病態解析に有用であるか確認し、炎症の病態を反映する糖鎖構造変化を迅速に測定する方法を確立することを目的として研究を遂行した。平成13年度は、昨年度明らかとした炎症の病態変化に伴い蛋白質結合糖鎖構造変化(α2-6結合したシアル酸を持つアスパラギン型低分岐の糖鎖、糖鎖末端にα2-3結合したシアル酸を持つ糖鎖3本鎖、4本鎖のアスパラギン型複合型糖鎖)を簡便にとらえるためのELISA法の開発を試みた。ELISA法の開発に先立ち、上記の糖鎖が結合している蛋白質を検索した結果、α1-酸性糖蛋白質、α1-アンチキモトリプシンに多く見られたことより、これらの蛋白質の糖鎖構造変化をとらえる方法とすることとした。ELISA法の測定条件を検討した結果、ブロッキング剤としてはTris-HCl-NaCl緩衝液が、抗体に結合している糖鎖の影響については、過よう素酸処理とレクチンマスクの併用により良好な結果が得られることがわかった。上記検討したELISA法を用いて、急性相反応蛋白質糖鎖構造が手術後の治癒過程においてどのように変化するか、ConA, DSA, LCA, PHA-L4,PHA-E4,SSA, MAM, AALレクチンを用いて検討した。その結果α1-酸性糖蛋白質ではSSA/ConA比が炎症の極期で低下し、炎症の回復期では上昇した。α1-アンチキモトリプシンでは、SSA/ConA比およびDSA/ConA比がα1-酸性糖蛋白質と同様に炎症の極期で低下し炎症の回復期では上昇した。また、PHA-E4/LCA比では、手術直後に上昇した。以上の結果より、SSA/ConA比およびDSA/ConA比は、炎症の病態把握に、PHA-E4/LCA比は、急性炎症の検出に有用であることが予想された。以上の結果より、急性相反応蛋白質の糖鎖構造解析が、CRPとは異なる炎症マーカーとしての可能性が示唆された。

To establish a method for rapid determination of glycan structure changes in acute reverse phase proteins and for pathological analysis of inflammation The pathological transformation of inflammation in Heisei 13 was accompanied by protein-binding glyco-lock structural changes (α2-6 binding to allelic acid, α 2-3 binding to allelic acid, α 2 binding to allelic acid, α2-3 binding to allelic acid, α 2 binding to allelic acid, The development of ELISA method is based on the analysis of protein binding, α1-acid glycoprotein, α1-acid glycoprotein, α 2-acid glycoprotein, α1-acid glycoprotein, α 2-acid glycoprotein, α1-acid glycoprotein, α1 ELISA assay conditions were investigated and the results were good. The results were obtained by using Tris-HCl-NaCl buffer and antibody binding. In the above discussion, the use of ELISA method and acute reverse transcription protein glycan lock structure in the post-operative healing process was discussed. ConA, DSA, LCA, PHA-L4,PHA-E4,SSA, MAM, AAL glycan lock structure was also discussed. As a result, SSA/ConA ratio of α1-acid glycoprotein decreased during the critical period of inflammation and increased during the recovery period of inflammation.α1-acid glycoprotein decreased during the peak period of inflammation and increased during the recovery period. SSA/ConA ratio decreased during the peak period of inflammation and DSA/ConA ratio decreased during the recovery period. PHA-E4/LCA ratio increases after surgery These results include SSA/ConA ratio, DSA/ConA ratio, pathological diagnosis of inflammation, PHA-E4/LCA ratio, and acute inflammation detection. The above results indicate the possibility of acute anti-CRP protein glycan structure analysis and inflammation.