遺伝子多型解析によるサリドマイドの至適投与量の設計及び薬物動態に関する情報の構築

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1. 研究目的:サリドマイドは、非酵素的に加水分解を受けやすいとされる化合物であるが、一部はCYP2C19によって代謝されることが報告されている。遺伝子多型解析において、CYP2C19はアジア人の約20%に欠損が見られるため、患者によって血中濃度に差が出ることが推察される。本研究は、CYP2C19遺伝子多型解析とサリドマイド血中濃度測定法を確立し、サリドマイド服用患者の血中濃度の推移について検討した。2. 研究方法:全血を用いた効率的なCYP2C19遺伝子多型解析方法(PCR-RFLP法)について検討した。血中濃度については、最初にHPLCによるサリドマイドのR及びS体の分離条件の検討を行った。患者からの採血については、サリドマイド内服直前及び内服1、2、3、4、6、8、12及び24時間後に行い、濃度を測定した。3. 研究結果:CYP2C19遺伝子は、ポリメラーゼとして増幅性に優れ、前処理を必要としないKOD FXを用いることで、容易にしかも高感度に増幅可能となった。多型解析は、増幅したCYP2C19遺伝子をSmaI(CYP2C19^*2)及びBamHI(CYP2C19^*3)にて処理することにより容易に解析可能となった。サリドマイドのR及びS体の分離は、カラムにCHIRAL PAK AD-RHを、移動相に水:アセトニトリル=75:25混合溶媒を用いることで良好に分離できた。検量線は、両異性体とも0から10μg/mLの範囲で良好な直線性が得られた。サリドマイドを1日当たり100mg連日投与している患者において、R及びS体両方とも内服後約6時間でC_<max>に達し、R体で0.24μg/mL、S体で0.17μg/mLであった。また、トラフとなる24時間後はR体で0.03μg/mL、S体で0.05μg/mLであった。本患者の遺伝子型はCYP2C19^*1/^*3であったことから、平均的な代謝能力を有するものと推察される。CYP2C19遺伝子多型解析と血中濃度測定法が確立できたことから、遺伝子多型と血中濃度との関連について今後ともデータの蓄積を行い、薬物療法に活かしていきたいと考えている。